国家自然科学基金(30170928) 作品数:9 被引量:25 H指数:3 相关作者: 卢绮萍 张智勇 陈孝平 李德忠 曹钧 更多>> 相关机构: 广州军区武汉总医院 华中科技大学 南方医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
胰岛素样生长因子-Ⅰ在肝缺血再灌注不同时限的表达及意义 被引量:2 2008年 目的观察肝缺血再灌注不同时限中胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)及细胞凋亡蛋白酶-3(Caspase-3)的表达特点并探讨IGF-Ⅰ与肝脏功能及细胞凋亡的关系。方法75只大鼠分为正常对照组、假手术组及缺血再灌注组,每组25只。采用免疫组化方法检测IGF-Ⅰ及Caspase-3的表达,并采用全自动生化仪检测AST、ALT水平,以光学显微镜及电子显微镜观察组织形态学变化。结果肝缺血45 min再灌注后IGF-Ⅰ表达水平在再灌注3、12、24 h 3组降低,与同期对照组和假手术组差异有统计学意义(P<0.01),不同肝组织结构表达水平亦不同。Caspase-3缺血45min再灌注3h时表达开始增多,在24h组表达水平最高,与对照组和假手术组差异有统计学意义(P<0.01),至72h表达水平接近于正常组(P>0.05)。外周血清AST、ALT浓度在再灌注后0、3、12、24h较同期正常对照及假手术组高(P<0.01),72min接近正常。结论IGF-Ⅰ可以作为肝脏缺血再灌注时反映肝脏功能的一项指标,它在此期不同时限的表达具有空间特异性,并有可能对缺血再灌注损伤引发的细胞凋亡有拮抗作用。 王直 卢绮萍 李德忠 曹钧 于超关键词:缺血再灌注 肝功能 凋亡 大鼠肝脏缺血再灌注过程中信号转导与转录激活子1的表达变化及其意义 被引量:2 2009年 目的观察JAK—STAT信号通路蛋白STAT1和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3在大鼠肝脏缺血再灌注不同时限的表达及丹参对两者表达的影响。方法将80只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、缺血再灌注组和丹参组,建立肝缺血再灌注模型,采用免疫组织化学方法检测STAT1及Caspase-3在肝缺血45min再灌注0、3、12、24、72h时的表达。结果STAT1、Caspase-3在正常及假手术组中未见明显表达。缺血再灌注组STAT1在再灌注0h即有表达(PU=10.29±0.92),再灌注12—24h表达最明显(PU=38.73±1.59~38.90±2.29),Caspase-3在再灌注0h亦有表达(PU=8.18±0.95),峰值出现在再灌注24h(PU=38.06±2.85)。丹参组STAT1在各时限点均较同期缺血再灌注组低(P〈0.05),除再灌注72h外丹参组Caspase-3在各时限点均较同期缺血再灌注组低(P〈0.05)。结论STAT1在大鼠肝缺血再灌注损伤中被激活,丹参可能通过抑制STAT1的表达减轻缺血再灌注对肝的损伤。 廖喜望 卢绮萍 李德忠 张智勇关键词:肝脏 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 再灌注损伤 人肝热缺血安全时限的基因芯片分析 被引量:3 2004年 目的 探讨人肝不同缺血时限细胞凋亡相关基因的多基因表达模式和差异表达 ,为掌握肝缺血安全时限提供科学依据。方法 应用基因芯片表达谱技术观测正常人肝组织与肝缺血 15min(组一 )、30min(组二 )及肝缺血 15min与 30min(组三 )相比较细胞基因表达状况 ,对 2 0 0点特异性凋亡相关基因差异表达进行分析比较。结果 肝缺血 0~ 15min ,凋亡相关基因的表达基本处于低表达或正常表达水平 ,表达明显上调的的差异表达基因主要为调节细胞内环境稳定的基因 ;而至肝缺血 30min ,各种维系细胞和细胞器内环境稳定的调控基因表达水平明显下降 ,多种促凋亡发生的相关基因、诱导凋亡发生的核转录因子则明显活化、表达上调。结论 一般而言 ,人肝一次热缺血时限以尽量不超过 卢绮萍 曹廷加关键词:肝缺血 肝热缺血 基因芯片 调控基因表达 促凋亡 大鼠肝缺血及再灌注所致肠黏膜损伤及丹参的保护作用 被引量:3 2009年 目的研究大鼠肝缺血再灌注小肠黏膜损伤及丹参预处理的保护作用。方法在肝缺血45min条件下,动物随机分为四组,正常对照组(CO组)、假手术组(SO组)、缺血再灌注组(IR组)、丹参预处理组(SM组),按再灌注后不同时间(0、3、12、24、72h)分为5个亚组,每组5只。SM组在阻断第一肝门30min前经尾静脉推注丹参注射液6g/kg加生理盐水40ml/kg,其余各组按40ml/kg给予生理盐水尾静脉注入,SO组开腹后仅解剖肝门,不钳夹肝蒂。分别在再灌注0、3、12、24、72h取上段空肠行病理学检查、二胺氧化酶(DAO)活性测定、肠系膜淋巴结菌群易位检查。结果在肝缺血45min再灌注不同时限点SM组空肠黏膜损伤较IR组明显减轻,且肠组织DAO活性、肠系膜淋巴结细菌培养阳性率均低于IR组(P〈0.05)。结论在肝缺血再灌注损伤中小肠有明显淤血性损伤,DAO活性明显下降,肠系膜淋巴结细菌培养率明显上升,丹参预处理对肝缺血再灌注所致小肠黏膜损伤具有保护作用。 张智勇 陈孝平 卢绮萍关键词:肝缺血再灌注 丹参 二胺氧化酶 肝脏缺血再灌注时肝脏及小肠组织中MIP-1a、HIF-1a表达的相关性分析和意义探讨 2010年 目的探讨SD大鼠肝脏缺血45min后再灌注不同时限肝脏和小肠组织中MIP-1a和HIF-1a的不同表达、病理学变化及其意义。方法将75只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、缺血再灌注组,建立肝缺血再灌注模型,采用免疫组织化学方法检测MIP-1a及HIF-1a在肝脏缺血45min再灌注0、3、12、24、72h时肝脏、小肠中的表达,HE组织染色及电镜观察大体及显微组织学变化。结果随着再灌注时限的延长,肝脏及小肠组织损伤加重,再灌注后24h最严重。与正常组及假手术组相比,缺血再灌注组中MIP-1a和HIF-1a在肝脏及小肠组织中的表达显著升高(P〈0.05)。两者在肝脏中的表达12h达顶峰,随后MIP—1a再灌注72h时基本恢复至再灌注初期水平,而HIF-1a降至正常水平。MIP—1a和HIF-1a在小肠组织中的表达24h达到峰值,再灌注72h后降至再灌注初期水平。MIP-1a与HIF-1a表达有相关性(P〈0.05)。结论肝脏缺血再灌注可以造成胃肠道组织的损伤;MIP-1a及HIF-1a均参与了肝脏缺血再灌注后的肝脏及胃肠道损伤,HIF-1a可能是MIP-1a表达的重要调节因子。 刘志超 卢绮萍 李德忠 张智勇关键词:HIF-1A 缺血再灌注损伤 不同肝缺血时限肝硬化及非肝硬化肝组织基因差异表达及其意义 被引量:5 2007年 目的探讨肝硬化和非肝硬化肝组织肝缺血不同时限基因差异表达,为合理掌握肝缺血安全时限提供理论依据。方法以正常肝组织为对照,将观测标本分为 A(非肝硬化)、B(肝硬化)两组,每组按不同缺血时限(分别为15、30、45 min)分3个亚组。标本取材后立即置入液氮冻存备测,应用4000点基因芯片分析不同缺血时限各组基因差异表达。结果肝缺血15 min,非肝硬化组基因表达谱变化以调控内环境稳定的编码基因表达上调为主,而肝硬化组则出现了多个凋亡相关基因的高表达。肝缺血30 min,两组肝组织凋亡相关基因表达均处高峰阶段,不同点在于:肝硬化组促凋亡基因表达的数量和 Ratio 值均大于非肝硬化组;非肝硬化组同期有多个热休克蛋白家族成员编码基因和抗氧化蛋白编码基因高表达。肝缺血45 min,肝硬化组与热休克蛋白和抗氧化蛋白编码基因均处于低表达水平。结论肝脏遭受缺血性损伤后决定细胞生存状态的关键时限点大约在30 min 左右;非肝硬化组织抗损伤能力较强,有可能耐受超过30 min 甚至更长的肝缺血时限;肝硬化组织肝缺血安全时限以控制在30 min 以内为宜。 卢绮萍 裘法祖 吴在德 曹庭加 张智勇 曹钧 刘伟 冯毓灵关键词:肝硬化 局部缺血 基因表达 肝脏缺血及再灌注时胃肠道动力、胃电图变化及丹参预处理的临床研究 被引量:7 2013年 目的观察肝脏缺血再灌注造成胃肠道淤血后患者肠鸣音恢复时间、肛门排气时间、胃电图变化及丹参对胃肠运动各项指标的影响。方法将术中行第一肝门阻断的32例患者,随机分为2组:IR组(缺血再灌注组)(n=15)和SM组(丹参预处理组)(n=17),两组均在术中行肝部分切除,pringle法行第一肝门阻断,阻断时间15~20min,SM组在术前3d及术后5d连续给予丹参注射液20ml/d静脉滴注。CO组(正常对照组)5例为同意受试工作人员。SO组(阴性对照组)12例为开腹手术而未进行肝门阻断的患者。观察行手术的3组患者肠鸣音恢复时间及肛门排气时间,4组患者记录术前、术后24、48、72h胃电图变化。结果IR组肠鸣音恢复时间为(31.13±4.31)h、肛门排气时间为(74.13±12.74)h,SM组分别为(27.65±3.33)、(68.47±11.02)h,均长于s0组[(19.17-4-3.07)、(28.17±4.86)h](P〈0.05),而SM组肠呜音恢复、肛门排气时间快于IR组(P〈0.05);术后SO、IR、SM组胃电振幅幅度[术后24h分别为(161.50±8.99)、(127.93±8.69)、(139.71±8.95)uV]、正常慢波比值(术后24h分别为59.51±4.41、54.49±4.14、56.82±4.62)均较术前降低(P〈0.05),IR组下降最明显,恢复最慢,SO组术后48h即恢复,SM组术后72h恢复,而IR组术后72h仍未恢复。结论肝门阻断所致胃肠道淤血导致肠鸣音恢复时间、肛门排气时间均晚于未进行肝门阻断的s0组,胃电图观察亦为同样规律;肝门阻断所致胃肠道淤血时胃电图显示其胃肠运动弱于SO组。丹参可能通过改善微循环、减轻胃肠道水肿,在一定程度上促进胃肠运动尽快恢复。 张智勇 卢绮萍 陈孝平关键词:肝脏缺血 再灌注损伤 胃电图 肝脏缺血再灌注小肠淤血时的胃动素、胰泌素表达以及丹参预处理的影响 被引量:1 2010年 目的 研究大鼠肝缺血45 min再灌注不同时限胃肠运动兴奋型激素MTL和抑制型激素SEC在小肠的表达以及丹参预处理的影响,探讨其可能的机制和意义.方法 80只大鼠随机分为4组:正常对照组(CO组)、假手术组(SO组)、损伤组(IR组)、丹参预处理组(SM组).用无损伤动脉钳钳夹/放松肝蒂制作缺血再灌注动物模型,钳夹时间为45 min;SM组在钳夹肝蒂前30 min前经尾静脉推注丹参注射液6 g/kg加生理盐水40 ml/kg,SO组开腹后仅解剖肝门,不钳夹肝蒂.分别在再灌注0、3、12、24、72 h取上段空肠制备标本行MTL、SEC免疫组化测定.结果 在肝缺血再灌注0 min消化道淤血时上段空肠MTL表达下调、SEC表达上调,随着再灌注时间延长表达增强,至24 hMTL表达最低,而SEC表达达峰值,至72 h接近恢复正常;在再灌注各个时限点SM组MTL表达水平高于IR组,SEC表达水平低于IR组.结论 肝脏缺血所致消化道淤血性损伤可使再灌注时胃肠运动兴奋型激素MTL表达下调,析胃肠运动抑制性胃肠激素SEC表达上调,从而抑制胃肠运动;丹参预处理可以在一定程度上减弱同期小肠MTL表达的下调、SEC表达的上调,有助于促进胃肠运动的早期恢复. 张智勇 陈孝平 卢绮萍关键词:再灌注损伤 肝脏 MTL SEC 丹参预处理对肝脏缺血再灌注后胃肠激素的影响 被引量:3 2014年 目的探讨丹参预处理对肝脏缺血再灌注后胃肠激素的影响。方法前瞻性研究2010年5月至2012年5月广州军区武汉总医院收治的32例肝病患者,对所有患者行肝部分切除术,术中行第一肝门阻断。按随机数字表法将32例患者分为2组:缺血再灌注组(IR组,15例)和丹参预处理组(SM组,17例),两组患者均在术中行肝部分切除,以P6ngle法行第一肝门阻断约15~20min,IR组术前3d给予30mL/d生理盐水静脉滴注,SM组术前3d给予丹参注射液30mL/d静脉滴注;12例开腹手术而未行肝门阻断者作为阴性对照组(s0组);5例健康志愿者作为正常对照组(CO组)。分别测定各组胃动素、胆囊收缩素、血管活性肠肽、胰泌素水平变化情况。多组比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD—t检验。结果c0组胃动素水平为(347±14)μg/L,SO组术后24、48、72h胃动素水平分别为(324±13)μg/L、(345±12)μg/L和(345±13)μg/L,IR组分别为(307±10)μg/L、(316±9)μg/L和(338±13)μg/L,SM组分别为(313±7)μg/L、(337±12)μg/L和(345±12)μg/L。s0组术后24h胃动素水平显著低于c0组(t=5.25,P〈0.05);IR组术后24、48、72h胃动素水平显著低于同时相点sO组(t=10.05,8.09,2.07,P〈0.05);SM组胃动素表达水平在术后24、48h显著低于SO组(t=9.83,2.28,P〈0.05),但是至术后72h与S0组比较,差异无统计学意义(t=0.36,P〉0.05);SM组胃动素表达水平在术后24、48、72h显著高于IR组(t=3.80,7.10,2.35,P〈0.05)。CO组胆囊收缩素水平为(2.53±0.06)μg/L,SO组24、48、72h胆囊收缩素水平分别为(3.28±0.09)μg/L、(2.52±0.09)μg/L和(2.54±0.16)μg/L,IR组分别为(4.34±0.21)μg/L、(3.63±0.31)μg/L和(3.25±0.09)μg/L,SM组分别为(3.71±0.28)μg/L、(3.28±0.11)μg/L 张智勇 卢绮萍 陈孝平关键词:肝脏 缺血再灌注 胃肠激素 丹参