浙江省自然科学基金(LY12C11002)
- 作品数：6 被引量：43H指数：5
- 相关作者：朱荣张玉柱王国庆高志强王忠文更多>>
- 相关机构：温州医学院温州医科大学松原市中心医院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 力竭运动对小鼠骨骼肌细胞自噬的影响及相关调节机制研究被引量：8
- 2013年
- 目的:研究力竭运动对C57BL/6小鼠骨骼肌细胞自噬的影响,并探讨AMPK在骨骼肌自噬中的作用和调节机制。方法:8周龄C57BL/6小鼠96只,随机分为AICAR注射组,力竭运动组,Compound C注射+力竭运动组及相应对照组。各组小鼠分别在AICAR注射后1h,2h和6h或在进行终强度为11m/min的力竭跑台运动后即刻,3h,6h,12h,24h取材,每组6只。通过ELISA法测定AMPK酶活性,采用Western Blot法测定p-ULK1,ATG 7,LC3,Beclin1和p62蛋白表达,免疫共沉淀法测定AMPK/ULK1结合量。结果:AICAR注射后1h时AMPK酶活性、p-ULK1、AMPK/ULK1结合量、LC3-I和LC3-II显著升高(P<0.05),LC3-II/LC3-I比值显著增大(P<0.01),ATG 7、Beclin1显著下降(P<0.05),p62变化不明显,2h时除LC3-II显著下降外(P<0.01),其余指标基本恢复;力竭运动组AMPK酶活性,p-ULK1、AMPK/ULK1结合量,LC3-I和LC3-II运动结束即刻增加非常显著(P<0.01),LC3-II/LC3-I比值显著增大(P<0.01),恢复期(3h、6h、12h、24h)显著下降(P<0.01),ATG 7、Beclin1和p62运动后即刻显著下降(P<0.05),恢复期ATG 7始终低于对照组,Beclin1和p62逐渐恢复;Compound C注射+力竭运动组AMPK活性,p-ULK1含量和AMPK/ULK1结合量基本不变,LC3-I,LC3-II和LC3-II/LC3-I比值在运动后变化同力竭组一致,但显著低于力竭组(P<0.05),ATG 7,Beclin1变化同力竭组,但显著高于力竭组(P<0.05),p62在运动后即刻显著升高,恢复期(3h、6h、12h、24h)显著下降(P<0.05)。结论:AMPK是骨骼肌内细胞自噬的重要调节因子,力竭运动可以通过AMPK/ULK1途径显著提高骨骼肌细胞自噬水平,但AMPK/ULK1并非是调节骨骼肌细胞自噬的唯一途径。
- 祖靓朱荣
- 关键词：力竭运动细胞自噬腺苷酸活化蛋白激酶
- Trolox削弱一次剧烈运动后泛素蛋白酶体途径对大鼠骨骼肌蛋白质的降解作用被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨抗氧化剂Trolox对运动后大鼠骨骼肌泛素蛋白酶体途径降解蛋白质的影响。方法:42只雄性SD大鼠随机分为2组,对照组24只(运动前1小时腹腔注射0.25 mlPBS溶液/100 g体重)和注射组18只(运动前1小时注射同体积Trolox,注射量30 mg Trolox/kg体重)。跑台适应3天后,从对照组选取6只作为安静对照,然后进行1次1小时大强度上坡跑,速度25 m/min,坡度5%。运动后即刻和运动后1、6小时分别从每组取6只大鼠的腓肠肌。高效液相色谱法检测3-MH含量,实时荧光定量PCR检测MuRF1、MAFbx基因表达,Western Blot检测细胞质IκBα蛋白含量,EMSA检测细胞核NF-κB结合DNA的能力,比色法检测肌肉MDA含量。结果:(1)对照组大鼠腓肠肌MDA含量在运动后即刻(P<0.01)、运动后1小时(P<0.01)、运动后6小时(P<0.05)显著高于安静时,注射组运动后即刻显著低于对照组(P<0.05)。(2)对照组腓肠肌3-MH含量在运动后即刻、运动后6小时非常显著高于安静时(P<0.01),注射组运动后即刻(P<0.01)、运动后6小时(P<0.05)显著低于对照组。(3)对照组运动后1、6小时腓肠肌MAFbx、MuRF1 mRNA含量非常显著高于安静时和运动后即刻(P<0.01),注射组运动后1小时显著低于对照组(P<0.01)。此外,注射组运动后6小时MAFbx mRNA含量显著低于对照组(P<0.05)。(4)对照组运动后即刻、运动后1小时IκBα含量较安静时非常显著下降(P<0.01),注射组运动后即刻(P<0.05)、运动后1小时(P<0.01)均显著高于对照组。(5)对照组运动后1小时细胞核NF-κB结合DNA能力非常显著高于安静时(P<0.01),注射组运动后1小时显著低于对照组(P<0.05)。结论:Trolox能减少运动产生的氧化应激,通过抑制NF-κB活性,减少运动后骨骼肌泛素连接酶基因表达,缓解泛素蛋白酶体途径对骨骼肌蛋白质的降解作用。
- 朱荣
- 关键词：TROLOX骨骼肌蛋白质降解
- 泛素蛋白酶体途径在运动骨骼肌领域的研究进展被引量：5
- 2012年
- 泛素蛋白酶体途径由泛素、蛋白泛素化相关酶、26S蛋白酶体等成分组成,通过高度有序的降解过程,将细胞内错误折叠、衰老、损伤、突变的蛋白和修饰酶等分解成小分子肽,维持胞内蛋白质水平。目前发现,一次运动可引起骨骼肌途径活性升高,而重复运动可以降低途径活性,其机制尚不明确,大致可通过不依赖途径的信号通路(FOXO,p38)和依赖途径的信号通路(MyoD,NF-κB)上调可诱导的途径成分(泛素、E2/E3、蛋白酶体亚基),激活途径,引起蛋白质降解,但还需要更进一步去证实。
- 朱荣
- 关键词：骨骼肌
- 大鼠运动性骨骼肌损伤后血清肌酸激酶、乳酸脱氢酶以及波形蛋白的变化被引量：12
- 2016年
- 目的探讨大鼠离心运动致骨骼肌损伤后血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)以及波形蛋白(Vimentin)的变化。方法 SPF级健康雄性SD大鼠40只,随机分为对照组和实验组各20只。实验组根据运动后时间不同分为运动后即刻(实验组A)、运动后12 h(实验组B)、运动后24 h(实验组C)、运动后48 h(实验组D),每组5只。观察大鼠离心运动情况,各组大鼠血清CK和LDH水平变化,各组大鼠骨骼肌Vimentin蛋白表达情况。结果与对照组相比,实验组A、实验组B、实验组C大鼠血清CK、LDH水平明显上升,且呈依次增加趋势(P<0.05),而实验组D无明显变化(P>0.05);与实验组A、实验组B、实验组C比较,实验组D大鼠血清CK、LDH水平明显下降(P<0.05);与对照组比较,实验组A、实验组B、实验组C大鼠骨骼肌Vimentin表达阳性强度吸光度值明显增加(P<0.05),且呈依次下降趋势,而实验组D无明显变化(P>0.05);与实验组A、实验组B、实验组C比较,实验组D大鼠骨骼肌Vimentin表达阳性强度吸光度值明显降低(P<0.05)。结论大鼠离心运动能够引起延迟性骨骼肌损伤,CK、LDH、Vimentin可更好反映骨骼肌损伤的程度。
- 高志强陈广卿王国庆王景忠丁伟李君宫坚张玉柱楼险峰王忠文朱荣
- 关键词：骨骼肌损伤肌酸激酶乳酸脱氢酶波形蛋白
- 一次大强度运动对大鼠骨骼肌泛素蛋白酶体途径基因表达及蛋白质降解的影响被引量：11
- 2012年
- 目的:观察1次大强度运动后骨骼肌泛素蛋白酶体途径组成成分基因表达的变化,探讨该途径在运动后骨骼肌蛋白质降解中的作用。方法:36只雄性SD大鼠,体重190～220 g,跑台运动适应3天,休息1天,取6只为安静对照,其余大鼠进行1次1小时跑台运动(25 m/min,5%坡度)。运动0.5小时即刻、运动1小时即刻、运动后1小时、运动后2小时、运动后6小时,分别选6只大鼠取腓肠肌,用Real-Time PCR法测定泛素、MuRF1、MAFbx mRNA含量,用Western Blot法检测泛素化蛋白含量,用高效液相色谱法检测肌肉3-MH含量。结果:运动0.5、1小时即刻至运动后6小时,腓肠肌泛素mRNA含量与安静时比较无显著性差异(P>0.05)。1小时运动后1、2和6小时,腓肠肌MAFbx和MuRF1 mRNA含量较安静时显著升高(P<0.01,P<0.05)。1小时运动后6小时,腓肠肌泛素化蛋白含量显著高于安静时(P<0.01)。运动0.5小时、1小时即刻和运动后6小时,腓肠肌3-MH含量显著高于安静(P<0.01)。结论:1次大强度运动后,骨骼肌泛素蛋白酶体途径基因表达升高,骨骼肌收缩蛋白降解增加。
- 朱荣马延超王瑞元
- 关键词：大强度运动骨骼肌蛋白质降解
- 阻断NF-κB信号对急性大强度运动后泛素蛋白酶体途径降解骨骼肌蛋白质的影响被引量：8
- 2014年
- 目的:研究核转录因子NF-κB信号在一次大强度运动后泛素蛋白酶体途径降解骨骼肌蛋白质的作用。方法:42只雄性SD大鼠随机分为2组,对照组24只和注射组18只,进行1次大强度上坡跑运动(25m/min,5%坡度,1 h)。运动前1 h,注射组腹腔注射0.25 ml/100 g体重的8%PDTC(NF-κB信号阻断剂)溶液;对照组腹腔注射0.25 ml/100 g体重pH7.4PBS溶液。运动前从对照组中取材6只,做为安静时对照,运动后即刻和运动后1、6 h分别从每组取材6只。用EMSA测定腓肠肌细胞核NF-κB结合DNA活性,Western Blot测定细胞质IκBα蛋白含量,Real-Time PCR测定MuRF1、MAFbxmRNA含量,HPLC测定肌肉3-MH含量。结果:1)对照组IκBα蛋白含量在运动后即刻(P<0.01)、运动后1 h(P<0.01)较安静时非常显著降低,注射组IκBα蛋白含量在运动后即刻(P<0.05)运动后1 h(P<0.01)显著高于对照组。2)对照组运动后1 h细胞核NF-κB结合DNA能力非常显著高于安静时(P<0.01)和运动后即刻(P<0.01),注射组运动后即刻(P<0.05)、运动后1 h(P<0.01)显著低于同时间的对照组。3)对照组运动后1、6 h腓肠肌MAFbx、MuRF1 mRNA含量较安静时和运动后即刻非常显著升高(P<0.01),而注射组运动后1 h显著低于对照组(P<0.05)。4)对照组运动后即刻、运动后6 h3-MH含量非常显著高于安静时和运动后1 h(P<0.01)。注射组运动后6 h显著低于对照组(P<0.05)。结论:1次大强度运动后,骨骼肌泛素连接酶基因表达增加,激活泛素蛋白酶体途径活性,加强蛋白质降解。阻断NF-κB信号,可降低泛素连接酶基因表达,有助于减少运动后骨骼肌蛋白质降解。
- 朱荣
- 关键词：大强度运动骨骼肌细胞质腓肠肌
