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辽宁省科技厅基金(2007225009-2)
作品数:
1
被引量:8
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相关作者:
廖爱军
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刘卓刚
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FTY720诱导多发性骨髓瘤细胞株U266自噬与凋亡的研究
被引量:8
2011年
目的探讨新型免疫抑制剂FTY720对多发性骨髓瘤细胞株U266细胞凋亡及自噬的影响,并探讨相关的作用机制。方法0、2.5、5.0、10.0及20.0μmol/LFTY720处理U266细胞24h后,应用CCK_8方法检测不同浓度FTY720对U266细胞生存率的影响;20.0μmol/LFTY720分别处理细胞0、2、6及24h,通过CCK-8方法检测FTY720作用不同时间对U266细胞生存率的影响。同时应用流式细胞术AnnexinV—FITC/PI染色检测相应的细胞凋亡率。不同浓度FTY720处理U266细胞后,应用Western blot法检测微管相关蛋白轻链3(LC3)B的表达,明确应用FTY720后是否引起细胞发生自噬。FTY720单用或联合应用自噬抑制剂Bafilomycin A1处理U266细胞24h,检测细胞生存率及凋亡率,并检测其对抗凋亡因子survivin表达的影响。结果应用FTY720后,U266细胞生存明显受抑制,可引起细胞发生凋亡,作用呈浓度及时间依赖性。LC3B-Ⅱ表达明显增加,呈浓度依赖性,表明FTY720可引起细胞发生自噬。应用自噬抑制剂Bafilomycin A1后,可解救FTY720引起的细胞生存抑制及凋亡,同时可解救FTY720引起的survivin表达下降。结论FTY720可引起U266细胞发生凋亡及自噬,自噬对凋亡具有促进作用。其机制可能为通过自噬在溶酶体降解了survivin等抗凋亡因子或其上游调控因子,从而促进细胞凋亡。
廖爱军
胡荣
李迎春
姚鲲
王慧涵
张嵘
杨威
刘卓刚
关键词:
免疫抑制剂
FTY720
多发性骨髓瘤
自吞噬作用
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