广东省科技计划工业攻关项目(2010A030400006)
- 作品数：11 被引量：33H指数：4
- 相关作者：段朝晖罗晓红王英林向华肖旺贤更多>>
- 相关机构：中山大学孙逸仙纪念医院暨南大学附属第一医院中山大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 血清降钙素原在重症监护病房患者感染中的诊断与应用被引量：6
- 2015年
- 目的探讨血清降钙素原(procalcitonin,PCT)在重症监护病房(intensivecareunit,ICU)患者感染中的临床价值。方法选取ICU收治的60例细菌感染患者,将其分为重症感染组28例、一般感染组32例,另选30例健康人为对照组;采用免疫层析法检测PCT水平,透射比浊法检测C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平和荧光流式细胞计数法测定外周血白细胞(white blood cell,WBC)水平,并对部分患者血清PCT、CRP和WBC水平进行连续监测。结果重症感染组、一般感染组分别与对照组比较,PCT、CRP、WBC水平均有显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);重症感染组的PCT、CRP比一般感染组有显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);重症感染组的PCT阳性率明显高于一般感染组,差异有统计学意义(P<0.05);CRP、WBC阳性率在重症感染组与一般感染组之间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。连续监测结果显示,PCT水平与患者病情密切相关,CRP和WBC对治疗效果的提示作用不如PCT。结论血清PCT对危重患者的细菌感染有较好的特异性和敏感性,对判断感染的严重程度及预后也有重要的临床参考价值。
- 王英林向华罗晓红林帝金肖旺贤段朝晖
- 关键词：降钙素原C反应蛋白外周血白细胞
- 阿尔茨海默病血清Aβ42检测方法的建立及其临床意义被引量：3
- 2012年
- 目的 建立β淀粉样肽42（β-amyloid peptide 42,Aβ42）酶联免疫吸附测定法（enzymelinked immunosorbent assay,ELISA）,并探讨其检测阿尔茨海默病（alzheimer disease,AD）患者血清Aβ42含量及其早期诊断、治疗的临床意义.方法 利用噬菌体抗体库技术制备抗Aβ42的单链抗体,用作包被抗体；并与用Aβ42免疫兔制备的抗Aβ42的多克隆抗体及辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG建立检测外周血Aβ42的ELISA方法.然后,用其检测120例AD患者和120例血管性痴呆（vascular dementiao,VD）或脑梗死患者、120名健康人血清的Aβ42含量,同时通过重复性、稳定性、回收试验和与国外试剂比对分析进行方法学评价与诊断性能分析.结果 建立的Aβ42 ELISA法检测2份血清标本重复20次的批内变异系数（coefficient of varible,CV）分别为3.6％和3.5％,重复检测20 d的批间CV分别为6.8％和7.1％；回收率为97.2％～103.1％,线性范围为0.050～2μg/L;在37℃放置6d及4℃保存6个月的活性降低均＜12％.与比利时INNOTEST双抗体夹心ELISA β淀粉样肽检测试剂盒平行检测90份标本,自建方法检测Aβ42含量为（0.207±0.039）μg/L,INNOTEST试剂盒为（0.206 ±0.038） μg/L；两种方法有较好的一致性（回归方程为Y=1.011X-0.003,R2=0.979,P＜0.01）.ELISA检测AD组血清Aβ42为（0.247 ±0.032） μg/L,VD或脑梗死组为（0.173±0.028） μg/L,健康对照组为（0.172±0.032）μg/L;AD组分别高于VD或脑梗死组和健康对照组（q值分别为18.687、18.907,P均＜0.01）.用受试者操作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲线确定Aβ42的临界值为0.212 μg/L,正常参考值范围为0～0.212 μg/L时,ELISA Aβ42诊断VD的敏感度为86.7％（104/120）,特异度为90.8％（218/240）.结论 建立的AD血清Aβ42 ELISA法的敏感度和特异度较高,重复性及稳定性较好,为AD患者的早期诊断和治疗监测提供了新的有效方法.
- 王华成罗金刚刘学军杨梦心王英许英段朝晖
- 关键词：阿尔茨海默病淀粉样Β蛋白肽碎片酶联免疫吸附测定
- 血栓前状态所致复发性流产患者外周血淋巴细胞亚群的变化被引量：4
- 2016年
- 目的探讨血栓前状态所致复发性流产(RSA)患者外周血淋巴细胞亚群的变化及其意义。方法收集73例血栓前状态RSA患者(PTS-RSA)外周血,另设22例正常早孕妇女作为正常对照组(HC),采用流式细胞术对其进行淋巴细胞亚群(T细胞、B细胞、NK细胞相关指标)检测,并比较PTS-RSA患者治疗前后相应指标的变化。结果与HC组比较,PTS-RSA组CIK细胞绝对值、NK细胞百分比和CIK细胞百分比明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。PTS-RSA患者在经过临床相关治疗后,NK细胞百分比及绝对值明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05);B细胞百分比、Ts细胞百分比明显上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论血栓前状态可能激活RSA患者体内的一系列免疫反应,对PTS所致RSA患者外周血淋巴细胞亚群进行监测,将对诊断及治疗具有一定的指导意义。
- 林向华刘娇林帝金王英罗晓红段朝晖
- 关键词：血栓前状态复发性流产NK细胞
- 抗多种致病菌的特异性卵黄免疫球蛋白的制备研究
- 2014年
- 目的:探讨一种新的获得IgY多克隆抗体的方法和效果。方法:用三种常见的细菌病原体金黄色葡萄球菌(SA)、大肠埃希氏菌(EC)、铜绿假单胞菌(PA)制备复合抗原,并经过灭活后免疫来亨蛋鸡产生IgY多克隆抗体。从免疫后的蛋中提取出IgY多克隆抗体,ELISA法测IgY抗体特异性及浓度滴度。SA、EC、PA三种标准菌株体外抑制实验检测IgY抗体抑菌效果。结果:用SA、EC、PA复合抗原成功地免疫来亨蛋鸡产生IgY多克隆抗体,ELISA法检测抗体浓度滴度为100,000;IgY抗体明显抑制SA、EC、PA三种标准菌株的生长。结论:SA、EC、PA三种细菌复合抗原可以刺激来亨蛋鸡产生高浓度滴度抗体IgY,该抗体能明显抑制SA、EC、PA三种标准菌株的生长。
- 邓雅文罗晓红严海燕孙龙乔子廖美英段朝晖
- 关键词：IGY大肠埃希氏菌铜绿假单胞菌复合抗原多克隆抗体
- 狼疮抗凝物质与复发性流产关系探讨被引量：8
- 2015年
- 目的:探讨狼疮抗凝物质(lupus anticoagulant,LA)与复发性流产的关系。方法:研究395例2011年7月至2012年12月因复发性流产前来本院就诊的妇女(观察组),并设150例正常体检妇女为对照组。用改良罗素稀释蛇毒试验(dilute Russell viper venom time,DRVVT)检测血中LA的含量。结果:观察组的LA阳性率为4.05%,高于对照组(0.66%),差异有统计学意义(P<0.05),LA水平(s)为34.34±5.08,显著高于对照组32.25±2.54(P<0.05),不同流产次数的各组LA水平(s)分别为34.37±4.98、33.72±4.72、34.16±4.17,均显著高于对照组(P<0.05),但各组间的LA水平无差异(P>0.05)。结论 :复发性流产可能与高水平的LA有关,但流产次数与LA无关。复发性流产的妇女进行LA的检测有利于临床及时做出诊断和早期治疗。
- 王英林向华罗晓红林帝金段朝晖赵铭鹏
- 关键词：复发性流产狼疮抗凝物质
- 胸腔积液标本留取和检验技术进展被引量：1
- 2014年
- 形成胸腔积液的病因繁多,实验室检查可区分漏出液与渗出液,鉴别良性与恶性、结核性与非结核性胸腔积液。胸腔积液的实验室检验包括常规检验、细胞学检验、生化检验、免疫学检验和分子生物学检验。标本留取属于分析前重要的一部分,近年来越来越多的实验室认识到分析前质量控制的重要性,其在临床工作中受到越来越多的关注。形成胸腔积液的病因以结核性和癌性居多,因而出现了大量针对结核性和癌性胸腔积液检验的新项目和新技术。本文就这些新项目、新技术检测结果的意义和全程质量控制进行评述,分析其优缺点,便于临床实验室决定是否开展该项目和技术,同时也便于临床医生选择。
- 段朝晖蒋军移邓雅文
- 关键词：胸腔积液恶性
- 一步法胞内染色在临床检测Th1和Th2细胞中的应用
- 2015年
- 【目的】探讨一步法破膜剂(Per Fix-nc)进行胞内染色在流式细胞术临床检测Th1和Th2细胞中的应用。【方法】取10例健康儿童(HV)外周全血刺激培养,分别采用Per Fix-nc与两步法破膜剂固定破膜染色,用流式细胞术检测CD3+CD8-细胞中的Th1%和Th2%,比较两种破膜剂检测Th1和Th2细胞有无差异,并进行方法一致性检验。并随机选取一例HV样本进行重复性试验。用10例儿童再生障碍性贫血(AA)患者的Th1%和Th2%对实验条件进行验证。【结果】Per Fixnc和两步法破膜剂相比,HV中检测出的Th1细胞百分比分别为20.10(15.59-24.78)%和19.57(16.73-25.26)%(P>0.05),其相关系数r=0.777(P<0.01);Th2细胞百分比分别为1.83(1.52-2.38)%和1.87(1.43-2.42)%(P>0.05),其相关系数r=0.875(P<0.01)。重复性试验中,样本的Th1和Th2细胞百分比均值分别为(17.88±1.75)%、(1.47±0.13)%,CV分别为9.8%、8.8%。儿童AA患者的Th1和Th2细胞分别为(32.3±6.06)%、(1.55±0.34)%,Th1和Th2细胞较儿童HV组有非常显著性差异(P<0.01)。【结论】一步法(Per Fix-nc)与两步法破膜剂之间有较好的相关性,在简化破膜操作流程的同时,能达到较两步法更好的细胞分群,为临床上Th1和Th2细胞的日常检测和进一步研究提供了较好的实验条件。
- 林向华陈凤平王英肖旺贤林帝金罗晓红段朝晖
- 关键词：流式细胞术TH细胞再生障碍性贫血
- PerFix-nc在流式细胞术检测临床Th17细胞中的应用被引量：1
- 2014年
- 目的探讨一步法破膜剂（Per Fix-nc）在流式细胞术检测临床Th17细胞中的应用。方法取10例健康成人外周全血刺激培养,分别采用Per Fix-nc与两步法破膜剂固定破膜染色,用流式细胞术检测CD3＋CD8-细胞中的Th17百分比,比较2种破膜剂检测Th17有无差异。并随机选取一例样本进行重复性试验。用10例变应性鼻炎患者的Th17百分比对实验条件进行验证。同时比较标本放置时间对Th17细胞检测的影响。结果 Per Fix-nc和两步法破膜剂相比,检测出的Th17细胞百分比分别为（2.78±0.85）%和（2.87±0.87）%（P〉0.05）,其相关系数r=0.777。重复性试验中,样本的Th17均值为2.08%,CV 2.88%。变应性鼻炎患者的Th17为4.52%（3.36%~5.68%）,较健康成人组明显升高（P〈0.05）。标本采集后立即孵育处理与标本隔天孵育处理的结果比较,后者的Th17百分比明显降低（P〈0.05）。结论应用Per Fix-nc能同时进行膜上和胞内抗体的染色,简化了操作流程,为临床Th17细胞的日常检测和进一步研究提供了便利。
- 林向华王英吴秋菊李健罗晓红段朝晖
- 关键词：TH17细胞流式细胞术
- Th17细胞在慢性鼻炎常见病中的表达及意义被引量：5
- 2015年
- 目的研究辅助性T细胞17(helper T cell 17,Th17)在慢性鼻炎常见病中的表达及意义。方法选取60例慢性鼻炎患者,包括变应性鼻炎组(allergic rhinitis,AR)20例、慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉组(chronic rhinosinusitis without nasal polyps,CRSs NP)20例、慢性鼻-鼻窦炎伴有鼻息肉组(chronic rhinosinusitis with nasal polyps,CRSw NP)20例,另选取10例健康人作为对照组(healthy control,HC)。采用流式细胞术测定各组的Th17细胞表达量,并与患者的血清免疫球蛋白E(Ig E)、嗜酸性粒细胞(eosnophils,Eos)和过敏原情况进行比较。结果各慢性鼻炎组的Th17、Eos和Ig E与HC组相比均有不同程度升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。Th17细胞表达量:CRSw NP组>AR组>CRSs NP组。各慢性鼻炎组间的Eos、Ig E和过敏原阳性率相比,差异无统计学意义。AR组中男性Th17、CRSw NP组中男性Eos与女性相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论慢性鼻炎常见病中普遍存在Th17细胞表达量的升高,其可能在该类疾病的发生、发展中发挥着重要作用。
- 林向华王英肖旺贤林帝金罗晓红段朝晖
- 关键词：辅助性T细胞17鼻息肉变应性鼻炎鼻炎
- APPswe/PS1转基因模型鼠的基因分型与筛选研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨老年性痴呆(Alzheimer disease,AD)转基因模型鼠Tg(APPswe PSEN1dE9)85Dbo的优化繁育和基因分型方法,筛选出适合AD研究的稳定转基因动物。方法 3种不同的繁殖配伍分组(组1,+/+×-/-♀;组2,+/+♀×-/-;组3,+/+♀×+/+)研究子代鼠的存活率及PS1转基因阳性率;提取子二代鼠尾基因组DNA并鉴定其质量,用双重PCR方法扩增PS1转基因片段,琼脂糖凝胶电泳观察结果;PCR产物测序证实其基因序列。结果改良后的方法全程耗时不到8 h,提取的基因组DNA在23 kb以上,完整性好,浓度为65～175 ng/μl。共繁殖子二代小鼠27窝计222只,存活206只,配伍组1子代存活率94.29%(99/105);配伍组2子代存活率91.67%(66/72);配伍组3子代存活率91.11%(41/45),3组间存活率差异无统计学意义(P=0.423>0.05)。3种配伍产生的子代鼠转基因阳性率都基本符合孟德尔遗传规律,转基因阳性率差异有统计学意义(P=0.028<0.05)。配伍组1子代鼠雄鼠阳性率65.1%(28/43),雌鼠阳性率35.7%(20/56),差异有统计学意义(P=0.003<0.05),性别与转基因阳性率相关(CO=0.280,P=0.004<0.05);配伍组2子代鼠,雄鼠阳性率56.3%(18/32),雌鼠阳性率55.9%(19/34),差异无统计学意义(P=0.586>0.05);配伍组3子代鼠,雄鼠阳性率81%(17/21),雌性阳性率65%(13/20),差异无统计学意义(P=0.212>0.05)。双重PCR产物经测序证实和预期完全一致。结论 Tg(APPswe,PSEN1dE9)85Dbo杂合子亲代配伍能产生存活至成年的纯合子子代鼠;改进后的基因分型可以作为小鼠基因分型的可靠方法,用于AD研究相关的胎鼠神经元培养实验,该动物模型杂合子雄鼠与野生型雌性鼠的配伍繁殖为最佳繁育筛选组合。
- 罗金刚罗晓红肖颂华王英许英段朝晖
- 关键词：转基因小鼠基因分型双重PCR杂合子
