国家自然科学基金(30571713)
- 作品数：13 被引量：80H指数：4
- 相关作者：储以微熊思东林怡刘荣军张镭更多>>
- 相关机构：复旦大学上海医学院复旦大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目上海市医学领军人才项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- Toll样受体在亚单位疫苗分子设计中的研究进展被引量：3
- 2006年
- 近年来固有免疫系统激活与特异性免疫系统活化的关系研究为疫苗分子设计提供了诸多新思路,尤其是人们对Toll样受体了解的不断深化,对疫苗佐剂的发展具有深远影响。Toll样受体除刺激产生针对表位特异性免疫应答外,还具有调节免疫应答类型的能力,从而推动了亚单位疫苗的设计和应用。
- 林怡熊思东储以微
- 关键词：TOLL样受体亚单位疫苗分子设计佐剂
- 人黑色素肿瘤相关抗原gp100质粒诱导特异性抗小鼠黑色素瘤的免疫保护效应被引量：2
- 2006年
- 目的以人黑色素肿瘤相关抗原hgp100基因免疫小鼠,诱导针对小鼠黑色素瘤的特异性免疫应答及保护效应。方法分别构建含全长人gp100(hgp100)和小鼠印100(mgp100)编码基因的质粒pcDNA3-hgp100和pcDNA3-mgp100,以100μg DNA肌肉免疫C57BL/6小鼠3次,每次间隔2周。通过体外免疫功能及体内攻击实验评价hgp100诱导对小鼠黑色素瘤的特异性免疫应答及保护效应。结果与mgp100比较,hgp100能诱导特异性针对mgp100的抗体生成和T细胞增殖及杀伤,产生以 IFN-γ分泌为主的特异性免疫应答;hgp100免疫小鼠在小鼠黑色素肿瘤细胞攻击后生存时间显著延长。结论人黑色素瘤相关抗原gp100可诱导特异性抗小鼠黑色素瘤的免疫应答及保护效应。
- 李昂刘荣军林怡熊思东储以微
- 紫杉醇与肿瘤疫苗联合应用对小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤的治疗效果被引量：3
- 2006年
- 目的评价化疗药物紫杉醇联合应用肿瘤疫苗对小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤的治疗效果。方法以编码有GM-CSF的腺病毒感染Lewis肺癌细胞3LL,制备肿瘤疫苗3LL/GM-CSF。以2×104个3LL瘤细胞皮下注射C57BL/6(H-2b)小鼠腹股沟部,制备小鼠皮下移植瘤。检测体内、外应用紫杉醇对Lewis肺癌细胞3LL的杀伤敏感性。在小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤体内首先以紫杉醇化疗,随后以肿瘤疫苗3LL/GM-CSF免疫;或反之,首先以肿瘤疫苗免疫,随后以紫杉醇化疗,观察肿瘤生长和小鼠生存状况,以及检测小鼠体内对肿瘤的特异性杀伤效率和免疫应答记忆反应。结果紫杉醇体外作用于3LL肿瘤细胞,24h后在浓度为100nmol/L时可使32.10%的3LL肿瘤细胞发生死亡;但体内注射紫杉醇(5、10和25mg/kg)不能使所有3LL荷瘤小鼠肿瘤消退。体内使用紫杉醇后应用3LL/GM-CSF肿瘤疫苗,70%的荷瘤小鼠发生显著的肿瘤消退,与单纯化疗的小鼠相比生存时间明显延长(70.0vs27.5d);化疗后应用肿瘤疫苗诱导了体内对3LL的特异性杀伤,第3天体内杀伤率达41.35%;同时,存活小鼠能抵抗2×1043LL肿瘤细胞的再次攻击。接种3LL/GM-CSF肿瘤疫苗后应用紫杉醇化疗却不能使肿瘤消退。结论化疗后应用肿瘤疫苗免疫可诱导出抗原特异性免疫效应,使荷瘤小鼠肿瘤消退并延长生存时间,为临床开展化疗后的肿瘤疫苗主动免疫提供了实验依据。
- 郑秀娟张镭林怡张毅胡红明储以微
- 关键词：紫杉醇肿瘤疫苗肿瘤免疫治疗
- Legumain在荷瘤与正常小鼠脾细胞中的差异性表达
- 2008年
- 背景与目的:已知新发现的半胱氨酸蛋白酶legumain可能参与肿瘤的发生发展。本研究检测了le-gumain在荷瘤组织及荷瘤与正常小鼠免疫细胞如脾脏T、B和巨噬细胞中的差异表达,为研究legumain在抗肿瘤免疫中的作用提供基础数据。方法:取正常和4T1荷瘤的雌性BALB/c小鼠的肿瘤组织或脾细胞,分离巨噬细胞和T、B淋巴细胞,检测legumain的基因表达水平。结果:在荷瘤小鼠的肿瘤组织和淋巴器官均检测到高表达的legu-main,而且随着肿瘤进展,其表达水平相应提高;legumain除高表达于巨噬细胞外,脾脏中的淋巴细胞,特别是T淋巴细胞,与正常小鼠相比其legumain的表达水平显著升高。结论:荷瘤小鼠的肿瘤组织及其脾脏巨噬细胞和T细胞中高表达legumain,并且与肿瘤的发生发展呈正相关。
- 郭强李康徐薇储以微熊思东
- 关键词：LEGUMAINT细胞B细胞
- 小鼠淋巴细胞减少症模型的建立及其免疫学意义被引量：6
- 2006年
- 目的:以放射线处理建立小鼠淋巴细胞减少症模型并探讨其免疫学意义。方法:1．25 Gy放射剂量照射C57BL／ 6小鼠,不同时间点计数外周血、脾脏和淋巴结中免疫细胞数,FACS动态分析各淋巴细胞亚群比例改变,RT-PCR检测淋巴细胞中转录因子T-bet、GATA-3的表达。进一步以DC-gp100瘤苗免疫放射处理小鼠,B16F10黑素瘤细胞攻击,观察肿瘤生长的大小。结果:放射线处理后小鼠淋巴细胞数显著减少,CD4+CD25+T细胞比例明显降低;CD44highCD62low记忆样T淋巴细胞形成;T-bet表达明显上调,GATA-3表达无明显改变。与未照射组比较,放射处理小鼠经DC-gp100瘤苗免疫后具有增强抵抗 B16F10黑素瘤细胞攻击的效应,肿瘤生长明显减缓。结论:以放射线处理成功建立淋巴细胞减少症模型,并具有增强免疫保护的效应。
- 刘荣军郑秀娟熊思东储以微
- 关键词：CD4^+CD25^+T细胞放射线免疫重建
- CD40L在M2型巨噬细胞类型转换中的作用被引量：3
- 2008年
- 目的检测不同CD40L表达水平的脾细胞对巨噬细胞表型和功能的影响,探讨通过调控CD40L的表达改变巨噬细胞的类型。方法贴壁分离正常BALB/c小鼠的腹腔巨噬细胞。将腹腔巨噬细胞或经IL-4刺激的腹腔巨噬细胞,分别与体外培养2d后获得的CD40Llow脾细胞和Ionomycin与PMA诱导的CD40Lhigh脾细胞共孵育,24h后检测M1和M2型巨噬细胞相关基因的表达,并以硝酸还原酶法检测NO分泌水平。结果与CD40Llow脾细胞共孵育的巨噬细胞CCL22、Fizz1和Ym1表达水平较高,但只分泌较低水平的NO,而与CD40Lhigh脾细胞共孵育的巨噬细胞表达较高水平的CCL3并分泌高水平的NO,而且CD40Lhigh脾细胞可使M2型巨噬细胞表型相关基因明显下调。结论CD40Lhigh脾细胞使巨噬细胞倾向于M1型极化,并且能使M2型巨噬细胞向M1型转换。
- 郭强李康徐薇关庆东储以微熊思东
- 关键词：巨噬细胞M2型巨噬细胞CD40L一氧化氮
- HIV-Ⅰ慢病毒载体的研究进展与应用被引量：1
- 2008年
- 基因治疗是治疗肿瘤、遗传病等难治性疾病的最有效手段之一，但目前的基因转移方法存在一定的局限性，成为基因治疗和广泛应用的障碍。以1型人类免疫缺陷病毒（HIV-1）为基础构建的慢病毒载体（LV）具有感染分裂及非分裂细胞、使目的基因产物表达稳定、表达时间长、载体自身免疫原性小等优点，尤其是LV能有效诱导免疫应答，抑制肿瘤生长，诱导移植免疫耐受等，是很有发展潜力的体内基因治疗新载体。
- 蔡玉婵储以微
- 关键词：慢病毒载体HIV-1基因免疫治疗
- 肺癌患者化疗前后免疫细胞格局的改变及其临床意义被引量：15
- 2006年
- 目的:研究肺癌患者化疗前后免疫细胞数量、亚群比例、细胞表型及功能的改变,并探讨其临床意义。方法:对23例次肺癌患者化疗前后的白细胞、淋巴细胞和中性粒细胞计数,以流式细胞术对CD3+、CD4+及CD8+T细胞亚群比例以及记忆样表型T细胞进行检测和分析;体外以PHA刺激外周血淋巴细胞,培养48h后检测对K562靶细胞的杀伤效应。结果:化疗后外周淋巴细胞数量迅速减少,1周左右达最低水平,此后逐渐恢复至化疗前水平;淋巴细胞恢复过程中,CD3+、CD8+T细胞亚群比例升高,记忆样表型T细胞(CD44high,CD62Llow)比例增加;增生期淋巴细胞在体外以PHA刺激后对K562细胞的杀伤能力没有下降,个别患者的杀伤能力还有所增强。结论:肺癌患者化疗后不仅没有降低免疫功能,反而可增强其免疫效应,该结果为临床肿瘤患者化疗后开展免疫生物治疗提供了实验依据。
- 储以微刘荣军张镭金美玲郑秀娟郑惠如熊思东
- 关键词：淋巴细胞减少症化学药物治疗免疫重建肺癌
- 小鼠3LL肿瘤局部高表达GM-CSF增强抗肿瘤免疫的实验研究被引量：1
- 2008年
- 背景与目的:粒-单核细胞集落刺激因子(grannulocyte/monocyte-colony stimulating factor,GM-CSF)具有促进未成熟树突状细胞(dendritic cell,DC)成熟、上调其MHC分子和协同刺激分子表达以及增强DC对肿瘤抗原的提呈等作用。本文研究GM-CSF在肿瘤局部的高表达可以促进肿瘤局部DC成熟及亚群改变,从而诱导增强的抗肿瘤免疫效应。方法:以GM-CSF转染小鼠Lewis肺癌细胞株3LL获得3LL-GM,分别以3LL、3LL-vec(空载体对照)和3LL-GM细胞接种C57BL/6小鼠,分离肿瘤局部免疫细胞,流式细胞术检测DC成熟度、DC亚群比例、CD8+效应T细胞的活化及其功能。结果:3LL-GM肿瘤局部GM-CSF浓度高达441.22ng/g肿瘤组织,显著高于母本3LL组的0.53ng/g肿瘤组织(P<0.05)和空载体对照3LL-vec组的0.42ng/g肿瘤组织(P<0.05)。在3LL-GM、3LL和3LL-vec组小鼠肿瘤内浸润的CD11c+DC细胞中,I-Ab+细胞的比例分别为60.62%、19.98%和23.12%(P<0.05),CD80+细胞的比例分别为60.93%、37.43%和47.03%(P<0.05),表明肿瘤局部GM-CSF促进DC成熟;同时,三组小鼠肿瘤内浸润的CD11c+CD8α+CD4-DC亚群比例分别为60.82%、40.00%和29.27%(P<0.05),显示肿瘤局部GM-CSF促使DC分化为CD11c+CD8α+CD4-亚群。3LL-GM组小鼠肿瘤内浸润淋巴细胞(tumor in-filtrating lymphocyte,TIL)中,CD3+CD62Llow细胞比例高达20.84%,显著高于3LL组的6.34%(P<0.05)和3LL-vec组的15.18%(P<0.05);并且分泌IFN-γ的CD8+T淋巴细胞比例为2.77%,与对照组相比差异具有显著性(P<0.05)。结论:肿瘤局部高表达GM-CSF,可通过提高DC成熟度及上调CD11c+CD8α+CD4-DC亚群在肿瘤局部的比例,诱导增强的抗肿瘤免疫效应,最终导致肿瘤消退。
- 林怡张镭张毅蔡玉婵熊思东储以微
- 关键词：树突状细胞移植瘤小鼠
- Th17与自身免疫病被引量：26
- 2008年
- Th17是最近发现的CD4+效应T细胞的新亚群。初始T细胞在TGF-β和IL-6的共同作用下分化发育成为Th17细胞。在其分化发育过程中,RORγt是Th17细胞的特异性转录因子。分化成熟的Th17可以分泌IL-17,IL-21,IL-22等多种细胞因子,其中IL-17在多种自身免疫疾病和炎性疾病中起关键作用。使用抗IL-17的抗体或抑制Th17细胞的分化,可以有效减轻疾病的症状。Th17细胞的发现为自身免疫性疾病和与其相关的炎性疾病的发病机制及防治对策开辟了新的研究思路和方向。
- 张毅储以微
- 关键词：TH17IL-17自身免疫病
