福建省教育厅科技项目(JA12117)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 相关作者：温亚萍吴异健吴宝成蔡一龙王全溪更多>>
- 相关机构：福建农林大学更多>>
- 发文基金：福建省教育厅科技项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 不同毒力番鸭呼肠孤病毒双重PCR鉴别方法的建立
- 2014年
- 自2001年我国出现番鸭感染呼肠孤病毒(MDRV)报道以来,本课题组从病鸭体内分离到2株在临床上致病力差别很大的病毒毒株,并分别命名为YJL株和YB株。本研究根据这2株病毒基因特点,分别针对YB株P10蛋白基因和YJL株P17蛋白基因设计2对特异性引物,通过条件优化建立了鉴别2个毒株的双重PCR。结果显示:该方法可同时扩增出YB 288 bp、YJL 441 bp长度的特异性片段,而对其他番鸭病病原无扩增结果;该方法最佳反应条件为95℃5 min,94℃1 min,55℃45 s,72℃1 min,30个循环,72℃延伸10 min;该方法最低能检出10 pg YB和YJL株RNA模板;使用单重PCR和多重PCR方法对60份临床病料检测验证,两者符合率为100%。结果表明该方法特异性、敏感性和重复性良好,具有快速、准确的特点,可用于这2种不同毒力毒株的鉴别。
- 周五朵朱二鹏蔡一龙温亚萍吴异健吴宝成王全溪
- 关键词：番鸭呼肠孤病毒双重PCR
