中国博士后科学基金(2012M521593)
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 相关作者：王菊芳王海鹰宁正祥吴仁人陈淑仪更多>>
- 相关机构：华南理工大学环境保护部华南环境科学研究所更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：环境科学与工程生物学更多>>
- Faecalibaterium的禽类特异性生物标记引物在珠三角地区的灵敏度和特异性研究
- 据珠三角地区的畜禽养殖情况,采集猪、牛、羊以及家禽等101个粪便样品,高效提取基因组DNA,通过对DNA提取结果的分析,得出珠三角地区的主要畜禽动物中,使用粪便基因组DNA提取试剂盒对猪的粪便基因组DNA的提取效果最好,...
- 贾乐华王海鹰吴仁人王菊芳
- 关键词：微生物污染源解析灵敏度特异性
- 文献传递
- 人甲胎蛋白AFP在大肠杆菌中表达和鉴定被引量：2
- 2013年
- 本研究通过应用基因工程技术,重组构建编码人全长甲胎蛋白AFP基因的原核表达载体pET22b-AFP,并将其转化到大肠杆菌宿主菌BL21(DE3)中进行诱导表达目的蛋白AFP。采用PCR法扩增编码AFP蛋白的cDNA序列片段,并将其克隆到含有His-tag的pET22b原核表达载体上;重组质粒经双酶切及测序鉴定正确后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达;对诱导过程中不同浓度的IPTG和不同的温度进行优化;选定最佳的优化条件进行诱导表达目的蛋白;SDS-PAGE电泳和Western Blot法鉴定表达产物。结果表明,通过PCR扩增技术获得了编码AFP蛋白的基因片段;重组质粒经双酶切和基因测序等方法鉴定后,确认了重组质粒已经构建成功;表达产物通过利用SDS-PAGE和Western Blot法检测到在66 kDa附近出现条带,与预期值相符,表明重组AFP蛋白已成功表达。
- 李振东谷华玮王海鹰陈淑仪宁正祥王菊芳
- 关键词：人甲胎蛋白蛋白质印迹法
- 特异性拟杆菌引物在珠江三角洲的适应性研究被引量：6
- 2014年
- 在珠江三角洲地区采集人、猪、牛、狗以及家禽等33个粪便样品,高效提取基因组DNA,选取14种特异性拟杆菌引物进行检验分析,并进一步采用已知污染源类型的水样对其进行验证.结果表明:采用粪便样品DNA专属提取试剂盒和水体样品DNA专属提取试剂盒提取的基因组模版纯度和提取率均符合后续实验要求.拟杆菌通用引物2#(Bac32F/Bac708R)检出率为85%(28/33),特别是对哺乳类动物和鸡的粪便具有更高的检出率.人的拟杆菌特异性引物3#(HF134F/Bac708R)和4#(HF183F/Bac708R)、反刍动物的拟杆菌特异性引物8#(CF128F/Bac708R)以及猪的拟杆菌特异性引物10#(PF163F/Bac708R)在珠江三角洲地区同时具有较高的灵敏度和较强的特异性.水体样品验证实验与实际污染类型相符,说明拟杆菌通用引物2#、人的特异性引物3#和4#以及猪的特异性引物10#在珠江三角洲地区具有很好的适用性.
- 王海鹰贾乐华吴仁人王菊芳宁正祥
- 关键词：特异性引物灵敏度特异性
