国家自然科学基金(30271458)
- 作品数：6 被引量：6H指数：1
- 相关作者：胡宝成田媛秦玺黄翠芬袁翔更多>>
- 相关机构：军事医学科学院北京生物工程研究所更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 血管特异性体内噬菌体展示:靶向治疗应用
- 2006年
- 血管内皮上可表达不同的受体,采用噬菌体展示的方法已筛选出了一些靶向于组织特异性内皮细胞受体的肽或抗体。这些肽或抗体可用于生成靶向治疗复合物或影像试剂。目前,筛选方法包括体外途径、动物模型和患者体内途径。绘制血管的“功能图谱”,将在临床上有利于对癌症或其他显示特殊血管特性的疾病进行治疗。
- 秦玺胡宝成
- 关键词：噬菌体展示靶向血管
- 体内筛选技术在靶向治疗中的新进展被引量：1
- 2004年
- 用噬菌体展示技术进行体内筛选可以更好地模拟靶抗原的天然环境 ,以筛选到与活体内某些器官或组织有特异结合活性的肽或抗体。近年来利用该技术在动物体内的研究已取得了可喜的进展。综述了体内筛选技术在器官和组织血管靶向载体的筛选、基因治疗及绘制人类血管分子图谱方面的应用 ,并对其今后的研究发展方向进行了阐述。
- 田媛胡宝成
- 关键词：动物体内靶向治疗靶抗原基因治疗活体分子图谱
- 利用体内噬菌体展示技术进行人源肿瘤细胞特异性结合肽的筛选被引量：1
- 2003年
- 目的 :寻找肿瘤细胞特异性结合肽 ,为肿瘤诊断试剂及肿瘤药物的研制奠定基础。方法 :用培养的人源肿瘤细胞使裸鼠致瘤 ,将随机肽库从裸鼠的尾静脉注射到裸鼠体内 ,循环数分钟后取肿瘤组织及正常对照组织进行噬菌体筛选 ;经过 2～ 3轮体内筛选 ,获得在肿瘤组织中富集的肽段。结果与结论 :利用体内噬菌体展示技术 ,结合人源肿瘤细胞 (SMMC_772 1和PLA_80 1D)裸鼠致瘤模型 ,从随机十二肽库中成功地筛选到可以较高特异性地结合SMMC_772 1肿瘤细胞或肿瘤血管的噬菌体多肽 ,通过对噬菌体单克隆进行测序 ,初步确定了几种可能的多肽基序(motif)。
- 绳纪坡李赏胡宝成
- 关键词：肿瘤细胞结合肽肽库
- 鼠源性人乳腺癌单链抗体库的构建与乳腺癌相关抗体的筛选被引量：1
- 2006年
- 目的:获得乳腺癌的噬菌体呈现型单链抗体(scFv)库,筛选与乳腺癌细胞特异结合的抗体,为乳腺癌的诊断和治疗奠定基础。方法:用乳腺癌细胞系MCF-7、T47D、MDA-MB-435免疫BALB/c小鼠,取脾脏提取总RNA,用RT-PCR分别扩增抗体重、轻链可变区(VH和VL)基因,经Linker连接形成scFv基因片段。将scFv基因片段与噬菌粒载体pCANTAB5E的连接产物转化大肠杆菌TG1。用辅助噬菌体M13KO7进行超感染,获得重组噬菌体抗体。选用乳腺癌细胞系MCF-7和人正常肝细胞系HL02做正负差异的筛选细胞,通过5轮筛选,随机挑取克隆,经phage-ELISA筛选特异性结合MCF-7细胞的scFv。结果:构建了1个库容为1.3×106的单链抗体库。筛选到2株与MCF-7细胞有较高结合活性的噬菌体-单链抗体scFv-873和scFv-874。数据库搜索表明这2株单链抗体基因是与以往抗体序列不同的新基因。用Westernblot检测了这2株单链抗体在琥珀密码子非抑制型菌株TOP10中的表达情况。结论:筛选到2个与乳腺癌细胞结合特异性较好的单链抗体,为乳腺癌的诊断和治疗研究奠定了基础。
- 袁翔胡宝成
- 关键词：单链抗体库噬菌体展示乳腺癌
- 前列腺癌细胞结合单链抗体的克隆表达及其功能初步研究被引量：1
- 2006年
- 目的:在获得纯化的前列腺癌细胞结合单链抗体scFvP-9后,对其生物学功能进行初步探讨,为前列腺癌的诊断和治疗奠定基础。方法:利用MTT比色实验初步研究了scFvP-9对多种肿瘤细胞及正常肝细胞HL02的生物学作用,并建立人宫颈癌的裸鼠模型,进行了抑瘤实验。结果:scFvP-9不影响HL02细胞及恶性程度低的人前列腺癌细胞LNCaP的生长,但对人前列腺癌细胞PC3、人宫颈癌细胞HeLa、人肺癌细胞PLA801D均有生长抑制作用;scFvP-9在荷瘤模型体内也显示了较好的抑瘤效果,与对照组相比有显著性差别,且瘤周皮下给药组效果更为显著。结论:该抗体具有潜在的重要临床应用价值。
- 田媛秦玺胡宝成黄翠芬
- 关键词：前列腺癌细胞单链抗体肿瘤抑制
- 抗前列腺癌细胞特异抗体库的构建及特异结合抗体的筛选被引量：3
- 2005年
- 目的:获得前列腺癌的噬菌体呈现型单链抗体库,筛选与前列腺癌特异结合的抗体,为前列腺癌的诊断和治疗奠定基础。方法:用两种恶性程度较高的前列腺癌细胞PC3,DU145膜蛋白混合物免疫Balb/c小鼠。取脾脏提取总RNA,用RT-PCR分别扩增抗体重、轻链可变区基因(VH和VL),经Linker连接形成ScFv基因片段,将ScFv基因片段与噬菌粒载体pCANTAB5E的连接产物转化大肠杆菌TG1。用辅助噬菌体M13K07进行超感染,获得重组噬菌体抗体。以恶性程度低的前列腺癌细胞LNCap为对照,用PC3细胞对重组噬菌体抗体库进行五轮筛选后,随机挑取克隆,经phage-ELISA筛选特异性结合PC3细胞的ScFv。结果:用所构建的库容量为3.5×106的单链抗体库筛选特异结合抗体,得到一个与PC3细胞特异结合的噬菌体-单链抗体。结论:本研究所构建的抗体库中可筛选到与前列腺癌细胞结合特异性较好的抗体,可用于前列腺癌的诊断和治疗中。
- 田媛秦玺胡宝成黄翠芬
- 关键词：噬菌体展示前列腺癌单链抗体库
