温州市科技局资助项目(Y20080106)
- 作品数：14 被引量：31H指数：4
- 相关作者：胡海燕王文花陈翔张晓艳雷磊更多>>
- 相关机构：温州医学院湖南中医药大学温州医学院附属第二医院更多>>
- 发文基金：温州市科技局资助项目浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 清心开窍方含药脑脊液对氯化钾所致PC12细胞损伤的保护机制被引量：1
- 2014年
- 目的从细胞水平研究清心开窍方含药脑脊液对氯化钾损伤的PC12细胞的保护作用。方法 SD大鼠灌胃给予清心开窍方水煎液(7.9 g/kg),2次/d,连续3.5 d,制备清心开窍方含药脑脊液。采用PC12细胞和终浓度800 mmol/L的氨化钾共培养,造成神经细胞损伤模型。RTPCR方法检测Bax mRNA、Bcl-2 mRNA、Caspase-3 mRNA表达水平,四甲基原氮唑盐(MTT)法检测清心开窍方含药脑脊液对PC12细胞活性的影响。结果清心开窍方含药脑脊液组PC12细胞活性明显高于模型组,Bax mRNA、Caspase-3 mRNA表达水平降低,Bcl-2 mRNA表达增高,与模型组比较差异显著(P<0.05,P<0.01)。结论清心开窍方对氯化钾损伤的PC12细胞有明显的保护作用。
- 张晓艳胡海燕陈翔王文花
- 关键词：清心开窍方PC12细胞
- 清心开窍方挥发油对AD大鼠大脑皮层及海马区GFAP及Caspase-3表达的影响被引量：6
- 2013年
- 目的探讨清心开窍方及其挥发油对Aβ25-35杏仁核注射诱导痴呆(Alzheimer′s disease,AD)大鼠皮层及海马区胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)、淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein,βAPP)及Caspase-3表达的影响。方法选取32只雄性SD大鼠,采用杏仁核注射Aβ25-35诱导AD大鼠模型,造模后随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组[盐酸多奈哌齐片,1.67mg/kg]、清心开窍方组(中药组,清心开窍方煎液12.67mL/kg)和挥发油组(挥发油,3.33mL/kg),另选取8只大鼠作为正常组,正常组、模型组给予等量双蒸水灌胃,各组每天干预1次,连续2周。给药结束后进行Morris水迷宫测试,记录各组大鼠水迷宫测试期间第1～5天逃避潜伏期及跨越平台次数。免疫组织化学法检测各组大鼠大脑皮层与海马区GFAP、Aβ、βAPP及Caspase-3的表达。结果与模型组比较,各用药组大鼠第3～5天逃避潜伏期均缩短,皮层与海马区GFAP、Aβ、βAPP及Caspase-3表达水平降低,跨越平台次数增加,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。与西药组比较,中药组皮层及海马区Aβ表达水平降低、βAPP升高,挥发油组皮层及海马区GFAP、βAPP及Caspase-3均升高,挥发油组第3～5天逃避潜伏期明显延长,跨越平台次数减少,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论清心开窍方能明显改善AD大鼠学习记忆能力,其机制可能是通过降低皮层及海马区GFAP、Aβ、βAPP及Caspase-3的表达发生作用。
- 胡海燕雷磊陈翔王文花张晓艳
- 关键词：清心开窍方胶质纤维酸性蛋白Β-淀粉样蛋白
- 清心开窍方抑制Aβ1-42纤维聚集的实验研究
- 2015年
- 目的:探讨清心开窍方抗Aβ1-42纤维聚集的机制。方法:实验分组:对照组、老化组单纯用Aβ1-42液,不同剂量清心开窍方组同时加入清心开窍方汤剂,老化组及不同剂量清心开窍方组均37℃恒温箱孵育7d,对照组Aβ1-42单独孵30 min,利用硫磺素T(Th-T)荧光分析法、透射电镜及扫描电镜观测Aβ1-42的聚集和纤维化程度。制备小量Affigel-Aβ,用高效液相色谱检测清心开窍方中与Affi-gel-Aβ结合的成分。结果:Th-T荧光分析示清心开窍方低、中、高剂量组对Aβ聚集与纤维形成的抑制率为分别为22.58%、75.51%、83.66%,组间比较P<0.01。透射电镜观察显示对照组Aβ1-42主要以无定型结构存在,聚集少或无明显聚集,电子密度较低,未见纤维结构形成;老化组Aβ1-42以淀粉样的纤维结构为主,交织成网状,呈针状或晶状聚集,无分枝,直径约10 nm;高、中剂量清心开窍方组Aβ1-42主要表现为无定型结构,未见明显Aβ纤维和Aβ聚集沉积,而低剂量清心开窍方组Aβ1-42主要表现为纤维型和无定型混合结构。扫描电镜观察显示对照组Aβ呈无定型,老化组纤维性结构明显增多,纤维粗,排列不规则,纵横交错,聚集形成片状结构,而清心开窍方与Aβ1-42共同孵育组,随清心开窍方浓度增加,纤维型明显减少,形成纤维束的直径逐渐变细。高效液相色谱(highperformance liquid chromatography,HPLC)检测显示:清心开窍方与Affigel-Aβ反应后,经甘氨酸(p H 2.5)洗脱的组分中存在能够被HPLC荧光检测仪检测到的物质。结论:清心开窍方具有抑制Aβ聚集和纤维形成的作用,且其中含有与Aβ结合的成分,这些成分不会促进Aβ的毒性,而可能具有抑制Aβ毒性的作用,提示在对于AD有效的中药方剂中探索与Aβ结合的成分,可能是探索AD治疗药物的一种手段。
- 胡海燕张益慧陈志裕席东泽王逸如徐冬梅王文花陈翔
- 关键词：清心开窍方阿尔茨海默病
- 清心开窍方及皂苷对AD大鼠学习记忆能力及脑组织凋亡信号转导分子,Aβ及βAPP表达的影响被引量：7
- 2012年
- 目的:探讨清心开窍方及其皂苷成分对Aβ25-35杏仁核注射诱导AD大鼠学习记忆能力及脑组织凋亡信号转导分子,Aβ及βAPP表达的影响。方法:雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、模型组、安理申组、清心开窍方组和皂苷组,每组8只。采用双侧杏仁核注射Aβ25-35(10 g.L-1)制造AD大鼠模型,造模后第2天起,分别灌胃给药安理申(1.67 mg.kg-1)、清心开窍方水煎剂(12.67 mL.kg-1)、皂苷(6.30 mg.kg-1)及双蒸水,2周后,观察大鼠水迷宫空间记忆能力,并通过免疫组化方法研究脑组织Caspase-3,Aβ及βAPP的表达。结果:中药各组能明显改善AD大鼠学习记忆能力,与对照组比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01);清心开窍方组、皂苷组大鼠大脑皮层、海马区Caspase-3,Aβ及βAPP表达水平降低,与模型组比较差异非常显著(P<0.01,P<0.05)。结论:清心开窍方及其皂苷能显著改善AD大鼠学习记忆的能力,可能是通过降低皮质、海马Caspase-3,Aβ及βAPP表达发挥作用。
- 楚生辉胡海燕谭展望陈翔王文花张晓艳
- 关键词：清心开窍方
- 清心开窍方有效成分对AD大鼠脑组织凋亡基因Bax、Bcl-2 mRNA及GFAP mRNA表达的影响被引量：4
- 2012年
- 目的:探讨清心开窍方有效成分对AD大鼠学习记忆能力及脑组织细胞凋亡基因Bax、Bcl-2 mRNA及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)mRNA表达的影响。方法:动物实验采用对照观察法。雄性SD大鼠56只,随机分为正常组、模型组、安理申组、清心开窍方组、皂苷组、多糖组和挥发油组,每组8只。采用双侧杏仁核注射Aβ25-35制造AD大鼠模型,造模后第2天起,分别灌胃给药安理申、清心开窍方水煎剂、皂苷、多糖、挥发油及双蒸水,2周后,观察大鼠水迷宫空间记忆能力,并通过RT-PCR研究脑组织Bax、Bcl-2 mRNA及GFAP mRNA的表达。结果:中药各组能明显改善AD大鼠学习记忆能力,大鼠大脑皮层、海马区Bax、GFAP mRNA表达水平降低,清心开窍方组、皂苷组皮质Bcl-2 mRNA表达水平升高,与模型组比较差异显著(P<0.05,P<0.01)。结论:清心开窍方能显著改善AD大鼠学习记忆的能力,可能是通过降低皮质、海马Bax mRNA及GFAP mRNA表达,升高Bcl-2 mRNA表达发挥作用。
- 朱未名胡海燕雷磊王文花张晓艳
- 关键词：清心开窍方胶质纤维酸性蛋白
- 清心开窍方含药脑脊液对谷氨酸致PC12细胞损伤的保护机制被引量：2
- 2013年
- 目的:从细胞水平研究清心开窍方含药脑脊液对谷氨酸(glutamate,Glu)损伤的PC12细胞的保护作用,为该方剂的临床应用提供依据。方法:SD大鼠灌胃给予清心开窍方水煎液(7.9 g.kg-1),每天分2次灌服,连续3.5 d,以制备清心开窍方含药脑脊液。PC细胞分为正常组、模型组、尼莫地平组、10%正常脑脊液组、10%含药脑脊液组、20%正常脑脊液组、20%含药脑脊液组,除正常组外,其余各组采用PC12细胞和终浓度20 mmol.L-1的Glu共培养,造成神经细胞损伤模型。除模型组和正常组外,其余各组分别采用尼莫地平、正常脑脊液、10%和20%含药脑脊液进行干预,以RT-PCR方法检测各组Bax,Bcl-2,Caspase-3 mRNA表达水平,MTT法检测PC12细胞活性。结果:清心开窍方含药脑脊液组PC12细胞活性明显高于模型组,Bax,Caspase-3 mRNA表达水平降低,Bcl-2 mRNA表达增高,与模型组比较差异显著(P<0.01),20%含药脑脊液组疗效优于10%含药脑脊液组(P<0.01)。结论:清心开窍方对Glu损伤的PC12细胞有明显的保护作用。
- 胡海燕席东泽雷磊陈翔王文花
- 关键词：清心开窍方PC12细胞
- 清心开窍方含药脑脊液对过氧化氢(H_2O_2)所致PC12细胞损伤的保护作用被引量：2
- 2013年
- 目的:从细胞水平研究清心开窍方含药脑脊液对过氧化氢(H2O2)损伤的PC12细胞的保护作用,为该方剂的临床应用提供依据。方法:SD大鼠灌胃给予清心开窍方水煎液(7.9 g.kg-1),每日2次,连续3.5 d,制备清心开窍方含药脑脊液。采用PC12细胞和终浓度200μmol.L-1的过氧化氢共培养,造成神经细胞损伤模型。RT-PCR方法检测Bax mRNA、Bcl-2 mRNA、Caspase-3 mRNA表达水平,MTT法检测清心开窍方含药脑脊液对PC12细胞活性的影响。结果:清心开窍方含药脑脊液组PC12细胞活性明显高于模型组,清心开窍方含药脑脊液组PC12细胞活性明显高于模型组,Bax mRNA、Caspase-3 mRNA表达水平降低,Bcl-2 mRNA表达增高,与模型组比较,差异显著(P<0.05～0.01)。结论:清心开窍方对H2O2损伤的PC12细胞有明显的保护作用。
- 朱未名胡海燕陈翔王文花
- 关键词：清心开窍方PC12细胞
- 清心开窍方挥发油对AD大鼠皮质GFAP、Aβ及βAPP表达的影响被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨清心开窍方挥发油对Aβ25-35杏仁核注射诱导AD大鼠皮质区GFAP、Aβ、βAPP及IL-6表达的影响。方法:雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、模型组、安理申组、清心开窍方组和挥发油组。采用杏仁核注射Aβ25-35诱导AD大鼠模型,观察大鼠水迷宫空间记忆能力,并通过免疫组化方法研究皮质区GFAP、Aβ、βAPP及IL-6的表达。结果:清心开窍方和挥发油能改善AD大鼠学习记忆能力,大鼠皮质区GFAP、Aβ、βAPP及IL-6表达水平降低,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:清心开窍方能明显改善AD大鼠学习记忆能力,其机制可能是通过降低皮质GFAP、Aβ、βAPP及IL-6的表达发生作用。
- 朱未名胡海燕陈翔王文花张晓艳楚生辉
- 关键词：清心开窍方胶质纤维酸性蛋白淀粉样蛋白
- 清心开窍方含药脑脊液对Aβ_(25-35)所致PC12细胞损伤的保护作用被引量：6
- 2012年
- 目的:从细胞水平研究清心开窍方含药脑脊液对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)损伤的PC12细胞的保护作用,为该方剂的临床应用提供依据。方法:SD大鼠灌胃给予清心开窍方水煎液(7.9 g·kg-1),每日2次,连续3.5 d,制备清心开窍方含药脑脊液。采用PC12细胞和终浓度10μmol·L-1的β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)共培养,造成神经细胞损伤模型。RT-PCR方法检测Bax,Bcl-2,Caspase-3 mRNA表达水平,MTT法检测清心开窍方含药脑脊液对PC12细胞活性的影响。结果:清心开窍方含药脑脊液组PC12细胞活性明显高于模型组,Bax,Caspase-3 mRNA表达水平降低,Bcl-2 mRNA表达增高,与模型组比较差异显著(P<0.05,P<0.01)。结论:清心开窍方对Aβ25-35损伤的PC12细胞有明显的保护作用。
- 叶光华胡海燕陈翔王文花张晓艳
- 关键词：清心开窍方PC12细胞
- 大鼠双侧杏仁核注射Aβ25-35对学习记忆与皮质区Bax、Bcl-2表达的影响及清心开窍方皂苷的干预作用被引量：3
- 2012年
- 目的:探讨大鼠双侧杏仁核注射Aβ25-35对大鼠学习记忆与皮质区Bax、Bcl-2、Aβ、GFAP表达的影响及清心开窍方皂苷的干预作用。方法:动物实验采用对照观察法。雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、模型组、安理申组、清心开窍方组、皂苷组,每组8只。采用双侧杏仁核注射Aβ25-35制造AD大鼠模型,造模后第2天起,分别灌胃给药及双蒸水2周后,观察大鼠水迷宫空间记忆能力,并通过免疫组化法研究大鼠皮质区Bax、Bcl-2、Aβ及GFAP的表达。结果:中药各组能明显改善AD大鼠学习记忆能力,大鼠皮质区Bax、Aβ、GFAP表达水平降低,Bcl-2表达水平提高,与对照组比较差异显著(P<0.01～P<0.05)。结论:清心开窍方能改善AD大鼠学习记忆的能力,可能是通过降低皮质区Bax、Aβ、GFAP表达及升高Bcl-2表达发挥作用。
- 朱未名胡海燕陈翔王文花
- 关键词：清心开窍方胶质纤维酸性蛋白
