国家质检总局科技计划项目(2009IK220) 作品数:4 被引量:8 H指数:2 相关作者: 孙立新 叶松 朱国强 杨庆贵 胡红霞 更多>> 相关机构: 安徽理工大学 江苏出入境检验检疫局 江苏省出入境检验检疫局 更多>> 发文基金: 国家质检总局科技计划项目 江苏检验检疫局科研项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
不同保存方法对蚊虫RNA保护效果的评价 被引量:5 2011年 目的研究适合口岸媒介生物监测的蚊虫样本保存方法,并对蚊虫RNA保护效果进行评价。方法采用普通冰箱、低温冰箱、液氮、RNALater等保存方式,对蚊虫进行1周、1个月、6个月保存,提取蚊虫RNA,比较这些保存方式对蚊虫RNA保护效果。结果 RNALater与液氮对蚊样本均具有良好的保存效果,在1周、1个月、6个月内,蚊虫RNA均未见明显降解;低温冰箱在1周、1个月内对蚊样本有较好的保存效果,蚊虫RNA未见明显降解,但6个月后,蚊虫RNA降解明显;常温冰箱(-20℃)保存效果不佳,仅在1周之内对蚊虫核酸有一定的保护效果,1个月后,RNA发生明显降解。结论 RNALater、液氮和低温冰箱在1个月内对蚊虫RNA均具有较好的保存效果,但RNALater具有保存时效长、使用方便等优点,更适用口岸蚊虫监测中样本的保存和运输。 孙立新 胡红霞 朱国强 杨庆贵关键词:核糖核酸 江苏口岸常见鼠形动物Cytb基因分析 被引量:2 2013年 目的通过基因分析,建立江苏口岸常见鼠形动物Cytb基因数据库和进化树,为口岸常见鼠形动物进行分子鉴定奠定基础。方法通过基因扩增、构建质粒载体、测序等方法,建立江苏口岸常见鼠形动物Cytb基因数据库。结果获得了褐家鼠、黄胸鼠、小家鼠、黑线姬鼠和大麝鼩等5种鼠形动物全长Cytb基因,并建立了5种鼠形动物Cytb基因进化树。结论建立了江苏口岸常见鼠形动物Cytb基因数据库和进化树,为实现部分鼠形动物的分类鉴定奠定了基础。 吴炳耀 叶松 刘国礼 孙立新关键词:鼠形动物 CYTB基因 新型蚊媒RNA病毒检测方法的建立 2013年 目的建立一种不使用特异引物的新型蚊媒RNA病毒检测方法,以期用于蚊媒病毒的检测。方法利用白纹伊蚊C6/36细胞对蚊虫RNA病毒进行培养,提取病毒RNA后反转录成cDNA,经酶切、接头连接、产物扩增、测序、序列比对,确定病毒种类。结果用建立的蚊媒RNA病毒检测方法可检出实验室培养的乙型脑炎病毒、黄热病毒和登革热病毒,其PCR产物序列与GenBank中相应的已知序列比较,同源性分别>99%、>99%和>95%。结论该方法能够有效、准确地检出蚊虫体内的RNA病毒,可用于蚊媒RNA病毒的检测。 吴昊 叶松 陆军 孙立新关键词:蚊媒 RNA病毒 蚊AFLP技术体系的建立 被引量:1 2012年 目的探讨蚊扩增片段长度多态性(Amplified Fragment Length Polymorphism,AFLP)的各种影响因素,建立并优化蚊AFLP反应体系。方法以淡色库蚊成蚊为研究材料,对AFLP反应中的关键步骤,即多氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid,DNA)提取、酶切及连接反应、预扩增和选择性扩增体系进行探索。结果酶切及连接反应5h完成,将产物稀释10倍进行预扩增得到清晰的弥散带;预扩增产物稀释10倍及调整选扩循环数,可获得带型丰富且重复性好的结果。结论蚊AFLP反应体系的建立为进一步分子生物学研究提供了基础。 胡红霞 孙立新 叶松 陆军 朱国强 杨庆贵关键词:扩增片段长度多态性