国家自然科学基金(30571837)
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
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- NM23-H1基因调控肺癌侵袭转移相关基因的研究被引量：3
- 2010年
- 目的研究与NM23-H1基因有关的肺癌侵袭转移相关基因。方法在抑制消减cDNA文库的基础上制备基因表达谱芯片。经芯片杂交、克隆测序及同源性分析得到人大细胞肺癌细胞株L9981和L9981-nm23-H1各差异表达基因的信息,再以实时荧光定量PCR技术对筛选出的差异基因作进一步的验证。结果成功制备了人大细胞肺癌细胞株L9981和L9981-nm23-H1差异表达基因的基因表达谱芯片。经测序及同源性分析发现19个差异表达基因。经荧光定量PCR验证发现转染NM23-H1后,L9981细胞中PSMA7、SBDS、ODC1、YARS、CSDA、PTP4A1、SHPRH和TOMM7 8个基因的mRNA表达上调,PKM2和GMNN基因的mRNA表达下调。结论 NM23-H1基因可能为转移相关的上游调节基因,它可通过对下游一系列基因进行调节而实现对肺癌转移潜能的抑制作用。
- 蔡春季叶苏娟朱文孙丽亚万海粟冯志华马力李璐
- 关键词：肺癌NM23-H1基因差异表达基因
- nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株抑制消减cDNA文库的构建被引量：2
- 2008年
- 背景与目的已有的研究表明,nm23-H1基因是一个重要的肺癌转移抑制基因,为了筛选与该基因表达相关的差异表达基因,本研究拟构建nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株(L9981和L9981-nm23-H1)差异表达基因的抑制消减cDNA文库,为进一步筛选、克隆与nm23-H1转移相关的基因奠定基础。方法利用抑制消减杂交(suppressive subtractive hybridization,SSH)技术构建nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株(L9981和L9981-nm23-H1)间差异表达基因的正向和反向消减cDNA文库,经蓝白菌落筛选克隆,并PCR反应鉴定。结果成功构建了该两株细胞株差异表达基因的正向和反向消减cDNA文库。经蓝白菌落筛选,正向消减文库总共获得约300个白斑克隆,反向消减文库总共获得约400个白斑克隆,从正反向消减文库中各挑选96个克隆进行PCR扩增检测是否有插入片段,结果显示在挑选的正向文库中有84个克隆有插入片段,反向文库中有83个克隆有插入片段,其片段大小范围为(300-750)bp。结论抑制消减杂交是克隆差异表达基因的有效方法,我们应用SSH法和T/A克隆技术成功建立了nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株(L9981和L9981-nm23-H1)差异表达基因的抑制消减cDNA文库。nm23-H1基因在肺癌细胞中的表达可能影响某些转移相关基因的差异表达。
- 叶苏娟冯志华朱文蔡春季李潞孙丽亚万海粟马力周清华
- 关键词：肺肿瘤NM23-H1基因抑制消减杂交CDNA文库转移相关基因
- 高转移和低转移人大细胞肺癌细胞株的比较蛋白组学研究被引量：2
- 2008年
- 目的探讨比较人高转移大细胞肺癌细胞株(L9981)和人低转移大细胞肺癌细胞株(NL9980))间蛋白质表达的差异。方法采用固相pH梯度双向凝胶电泳分离L9981细胞株和NL9980细胞株的总蛋白,用图像分析软件比较分析细胞间的差异表达蛋白质。对13个差异表达的蛋白质点通过胶内酶解,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALD-TOF-MS/MS)和蛋白质数据库检索进行鉴定。结果经ImageMaster软件分析后发现有8个蛋白质点仅在L9981中检测到有表达,8个蛋白质点仅在NL9980中检测到有表达,发现19个蛋白质点在两种肺癌细胞株中均存在,其中9个蛋白质点在L9981中表达量显著高于NL9980,10个蛋白质点在NL9980中表达量显著高于L9981(P<0.05)。通过对差异明显的蛋白质点进行质谱鉴定和蛋白质数据库查询,发现线粒体热休克蛋白和谷胱甘肽合成酶在L9981中的表达被上调,P47蛋白、免疫球蛋白重链可变区、烯醇化酶1和真核翻译起始因子3在L9981中的表达被下调,丙酮酸激酶仅在L9981中有表达,WD-40重复蛋白仅在NL9980中有表达。结论人高、低转移大细胞肺癌细胞株蛋白质组的表达存在明显差异,鉴定的差异蛋白质多与肿瘤的侵袭转移相关,这些差异蛋白质有可能为进一步发现与肺癌转移相关的分子标志物和阐明肺癌转移的分子机制提供线索。
- 高利伟朱文冯志华安宁
- 关键词：比较蛋白质组学肺癌转移
- 肺癌转移抑制相关基因研究进展
- 2007年
- 肺癌是发病率和死亡率增长最快、对人类健康威胁最大的恶性肿瘤之一。侵袭转移是肺癌患者死亡的首要原因。研究表明,在肺癌中发挥转移抑制作用的相关基因主要有nm23、KAI1、TIMP、Cadherin以及MRP-1等。
- 冯志华朱文
- 关键词：肺癌基因
- nm23-H1调控肿瘤侵袭转移分子机制研究进展被引量：4
- 2009年
- 侵袭转移是恶性肿瘤的重要生物学特征,也是导致肿瘤患者治疗失败和死亡的主要原因。研究表明,nm23基因家族与肿瘤的发生、发展及转移密切相关。其中,nm23-H1是被发现的第一个人类nm23基因,与肿瘤侵袭转移关系极为密切。现将nm23-H1基因调控肿瘤侵袭转移分子机制的研究进展作一综述。
- 叶苏娟朱文
- 关键词：NM23-H1基因肿瘤分子机制肺肿瘤乳腺肿瘤
