云南省科技创新强省计划项目(2007C0012Z)
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 相关作者:马开利施锐李鸿钧孙茂盛张莹更多>>
- 相关机构:中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金:云南省科技创新强省计划项目更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- Neurturin基因的克隆及其在Vero细胞中的表达被引量:1
- 2008年
- 目的克隆Neurturin(NTN)基因,并在Vero细胞中表达。方法用RT-PCR方法扩增hNTN cDNA,并克隆至pcDNA3真核表达载体中,经Lipofectamine2000转染Vero细胞,挑选稳定表达克隆,用RT-PCR及免疫荧光分析鉴定,并对转染后细胞的形态及生长状况进行分析。结果重组质粒pcDNA3/hNTN转染Vero细胞后获得了稳定表达克隆,且有目的蛋白表达,转染后细胞形态和生长特性发生了一定改变。结论获得了稳定表达NTN蛋白的Vero细胞株,为其移植并进行帕金森病猴基因治疗动物实验奠定了基础。
- 马开利孙茂盛施锐张莹杨芳奎翔谭振国李鸿钧
- 关键词:VERO细胞克隆帕金森病
- 神经营养因子Neurturin在Vero细胞中的表达及其生物学活性研究
- 2009年
- 目的探讨Neurturin(NTN)基因转染Vero细胞后的表达情况,为恒河猴帕金森病(PD)基因治疗打下基础。方法将表达载体pcDNA3-hNTN转染Vero细胞,挑选稳定表达克隆,用RT-PCR及免疫荧光分析鉴定,并对表达的人NTN蛋白进行了体外生物学活性测定。结果pcDNA3-hNTN质粒转染Vero细胞后获得了稳定表达克隆且有目的蛋白hNTN表达,表达的hNTN在体外能够促进培养的鸡胚背根神经节长出神经突起,并能促进体外培养的胚胎中脑多巴胺能神经元的存活。结论获得了能稳定表达NTN蛋白的Vero细胞株,其表达的hNTN对体外培养的中脑多巴胺能神经元具有保护作用,为移植并进行PD猴基因治疗动物实验打下了基础。
- 谢天宏马开利尹娜施锐王晚璞王文举严敏孙茂盛李鸿钧
- 关键词:NEURTURINVERO细胞生物学活性帕金森氏病