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江苏省自然科学基金(BK2008068)
江苏省自然科学基金(BK2008068)
- 作品数:1 被引量:0H指数:0
- 相关作者:王耀蔡冉潘英周洁李越希更多>>
- 相关机构:中国食品药品检定研究院中国人民解放军南京军区军事医学研究所南京医科大学更多>>
- 发文基金:江苏省社会发展科技计划江苏省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 抗Ⅱ型单纯疱疹病毒表面抗原gD单克隆抗体的制备及鉴定
- 2012年
- 制备抗Ⅱ型单纯疱疹病毒(Simplex Herpes VirusⅡ,HSV-2)表面抗原gD的单克隆抗体(mAb)并对其性质进行鉴定。以基因工程重组制备纯化的HSV2-gD为抗原免疫BALB/c小鼠,采用常规融合制备杂交瘤细胞,通过HAT选择培养、有限稀释法获得单克隆细胞株,用间接ELISA法、Western blot方法筛选和鉴定阳性杂交瘤细胞株。获得了4株可稳定分泌抗HSV2-gD抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1A11C6、1A11F10、4C9D5以及4C9E9,抗体的类型均为IgG1,轻链均为κ型,Western blot结果显示各单抗都可以特异性识别HSV2-gD。用杂交瘤细胞注射小鼠制备腹水,腹水内的抗体效价均大于1×10-5,腹水内的抗体经硫酸铵-辛酸分级沉淀和阴离子交换柱纯化,成功制备了纯度超过95%的高特异性抗体,抗体有较好的特异性。为进一步研究HSV2感染和临床上的预防、诊断及治疗提供了有力的工具。
- 王耀刘武周洁蔡冉潘英李素芹张庶民李越希
- 关键词:糖蛋白D单克隆抗体酶联免疫法