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腺病毒介导的小鼠可溶性endoglin和可溶性血管内皮生长因子受体-1重组蛋白的构建和功能初步鉴定: 2009年; 目的构建腺病毒介导的小鼠可溶性endoglin（sEng）和可溶性血管内皮生长因子受体-1（sFlt-1）重组蛋白，观察其对内皮细胞管化及滋养细胞迁移的影响。方法提取小鼠胎盘组织总RNA，通过RT—PCR获得sEng和sFlt-1 cDNA，插入到穿梭载体pAdTrack—CMV中，获得pATC-sEng和pATC—sFh-1质粒，转化其至pAdeasy-1受体菌，选阳性克隆转染293A细胞，获得Ad／sEng和Ad／sFlt-1，制备高滴度病毒液。用病毒感染COS7细胞，检测sEng和sFlt-1蛋白表达，并通过成管和划痕实验观察两种蛋白对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）管化和Bewo细胞迁移的影响。结果成功获得sEng和sFlt-1重组腺病毒，其滴度分别为2．2×10^11pfu／ml和2．0X10^11pfu／ml。感染COS7细胞后，sEng和sFlt-1蛋白均较高表达，并能抑制HUVEC管化及Bewo细胞迁移，两者有协同作用。结论构建的腺病毒介导的小鼠sEng和sFlt-1重组蛋白对血管生成和滋养细胞迁移有明显抑制作用。; 唐洁胡娅莉刁振宇孙海翔颜桂军陈林君张艳青; 关键词：细胞内信号肽和蛋白质类血管内皮生长因子受体1 重组蛋白质类腺病毒科

富含半胱氨酸蛋白61多克隆抗体的制备及其在子痫前期胎盘检测中的作用被引量：3: 2009年; 目的:制备兔抗人富含半胱氨酸蛋白(Cyr61)多克隆抗体,并用该抗体检测Cyr61蛋白在重度子痫前期(PE)和正常妊娠胎盘中的差异表达。方法:用RT-PCR法从Hela细胞中克隆Cyr61全长mRNA,并在大肠杆菌中表达获得重组蛋白,免疫新西兰白兔得到兔抗人Cyr61多克隆抗体。然后用此抗体对14例重度子痫前期胎盘进行检测,并与孕周匹配的14例正常胎盘比较。结果:Cyr61DNA测序结果与参考序列一致;Western blot竞争法证实制备的兔抗Cyr61抗体与商品化的羊抗Cyr61抗体有共同的靶点;用制备的兔抗人Cyr61蛋白抗体Westernblot检测发现,在重度PE胎盘中Cyr61蛋白含量较正常胎盘含量降低(14.2±1.0vs.29.2±1.1P<0.05)。结论:本研究成功地在大肠杆菌中表达出Cyr61融合蛋白,并制备了特异性高的兔抗人Cyr61抗体。重度PE胎盘中Cyr61蛋白表达水平降低。; 苏莉刁振宇胡娅莉张艳青王志群; 关键词：重组蛋白多克隆抗体子痫前期

重度子痫前期和正常妊娠胎盘中微小RNA-155及富含半胱氨酸蛋白61的差异表达被引量：1: 2010年; 目的探讨微小RNA-155（microRNA-155，miR-155）和富含半胱氨酸蛋白61（cysteine—rich61，CYR61）在重度子痢前期和正常妊娠胎盘中差异表达的意义。方法取18例重度子痫前期患者（孕36～40周）胎盘和同期分娩且孕周匹配的18例正常产妇胎盘，从mRNA水平检测miR-155和CYR61mRNA的表达情况，并在蛋白水平检测CYR61的表达情况。结果与正常产妇胎盘相比，重度子痢前期组胎盘的miR-155表达水平明显增高（165．7±16．4和527．9±49．1，t=7．00，P〈0．01）；而CYR61mRNA表达水平及蛋白表达水平均降低（31．7±2．7和16．4±1．2，t=5．10，P〈0．01；36．4±1．5和19．7±1．2，t=36．26，P〈0．01）。重度子痢前期和正常妊娠胎盘组织中的miR-155与CYR61mRNA的检测结果的相关性分析显示，两组内两者表达均呈负相关（r=-0．52，P〈0．05；r=-0．57，P％0．05）。结论重度子痢前期患者胎盘中miR-155的上调，可能与促血管生成因子——CYR61的表达下降有关。miR-155、CYR61可能共同参与了子痂前期胎盘血管缺陷的发生。; 王志群苏莉刁振宇周建军戴毅敏张艳青胡娅莉; 关键词：妊娠微RNAS 富含半胱氨酸蛋白61 胎盘

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