国家自然科学基金(81073111)
- 作品数：27 被引量：243H指数：11
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- RP-HPLC法测定山茱萸环烯醚萜总苷中马钱苷和莫诺苷含量被引量：16
- 2014年
- 目的建立反相高效液相色谱法测定山茱萸环烯醚萜总苷中马钱苷和莫诺苷含量的方法，为完善山茱萸环烯醚萜总苷的质量评价提供依据。方法色谱柱：Lichrosphere C18柱（4．6mm×150mm，5μm）；流动相：乙腈-水梯度洗脱（0～12min，乙腈比例由10％增加到55％）；流速1.0mL／min；柱温30℃；检测波长240nm。结果马钱苷和莫诺苷分别在o．088-0．528μg（r=0.9998）和0.088-0．352μg（r=0．9995）之间范围内线性关系良好；平均回收率（n=6）分别为98．7％（RSD=1．3％）、98．6％（RSD=0.8％）。结论所建立的方法简便、准确、分离效果好、重复性好。可以用干控制山菜萤环烯醚萜总菩的席号．
- 李伟许惠琴陶玉菡农伟虎吴佳蕾
- 关键词：山茱萸环烯醚萜总苷马钱苷莫诺苷
- 基于网络药理学研究补中益气汤治疗糖尿病肾病的潜在作用机制被引量：5
- 2020年
- 目的:运用网络药理学技术预测补中益气汤治疗糖尿病肾病的作用靶点和信号通路,进一步探讨补中益气汤防治糖尿病肾病的物质基础和潜在作用机制。方法:利用中药系统药理学技术平台(TCMSP:http://lsp.nwu.edu.cn/tcmsp.php)获得补中益气汤的活性成分及其作用靶点,从Gene Cards数据库收集与糖尿病肾病相关的靶标基因,将药物作用靶点和疾病相关靶标基因取交集得到该方治疗糖尿病肾病的关键作用靶点,使用String数据库对关键作用靶点构建蛋白质相互作用网络,并通过Cytoscape软件将结果可视化。借助DAVID和Clue Go对关键作用靶点进行基因本体论(gene ontology,GO)分析和KEGG富集。结果:该方法找出了补中益气汤182个活性成分和41个关键作用靶点其中DPP4,MAPK14,MAPK3,MAPK8,MMP2,MMP3,MPO,MTTP,NOS3等关键基因主要通过调控AGE-RAGE信号通路,Toll样受体信号通路,c AMP信号通路,白细胞介素17(IL-17)信号通路,Relaxin信号通路,在细胞外泌体,细胞间隙,细胞核中发挥作用。结论:通过网络药理学预测补中益气汤防治糖尿病肾病的关键靶点及其相关信号通路,推测该方剂对糖尿病肾病的潜在作用机制,可能主要参与抗炎、调节糖脂代谢及氧化应激等过程,为阐明补中益气汤对糖尿病肾病的作用机制提供了科学依据。
- 陈璟徐坠成徐贝贝许惠琴吕志阳
- 关键词：补中益气汤糖尿病肾病网络药理学
- 高糖对人肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质的影响被引量：12
- 2013年
- 目的观察不同浓度的葡萄糖对人肾小球系膜细胞增殖的影响及对细胞外基质纤维连接蛋白(Fn),Ⅳ型胶原(ColⅣ)的影响。方法体外培养人肾小球系膜细胞株,分别加入葡萄糖终浓度为5.5、10、20、30、40 mmol/L进行处理,于不同时间段(12、24、48、72 h)用MTT法检测肾小球系膜细胞的增殖情况,ELISA法检测培养48 h后条件培养基中Fn及ColⅣ的含量。结果高糖作用12、24、48、72 h均能促进细胞的增殖,且随着葡萄糖浓度升高作用时间的延长促进作用增强。检测细胞上清液的Fn和ColⅣ。与对照组相比,30 mmol/L D-葡萄糖作用48 h后,Fn和ColⅣ表达增高。结论高浓度葡萄糖对系膜细胞增殖作用具有量效及时效关系,我们选择30 mmol/L浓度的葡萄糖作用48 h为最合适的细胞刺激条件。高浓度葡萄糖可促进系膜细胞细胞外基质的产生,而系膜细胞细胞外基质过度表达,可以直接导致细胞外基质的积聚,从而导致肾小球硬化的发生。
- 吕高虹许惠琴秦佩佩刘斌刘凯
- 关键词：人肾小球系膜细胞细胞增殖纤维连接蛋白
- 生地黄、山茱萸水提液及其含药血清对体外糖基化产物生成的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:观察生地黄,山茱萸水提液及其含药血清对体外糖基化产物生成的影响。方法:200 mmol.L-1的葡萄糖与牛血清白蛋白组成反应系统,37℃温孵,分别加入生地黄,山茱萸及其配伍水提液,含药血清,测早期糖化蛋白(果糖胺)及晚期糖基化产物(AGEs),计算抑制率(inhibitory rate,IR),及半数抑制率(IC50)。结果:山茱萸,生地黄,山茱萸,生地黄配伍分煎及合煎的早期糖化产物(果糖胺)IC50分别为0.104,0.159,0.146,0.077 g.L-1;晚期糖基化产物(AGEs)IC50分别为0.175,0.221,0.143,0.076 g.L-1。提示生地黄,山茱萸水提液对早期和晚期糖化产物均有一定抑制作用。此外生地黄,山茱萸含药血清对早期糖化蛋白IC50分别为:37.9%,49.1%,52.8%,31.6%;对晚期糖基化产物IC50分别为:78.5%,92.3%,82.9%,73.2%。表明生地黄-山茱萸含药血清对果糖胺与AGEs也都具有一定的抑制作用,且生地黄-山茱萸合煎组抑制果糖胺和AGEs的IC50优于其他组。结论:生地黄山茱萸配伍对抑制果糖胺和AGEs具有协同作用。
- 吕高虹许惠琴农伟虎吕兴
- 关键词：生地黄山茱萸水提液含药血清果糖胺
- 基于网络药理学的防己黄芪汤防治2型糖尿病的潜在作用机制研究被引量：13
- 2020年
- 为了基于网络药理学方法研究防己黄芪汤防治2型糖尿病的潜在作用机制,采用中药系统药理学数据库及技术平台(TCMSP),按照口服生物利用度OB≥30%和类药性DL≥0.18筛选处方中的活性成分及其相关靶点,通过Uniprot数据库找出对应官方基因名称。利用疾病靶点相关数据库检索与2型糖尿病相关的靶点基因。将活性成分所对应的靶点基因和2型糖尿病相关的靶点基因进行交集获得两者的共同基因即为防己黄芪汤治疗2型糖尿病的关键靶点。使用Cytoscape软件构建中药-活性成分-关键靶点网络,根据度值进行筛选,寻找该方剂防治2型糖尿病的主要物质基础。利用DAVID数据库及ClueGo插件对关键作用靶点进行GO注释分析和KEGG通路分析,从而探究防己黄芪汤干预2型糖尿病的生物过程及作用通路。结果显示,筛选得到防己黄芪汤122个活性成分及242个潜在作用靶点,其中,与2型糖尿病重复的83个关键靶点中STAT3,AKT1,TNF,JUN,TP53,MAPK14,MAPK1,MAPK8可能通过调控AGE-RAGE信号通路、MAPK信号通路、AMPK信号通路、FoXO信号通路发挥治疗作用。由此得出结论:通过网络药理学预测防己黄芪汤防治2型糖尿病的关键靶点及其相关信号通路,推测该方剂对2型糖尿病的潜在作用机制,大都和脂代谢的过程、氧化应激过程相关,为进一步阐明防己黄芪汤对2型糖尿病的作用机制提供了科学依据。
- 陈璟徐贝贝徐坠成单鑫王威王威许惠琴
- 关键词：防己黄芪汤2型糖尿病网络药理学
- 生地环烯醚萜苷类成分对AGEs损伤HUVEC的保护作用被引量：16
- 2015年
- 目的观察生地环烯醚萜苷类成分梓醇、毛蕊花糖苷对晚期糖基化终产物（AGEs）损伤人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的保护作用。方法体外培养HUVEC,将细胞分为正常对照组、模型组、梓醇组及毛蕊花糖苷组,并设氨基胍组作为阳性对照。加入终浓度为0.05、0.1、0.5、1、5、10、100μmol/L的药物分别预孵1h后,加入200mg/L的AGEs作为刺激物继续培养,24h后用MTT法检测并计算药物对AGEs致HUVEC损伤的保护率。体外培养HUVEC,加入氨基胍及梓醇、毛蕊花糖苷（终浓度分别为1、10、100μmol/L）预孵1h后,加入终浓度为200mg/L的AGEs,另设模型组及空白对照组,24h后取各组细胞培养上清液,试剂盒测定超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、活性氧（ROS）和NO;ELISA法测定内皮素（ET）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、转化生长因子-（TGF-β）及白介素1（IL-1）。结果生地环烯醚萜苷类成分梓醇、毛蕊花糖苷（0.05、0.1、0.5、1、5、10、100μmol/L）可减轻AGEs致HUVEC的损伤。与空白对照组比较,模型组细胞上清液中ROS、AngⅡ、MDA含量增加（P〈0.05-0.01）,SOD活力和NO水平降低（P〈0.05-0.01）,TGF-β、IL-1β分泌增加（P〈0.05-0.01）。而梓醇、毛蕊花糖苷给药组（1、10、100μmol/L）能不同程度的降低ROS、AngⅡ、MDA含量,升高SOD活力和NO水平,减少TGF-、IL-1分泌,与模型组比较具有显著性差异（P〈0.05-0.01）。结论生地环烯醚萜苷类成分梓醇、毛蕊花糖苷可通过抑制氧化应激、调节内皮细胞分泌功能、抑制炎症因子及抗细胞粘连等保护血管内皮细胞。
- 陆春红许惠琴刘凯吕兴吴云皓周芷若
- 关键词：环烯醚萜苷晚期糖基化终产物人脐静脉内皮细胞
- 生地黄-山茱萸对AGEs致HUVEC细胞损伤的保护作用被引量：3
- 2013年
- 目的观察生地黄、山茱萸对晚期糖基化终产物(AGEs)作用下人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的保护作用。方法体外培养HUVEC,将细胞分为正常对照组、AGEs组、生地黄组、山茱萸组、生地黄-山茱萸分煎及合煎组,加入终浓度为0.125、0.062 5、0.031 25g/L的药物预孵1h后,加入200mg/L的AGEs作为刺激物,继续培养24h后,用CCK-8测定并计算药物对AGEs致HUVEC损伤的保护率;取各组细胞上清液,试剂盒测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、乳酸脱氢酶(LDH),ELISA法测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1。结果生地黄、山茱萸、生地黄-山茱萸(0.125、0.062 5、0.031 25g/L)对AGEs致HUVEC损伤均有保护作用。AGEs组细胞上清液中SOD活性、NO含量降低(P<0.05～0.01),MDA、LDH含量增加(P<0.05～0.01),TNF-α、IL-1分泌增加(P<0.05～0.01)。而各给药组能提高SOD活性、NO含量,降低LDH、MDA,减少TNF-α和IL-1分泌,与AGEs组比较有显著性差异(P<0.05～0.01)。结论生地黄、山茱萸、生地黄-山茱萸通过增加内皮细胞NO生成量、抑制氧化应激、调节细胞分泌功能来保护血管内皮细胞的,尤以生地黄-山茱萸保护HUNEC最为明显。
- 吴佳蕾许惠琴谭真李莉陶玉菡李伟
- 关键词：生地黄山茱萸人脐静脉内皮细胞晚期糖基化终产物
- 肾系膜细胞与糖尿病肾病变的相关性研究被引量：11
- 2011年
- 糖尿病肾病(DN)是糖尿病最常见而又最难治的微血管并发症,其基本病理改变为细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)积聚和基底膜的增厚。肾小球系膜细胞病变是糖尿病肾病最突出的病理改变之一,它是糖尿病肾病(DN)致病因子作用的主要靶细胞。在糖尿病状态下,对肾小球系膜细胞功能的研究对阐明DN发病机理具有重要意义。
- 吕高虹许惠琴
- 关键词：糖尿病肾病系膜细胞
- 马钱苷、莫诺苷对AGEs损伤HUVEC的增殖的影响被引量：10
- 2014年
- 目的:研究山茱萸效应成分马钱苷、莫诺苷对晚期糖基化终末产物(AGEs)损伤人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的影响及保护作用。方法:体外培养HUVEC,加入阳性药氨基胍及马钱苷、莫诺苷(终浓度分别为0.05、0.1、0.5、1、5、10μmol/L),预孵1h后,加入终浓度为200 mg/L的AGEs,另设模型组及空白对照组,孵育24h后,采用MTT法检测吸光度(OD)值;体外培养HUVEC,加入氨基胍及马钱苷、莫诺苷(终浓度分别为1、10、100μmol/L)预孵1h后,加入终浓度为200 mg/L的AGEs,另设模型组及空白对照组,孵育24h后取细胞培养上清液,检测活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、转化生长因子-β(TGF-β)、白介素-1β(IL-1β)水平。结果:对增殖影响研究发现,氨基胍在终浓度5、10μmol/L时,马钱苷在终浓度1、5、10μmol/L时,莫诺苷在终浓度0.1、0.5、1、5、10μmol/L时,对AGEs损伤HUVEC具有显著的增殖保护作用,且随着浓度增高,增殖保护作用增强;对保护作用研究发现,模型组细胞上清液中SOD、NO含量降低,ROS、MDA、ET、AngⅡ、TGF-β、IL-1β含量增加;而马钱苷、莫诺苷可不同程度的提高SOD、NO活力,降低ROS、MDA、ET、AngⅡ、TGF-β、IL-1β活力,与模型组比较有显著性差异。结论:山茱萸效应成分马钱苷、莫诺苷可通过调节内皮细胞分泌功能、抑制氧化应激、炎症因子释放及抗细胞粘连等保护血管内皮细胞最终达到治疗糖尿病目的。
- 刘凯许惠琴吴佳蕾陆春红吕兴吴云皓周芷若
- 关键词：山茱萸马钱苷莫诺苷AGESHUVEC
- 基于网络药理学的益母草治疗心梗潜在靶点的研究被引量：1
- 2020年
- 基于网络药理学方法研究益母草治疗心梗的作用机制。采用中药系统药理学数据库及技术平台(TCMSP)根据OB≥30%和DL≥0.18的条件筛选出益母草中的化学成分及相关作用靶点,通过Uniprot数据库找出官方基因名称。利用疾病靶点相关数据库检索与心梗相关的靶点基因。将活性成分所对应的靶点基因和心梗相关的靶点基因交集,获得两者的共同基因即为益母草治疗心梗的关键靶点。使用Cytoscape软件构建中药-活性成分-关键靶点网络,根据度值进行筛选,寻找益母草治疗心梗的主要物质基础。将关键靶点导入String数据库获得蛋白互作关系,结果导入Cytoscape软件进行可视化。利用DAVID数据库及ClueGo插件对关键作用靶点进行GO注释分析和KEGG通路分析,探究益母草治疗心梗的生物过程及作用通路。
- 杨雨微聂锐单鑫陈静汪洁吕志阳
- 关键词：益母草心梗网络药理学
