浙江省自然科学基金(Y5100066)
- 作品数：10 被引量：25H指数：4
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- 卡拉胶寡糖与bFGF的结合活性及其对乙酰肝素酶活性的抑制作用被引量：3
- 2011年
- 为探讨卡拉胶寡糖作为硫酸肝素类似物的抗肿瘤和抗血管新生机制,以宫颈肿瘤细胞HeLa和人脐静脉内皮细胞HUVEC为研究对象,考察几种不同聚合范围的寡糖结合bFGF及抑制乙酰肝素酶活性的作用。发现卡拉胶寡糖对正常细胞和肿瘤细胞均表现出低毒特征。在低浓度下,具有结合bFGF并能抑制bFGF引起的细胞增殖能力,其中λ-卡拉胶寡糖(聚合度2～8)效果最明显,在质量浓度为20μg.mL-1时,可达30%的抑制率。几种寡糖对乙酰肝素酶活性有不同趋势的抑制作用,在HeLa细胞中,λ-卡拉胶寡糖的抑制活性最高;在HUVEC细胞中,聚合度在9～17的κ-卡拉胶寡糖活性最高。结果表明,卡拉胶寡糖的类硫酸肝素生物活性与其分子量大小、硫酸取代量有明显的关系,低分子量、高硫酸基取代是其高活性的关键。
- 陈海敏高洋严小军
- 关键词：硫酸肝素抑制剂BFGF乙酰肝素酶
- 琼胶寡糖诱导坛紫菜活性氧爆发被引量：5
- 2012年
- 研究了琼胶寡糖诱导坛紫菜氧爆发的响应及其活性氧产生的位点。用琼胶寡糖诱导坛紫菜,以微呼吸测量系统检测坛紫菜氧消耗的变化;以对羟基苯乙酸(POHPAA)化学发光法检测坛紫菜的H2O2释放量;利用DCFH-DA染色观察活性氧在细胞上的定位;并利用实时定量PCR检测坛紫菜NADPH氧化酶基因Phrboh的差异表达;通过2-AMAC标记琼胶寡糖,观察其在坛紫菜的结合部位。结果显示,100μg/mL琼胶寡糖处理坛紫菜,出现两次呼吸爆发,分别在4min和10min左右,强度分别是基础呼吸的4倍和14.1倍;5min内出现H2O2的积累,15min达到峰值,比对照组高出近10倍。10μmol/LDPI可部分抑制H2O2的产生。3min内Phrboh的表达已上调,并持续近10min。DCFH-DA染色显示,活性氧主要产生在膜系统上。荧光标记琼胶寡糖的定位发现,坛紫菜细胞膜上存在琼胶寡糖的结合位点。综上所述,琼胶寡糖能识别细胞膜上的结合位点,并诱导坛紫菜膜系统上的H2O2爆发,H2O2的产生与NADPH氧化酶相关。
- 朱竹君陈海敏骆其君杨锐严小军王秀娟何山
- 关键词：坛紫菜琼胶寡糖NADPH氧化酶
- 核磁共振技术在植物代谢研究中的应用被引量：4
- 2013年
- 基于核磁共振技术(Nuclear Magnetic Resonance,NMR)和模式识别技术的代谢组学研究是近几年发展起来的一种新的组学技术。该文简要综述核磁共振技术用于植物代谢研究的实验设计、图谱的获取、模式识别技术及其最新应用。
- 赵燕丁立建
- 关键词：核磁共振模式识别技术
- 离子对-反相高效液相色谱-三重四级杆质谱法测定λ-卡拉胶寡糖被引量：3
- 2013年
- 目的建立离子对-反相高效液相色谱(RPIP-HPLC)和电喷雾离子源-三重四级杆质谱(ESI-QqQ-MS)联用技术快速分离鉴定多阴离子λ-卡拉胶寡糖的方法。方法采用Hypersil GOLD C18色谱柱(100mm×2.1mm,3μm),流速0.2mL.min-1,柱温30℃,考察3种离子对试剂(庚胺、二丁胺、三丙胺)、不同离子对试剂浓度(3、5和8mmol/L)及流动相pH值(pH4.5、5.5、6.5)对λ-卡拉胶寡糖分离效果的影响。结果当流动相组成为5mmol.L-1庚胺乙酸盐水溶液(pH5.5)和5mmol.L-1庚胺乙酸盐甲醇溶液(pH 5.5)时,聚合度(DP)在2～15间的λ-卡拉胶寡糖分离效果较好,同时从相应的质谱数据中能准确获得各聚合度λ-卡拉胶寡糖的结构信息。结论该方法能较好地分离并鉴定多阴离子λ-卡拉胶寡糖,所得寡糖质谱信息对λ-卡拉胶寡糖的结构解析有借鉴作用。
- 上官巧灵陈海敏陈娟娟严小军
- 藻类基因组研究进展被引量：5
- 2013年
- 藻类具有复杂多样的进化历史和生物学特征,不仅在生态系统中扮演着重要角色,而且具有许多独特的基因和生物过程。高通量测序技术在藻类研究领域中的应用,大大促进了藻类基因组学和转录组学的发展,丰富了藻类基因信息。文章对近年来藻类基因组和转录组的研究进展进行综述,总结了已完成全基因组测序的不同藻类基因组的特点并进行比较,对表达序列标签(ESTs)、微阵列和转录组测序技术在藻类转录组研究中的应用做了简要阐述,主要介绍了藻类基因表达以及小RNA的研究进展,并对该领域可能的发展方向及存在的问题进行了展望。
- 赖晓娟陈海敏杨锐严小军
- 关键词：藻类基因组转录组高通量测序基因
- κ-卡拉胶对THP-1源性巨噬细胞免疫响应的影响
- 2012年
- 研究发现κ-卡拉胶（κ-CGN）能够诱导并促进动物肠道出现溃疡甚至癌变¨。但一些官方机构如FDA（FoodandDrugAdministration）、欧洲食品科学委员会（SCF）等却认为卡拉胶在正常摄人量范围内对人肠道影响很小。卡拉胶致炎机制也存在争议，可能作为异质颗粒被细胞吞噬，使溶酶体破裂后引起溃疡；也可能提高肠内硫化氢的含量。Tobacman等针对肠上皮细胞的研究认为，卡拉胶能够通过TLR4通路激活细胞的Bcl-10、NF—κB、IL-8等因子。本文选择经佛波酯（PMA）诱导分化的THP-1巨噬细胞为研究载体，观察κ-CGN对该细胞的免疫响应，从而研究它们调节免疫的能力及响应机制。
- 王峰毛海花陈海敏
- 关键词：THP-1巨噬细胞卡拉胶源性BCL-10肠上皮细胞
- λ-卡拉胶引发THP-1细胞免疫响应的结构因素及机制
- 2013年
- 目的:探讨λ-卡拉胶及其降解物引发THP-1单核/巨噬细胞免疫响应的结构因素及其反应机制。方法:THP-1细胞经PMA诱导分化为巨噬细胞;λ-卡拉胶及其不同分子质量的降解产物刺激THP-1细胞,采用ELISA技术检测TNF-α含量,确定引发免疫响应的λ-卡拉胶种类;采用CBA技术检测卡拉胶处理后各类免疫因子的表达;用WesternBlot检测由卡拉胶引起的免疫响应的信号通路。结果:分子质量10～40ku的卡拉胶降解产物(λ-10-40k)最易引起THP-1细胞的免疫响应,用10μg/mLλ-10-40k处理24h,可增加TNF-α的分泌量,为空白对照的2.2倍(P<0.01)。λ-10-40k可通过激活TLR4-NF-κB途径以及MAPK/ERK途径诱导THP-1细胞产生TNF-α,并通过协同效应,增加LPS刺激的TNF-α、IL-1β及IL-6的表达,放大LPS诱导的炎症反应。结论:分子质量范围10～40ku的卡拉胶降解产物易通过TLR4-NF-κB途径及MAPK/ERK途径引发THP-1单核/巨噬细胞免疫响应,并协同增加LPS刺激的炎症反应。
- 毛海花陈海敏王峰徐炜烽严小军
- 关键词：Λ-卡拉胶THP-1细胞TNF-ΑLPS
- Fascaplysin抑制ICR小鼠体内S180移植瘤的分子机制初探被引量：1
- 2012年
- 目的研究fascaplysin对ICR小鼠S180移植瘤生长的体内抑制作用,并初步探讨fascaplysin在体内抑瘤的分子机制。方法皮下注射技术建立荷S180骨肉瘤的ICR小鼠为实体瘤动物模型,然后将其分为4组:即空白对照组(注射生理盐水)、阳性对照组[CTX,30mg/(kg.d)]、fascaplysin高剂量组[20mg/(kg.d)]和fascaplysin低剂量组[5mg/(kg.d)],处理10天后,利用电镜分析各组小鼠移植瘤细胞的变化,应用免疫组化技术检测相应组织PCNA、CD31表达情况。结果电镜结果显示肿瘤组织细胞出现凋亡现象。PCNA结果发现,fascaplysin治疗组与空白对照组相比差异极显著(P<0.01),高、低剂量组之间差异显著(P<0.05),具有一定程度的剂量-效应依赖性。MVD结果:与空白对照组相比,fascaplysin各剂量组肿瘤组织内MVD均明显减少(P<0.01)。结论 Fascaplysin治疗能诱导肿瘤细胞凋亡,减少肿瘤组织PCNA的表达,降低肿瘤的增殖活性。减少肿瘤组织微血管的密度,抑制肿瘤血管的新生。提示fascaplysin在体内具有良好的抗肿瘤作用。
- 徐炜烽王峰陈海敏卢晓玲严小军
- 关键词：CD31
- 琼胶寡糖聚合度对坛紫菜抗性诱导的影响被引量：4
- 2012年
- 研究了琼胶寡糖聚合度对坛紫菜抗性诱导的效应。以琼胶3,6和12糖,3种聚合度的琼胶寡糖为材料,处理坛紫菜,通过观察叶片腐烂率比较坛紫菜生长状态;利用透射电镜观察处理后的细胞亚显微结构变化;并检测坛紫菜附生菌的数量变化;以对羟基苯乙酸(POHPAA)化学发光法检测坛紫菜H2O2释放量;利用实时定量PCR检测坛紫菜NADPH氧化酶基因(Phrboh)的差异表达。结果表明,经琼胶3糖和6糖处理,坛紫菜的Phboh表达出现上调,并产生H2O2暴发。经两种琼胶寡糖处理后,坛紫菜的附生菌数量明显减少,其中以琼胶6糖的效果最好,在较长培养时间内,坛紫菜能保护自身细胞亚显微结构的完整性,维持良好的生长状态。而琼胶12糖没发现任何诱导作用。综上所述,聚合度为3和6的琼胶寡糖能诱导坛紫菜的抗性响应,特别是形成单个螺旋结构的琼胶6糖的诱导作用最明显,但聚合度较大的琼胶寡糖则不能。
- 朱竹君骆其君严小军杨锐何山陈海敏
- 关键词：坛紫菜琼胶寡糖聚合度
- 坛紫菜菌解液对植物生长和抗性指标的影响被引量：1
- 2011年
- 利用琼胶降解菌处理坛紫菜粉末,降解其细胞壁多糖,释放内容物,并获得菌解液,研究不同稀释度坛紫菜菌解液对受体植物蚕豆出芽和生长,以及大豆和番茄幼苗抗性相关指标的影响.结果显示:(1)随琼胶降解菌处理时间的延长,菌解液中还原糖含量逐渐增高.(2)3.33%的菌解液对蚕豆种子萌芽促进效果最好,而2%的菌解液能增加蚕豆叶绿素含量,促进其幼苗生长.(3)3.33%的菌解液能有效提高大豆离体子叶的植保素含量,迅速增加番茄叶片表皮条的H2O2的释放量,提高苯丙氨酸解氨酶活性.研究表明,琼胶降解菌能使坛紫菜细胞壁中的营养物质释放,并产生某些激发物质,从而使坛紫菜菌解液能够促进受体植物的种子发芽和幼苗生长,并能有效诱导植物的抗性.
- 骆其君陈海敏严小军
- 关键词：坛紫菜种子萌芽植保素苯丙氨酸解氨酶
