国家科技基础条件平台建设计划(2005DKA21102)
- 作品数：15 被引量：24H指数：3
- 相关作者：杨福合邢秀梅吴琼荣敏王士勇更多>>
- 相关机构：中国农业科学院特产研究所吉林农业科技学院延边大学更多>>
- 发文基金：国家科技基础条件平台建设计划国家科技支撑计划吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 甘肃马鹿myogenin基因克隆、序列结构特征预测及其分子系统进化分析被引量：4
- 2013年
- 根据GenBank中公布的绵羊、水牛、猪、小鼠及人的肌细胞生成素基因(myogenin)DNA序列,设计了3对引物,采用PCR扩增和克隆技术,首次从甘肃马鹿血液基因组中获得了myogenin基因序列,并利用生物信息学方法对甘肃马鹿该基因核苷酸及其编码氨基酸序列的结构特征进行初步预测和分析,进一步基于该基因氨基酸序列构建了15个物种的分子系统进化树。结果表明,获得的甘肃马鹿myogenin基因序列大小为3168bp(GenBank登录号:FJ746497),包括3个外显子、2个内含子、部分5'UTR和3'UTR,其序列包括1个684bp的开放阅读框,编码227个氨基酸,myogenin蛋白理论分子质量为25.2493kDa,PI为5.68,不稳定系数是66.22,属于酸性不稳定蛋白质。进一步分析发现,该序列不含有信号肽和跨膜区域,含有11个广泛磷酸化位点,第1～136个氨基酸为甘肃马鹿myogenin基因bHLH保守结构功能域,二级结构以无规则卷曲和α-螺旋为主。序列相似性及分子系统进化分析显示,甘肃马鹿myogenin基因与反刍动物山羊、绵羊和水牛的亲缘关系最近。甘肃马鹿myogenin基因的克隆及序列结构特征的生物信息学预测为进一步探讨鹿科动物肌肉生长发育的分子调控机理奠定了理论基础。
- 宋兴超刘汇涛岳志刚杨颖邢秀梅杨福合
- 关键词：甘肃马鹿肌细胞生成素基因克隆系统进化树
- 中国环颈雉心脏型脂肪酸结合蛋白基因的cDNA克隆及序列分析
- 2012年
- 运用RT-PCR技术,克隆了中国环颈雉心脏型脂肪酸结合蛋白基因的序列,并对其进行了测序及生物信息学分析。结果表明:中国环颈雉H-FABP基因cDNA序列长为402bp,开放阅读框为399bp,编码132个氨基酸,推测的蛋白相对分子质量为14.64KD,等电点为6.30。中国环颈雉H-FABP基因与已报道的鸡、鸭、珍珠鸡等禽类动物的核苷酸和编码氨基酸序列具有很高的相似性。
- 吴琼杨福合邢秀梅荣敏
- 关键词：心脏型脂肪酸结合蛋白克隆
- 鹿卵母细胞体外成熟研究进展被引量：1
- 2013年
- 卵母细胞体外成熟培养作为现代胚胎生物工程的重要组成部分,是性别控制、体外受精、核移植和转基因等技术成功的前提和关键。本文就卵母细胞来源、培养液成分、培养时间、温度和气相环境等因素对鹿卵母细胞体外成熟的影响进行综述。
- 郑军军王士勇杨月春于淼杨福合邢秀梅
- 关键词：体外培养影响因素
- 水貂成骨细胞的原代培养及其鉴定
- 2009年
- 为探讨原代成年水貂成骨细胞的培养方法,建立细胞库。无菌条件下取7月龄成年水貂肋骨,剪碎,用胰酶、胶原酶消化后接种于培养皿内培养,获得原代细胞。通过细胞形态学观察及碱性磷酸酶染色、骨钙素免疫组化、钙结节染色进行鉴定。结果,所培养的细胞具有典型的成骨细胞形态特征,碱性磷酸酶染色、骨钙素染色、钙结节染色均呈阳性。证明培养出的细胞是成骨细胞。
- 荣敏许尚忠褚文辉王桂武吴琼邢秀梅杨福合
- 关键词：成骨细胞原代培养水貂
- 中国环颈雉脂蛋白酯酶基因cDNA序列测定及组织表达分析
- 运用RT-PCR方法从中国环颈雉的总RNA中克隆了脂蛋白酯酶(LPL)基因的cDNA部分序列,然后运用Real-time PCR法检测了LPL基因在中国环颈雉不同发育阶段、不同组织及不同品种间的表达情况。结果表明,中国环...
- 吴琼杨福合邢秀梅荣敏章秀婷
- 关键词：脂蛋白酯酶基因克隆
- 文献传递
- 梅花鹿-牛异种体细胞核移植操作方法的研究
- 本研究旨在对梅花鹿-牛异种体细胞核移植(Interspecies Somatic Cell Nuclear Transfer,ISCNT)的显微操作方法进行系统研究,从而优化其操作过程。以梅花鹿耳皮肤成纤维细胞为供核细胞...
- 王士勇郑军军杨月春刘宗岳于淼杨福合
- 关键词：异种体细胞核移植挤压法
- 文献传递
- 甘肃马鹿MyoG基因5′UTR单核苷酸多态性检测及其序列变异分析被引量：6
- 2010年
- 为了初步探索肌细胞生成素(MyoG)基因在鹿科动物上的遗传多态性,试验采集56头甘肃马鹿的血液样品,采用PCR-SSCP和克隆测序的方法对MyoG基因(GenBank登录号:FJ746497)5′UTR部分序列进行了单核苷酸多态性(SNPs)检测及序列变异分析。结果表明:①引物P1的PCR扩增片段存在多态性,经克隆测序分析,在5′UTR-237 bp处存在G→A的转换变异,该位点表现为AA、AB和BB 3种基因型,由A和B 2个等位基因控制;对基因型、等位基因频率及群体遗传多态性分析结果发现,AA基因型频率最高,A基因为优势等位基因,该位点多态信息含量(PIC=0.194)为低度多态(PIC<0.25);经TFSEARCH 1.3分析软件预测发现,该变异可能减少了1个Sp1转录因子。②引物2的PCR扩增片段检测到1个SNP多态位点(—46 bp,G→A),表现为CC、CD和DD 3种基因型,基因型频率分布为CC>CD>DD,该位点多态信息含量(PIC=0.266)为中度多态(0.25
- 宋兴超杨福合邢秀梅刘汇涛岳志刚
- 关键词：甘肃马鹿
- 利用冷冻切片法与石蜡切片法对水貂组织切片进行优化研究被引量：3
- 2011年
- 应用冷冻切片法和石蜡包埋切片法,对水貂体组织进行切片后HE染色观察;并在冷冻切片方法中应用3种不同的固定剂,对固定剂的固定效果进行对比分析。结果表明,石蜡切片法更适合于脑组织,而冰冻切片法更适合于皮肤组织。冰冻切片方法中3种固定剂的固定效果比较,固定剂A(无水乙醇80 mL、甲醛10%10 mL、冰醋酸10 mL)优于固定剂C(10%的福尔马林溶液)与固定剂B(甲醛40%15mL、无水乙醇85mL)。
- 梁东杨福合邢秀梅吴琼刘汇涛任二军
- 关键词：水貂固定剂大脑皮肤组织切片
- 亮甲酚蓝染色对牛卵母细胞体外成熟的影响
- 2014年
- 研究旨在观察亮甲酚蓝(brilliant cresyl blue,BCB)对牛卵母细胞的染色效果及体外成熟的影响,从而筛选出更高质量的卵母细胞用于胚胎工程研究。从本地屠宰场收集牛卵巢后采用抽吸法获取卵泡液,在体视显微镜下选择卵丘完整、胞质均匀的卵丘-卵母细胞复合体(COCs)随机分组,分别进行BCB染色时间和不同浓度BCB染色的试验。结果表明,染色90 min后卵母细胞着色率为68.1%,显著高于30、60 min组(P<0.05),辨识难度为"中";39μmol/L组着色率显著高于13μmol/L组(P<0.05),与26、52μmol/L组差异不显著(P>0.05),成熟数最高(62),成熟率显著高于52μmol/L组,与其它组差异不显著(P>0.05);BCB+组和BCB-组的成熟率与对照组比较差异均不显著(P>0.05)。结果提示,39μmol/L BCB染色90 min能有效筛选牛COCs用于IVM,但是并不能显著提高牛卵母细胞的成熟率。
- 王士勇杨月春郑军军刘宗岳于淼杨福合
- 关键词：卵母细胞体外成熟
- 中国环颈雉肌苷酸相关候选基因的克隆与序列分析
- 2010年
- 为了研究腺苷酸琥珀裂解酶(ADSL)基因和次黄嘌呤核苷酸环水解酶(ATIC)基因序列和功能,采用RT-PCR法对这2种酶进行了cDNA序列克隆和分析。结果表明:克隆的基因同源性与GenBank上已发表的禽类核苷酸和氨基酸序列相比较高,与哺乳动物相比同源性较低。
- 吴琼杨福合邢秀梅荣敏
- 关键词：肌苷酸候选基因克隆
