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国家杰出青年科学基金(NSFC30100171)
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张莉
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2006
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mfgl2凝血酶原酶反义载体的构建及其效应研究
2006年
目的:从基因转录水平抑制小鼠巨噬细胞系Raw264.7细胞表达m fgl2(mouse fibrinogen like prote in 2/m fgl2prothrom inase,以下简称m fgl2)和其效应研究。方法:构建m fgl2反义载体(m fgl2-antisense-pcDNA3.0)并转染Raw264.7细胞,在IFN-γ刺激下,分别用RT-PCR、免疫组化、蛋白质印迹分析和m fgl2蛋白功能学检测方法(Procoagu lant activity,PCA)检测m fgl2基因转录和蛋白表达水平及PCA的变化。结果:转染m fgl2-antisense-pcDNA3.0可显著抑制Raw264.7细胞m fgl2基因转录和蛋白表达并使其生物学活性显著下降,并且m fgl2表达水平与其PCA活性变化呈平行关系。结论:m fgl2-antisense-pcD-NA3.0可有效抑制Raw264.7细胞表达m fgl2,同时其PCA也显著下降,表明Raw264.7细胞PCA与其表达m fgl2有关,此结果为探讨从基因水平治疗与fgl2高表达相关的疾病如重型乙型肝炎、同种移植排斥反应时脏器局部的微血栓形成、纤维素沉积、微循环障碍等病理学损伤寻找新的干预靶点提供了科学依据和手段。
孙奕
朱传龙
张莉
严伟明
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龚非力
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