国家科技重大专项(2008ZX10002-023) 作品数:4 被引量:9 H指数:2 相关作者: 贾小飞 蒋帅 田文洪 胡键阳 吴小兵 更多>> 相关机构: 第四军医大学 中国疾病预防控制中心 复旦大学 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 国家自然科学基金 中国科学院知识创新工程重要方向项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
超级干扰素抑制A549增殖诱导其衰老 被引量:1 2011年 该研究利用MTT和结晶紫的方法证明sIFNα对肺癌细胞A549增殖有很强的抑制作用,而同样剂量的普通干扰素IFNα2b抑制作用要小很多。与对照组相比,sIFNα处理后,细胞形态发生改变,细胞体积变大,形态呈扁平状;Hoechst33258染色发现,细胞核形态无变化并且未检测到凋亡;SA-β-gal染色发现大多数细胞呈现阳性,同时,衰老相关蛋白p53和p21表达量明显上调。而IFNα2b处理组细胞形态基本没有变化,SA-β-gal染色也只有少部分的细胞呈现弱阳性。由此说明,sIFNα比IFNα2b能更好地抑制癌细胞增殖,其机制可能为诱导癌细胞发生衰老。 李慧玲 杨冬琴 曹欣 黄宏龄 丁苗 徐海能 刘新垣 李名扬关键词:干扰素 衰老 抗癌 肺癌 增殖 利用分泌型荧光素酶体外长期监测小鼠肝脏microRNA活性 被引量:4 2011年 活体动物microRNA(miRNA)检测技术对阐明miRNA的生物学功能非常重要.但是,目前缺乏一种方便灵敏的实时反映活体动物miRNA活性及其变化的体外监测手段.通过在分泌型荧光素酶Gluc(Gaussia princeps luciferase)mRNA的3′非翻译区插入相应miRNA的靶序列构建一系列miRNA传感器.将miRNA传感器体外转染培养细胞和通过水动力注射方法转染小鼠肝脏,通过检测细胞培养上清和外周血液中的Gluc来反映细胞内和活体动物肝脏的miRNA活性.结果显示,CMV启动子驱动的miRNA传感器可以长期监测体外培养细胞中的miRNA和短期监测小鼠肝脏的miRNA,但由于启动子在肝脏的沉默不能用于长期监测肝脏miRNA;CAG启动子驱动的传感器则成功地实现了对肝脏内源性miR-122,miR-142和miR-34a以及对肝脏过表达的miR-34a的长期实时监测.利用以Gluc为报告基因的miRNA传感器,通过检测外周血Gluc可以方便地在体外长期连续监测小鼠肝脏的miRNA. 王刚 董小岩 胡键阳 田文洪 尉迟捷 王岳 吴小兵肝原位移植瘤裸鼠模型的建立及活体荧光成像检测 被引量:4 2013年 目的建立能够通过活体荧光成像系统实时监测肿瘤进展的肝原位移植瘤裸鼠模型。方法重组质粒pcDNA3.1-Luc转染细胞构建稳定表达荧光素酶的PLC/PRF/5肝癌细胞株,将该细胞注入裸鼠肝脏实质内,应用活体成像技术动态监测肿瘤进展情况,解剖荧光信号阳性裸鼠观察肿瘤组织生长情况。免疫荧光检测肿瘤组织中HBsAg表达。结果对裸鼠肝原位移植瘤应用活体荧光系统成像,在肿瘤细胞注射部位检测到荧光信号,解剖动物后可在肝脏组织中观察到异质细胞团块。免疫荧光证实移植瘤中有HBsAg表达。结论肝脏原位移植瘤裸鼠模型建立成功,为抗肝癌药物的研发提供了工具。 贾小飞 闫博 张熠杰 蒋帅 赵晶 杨安钢关键词:荧光素酶 PRF HIV-1蛋白诱导T细胞产生IFN-γ反应特征及对HIV-1感染者病情进展的影响 2009年 目的探讨HIV—1特异性T细胞反应特征及对HIV-1感染者病情进展的影响。方法通过合成重叠肽技术及ELISPOT技术,采用队列研究方法对37名HIV-1感染者的病毒特异性T细胞免疫反应进行分析。结果83.78%(31/37)的HIV-1感染者对1个或多个合成肽反应(反应强度大于50SFU/10^6 PBMCs)HIV-1 B型病毒不同蛋白可激发HIV-1感染者的特异性T细胞反应,其中H1V-1 Gag蛋白被识别的频率最高,81%的HIV-1感染者识别HIV—1 Gag而且HIV-1 Gag蛋白诱导的T细胞反应强度最高,相对强度达到28.25%,明显高于其他蛋白,差异具有统计学意义(F=17.969,P〈0.001);重叠肽诱导T细胞分泌IFN-γ反应频率、反应强度在HIV—1感染无症状期和艾滋病期无明显区别,但是HIV-1Gag蛋白诱导的T细胞反应强度在无症状期明显高于艾滋病期。结论HIV-1 B型病毒不同基因编码蛋白激发T细胞分泌IFN-γ反应不同,其中HIV—1 Gag蛋白特异性T细胞在控制病情进展方面发挥了重要作用。 张永宏 赵艳 徐克沂 闫惠平 马丽娜 伦文挥 吴昊 董涛 陈新月关键词:人免疫缺陷病毒-1