黑龙江省自然科学基金(C201119)
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
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- 鸡TLR3胞外区基因克隆、表达及多克隆抗体的制备
- 为研究chTLR3在病毒感染过程中的作用,试验采用反转录PCR(RT-PCR)技术从雏鸡法氏囊组织中扩增chTLR3胞外区部分基因片段,大小为1317bp,将其克隆于表达载体pET-30a(+)中,经酶切鉴定后转化大肠杆...
- 王杲强
- 关键词：基因表达多克隆抗体
- 文献传递
- 鸡传染性腔上囊病病毒(IBDV)感染雏鸡免疫器官巨噬细胞的数量变化被引量：1
- 2017年
- 为明确传染性腔上囊病病毒(IBDV)感染雏鸡免疫器官巨噬细胞的数量变化,将50只14日龄SPF雏鸡随机分为感染组和对照组。感染组经点眼、滴鼻途径每只感染传染性腔上囊病病毒,6×10^(6.5)TCID_(50)。对照组经相同途径给予相同剂量PBS。于感染后第1、4、7、21天及35天快速采取胸腺、腔上囊及脾脏并制成冰冻切片,应用间接免疫荧光法检测免疫器官巨噬细胞的数量变化。结果显示,感染组雏鸡胸腺巨噬细胞数量在感染后第1-4天明显升高(P<0.01或P<0.05),腔上囊、脾脏巨噬细胞数量于感染后第1-7天明显高于对照组(P<0.01或P<0.05),随后降低,于第35天恢复正常(P>0.05)。结果表明,IBDV可导致雏鸡免疫器官内巨噬细胞数量先升高后降低,之后随着机体的自我调节逐渐恢复正常。
- 赵霞张瑞莉栾亚男罗海燕刘瑞葛铭
- 关键词：IBDV雏鸡免疫器官巨噬细胞
- 鸡TLR3胞外区基因克隆、表达及多克隆抗体的制备被引量：2
- 2013年
- 为了研究Toll样受体3(chTLR3)在病毒感染过程中的作用,试验采用RT-PCR技术从雏鸡法氏囊组织中扩增chTLR3胞外区部分基因片段(大小为1 317 bp),将其克隆于表达载体pET30a(+)中,经酶切鉴定后转化大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞,然后进行IPTG诱导表达;用纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔,获得抗血清;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫印迹(Western-blot)及体外瞬时转染方法进行检测。结果表明:该基因片段得到较高表达,融合蛋白的分子质量约为55.8 ku,主要以包涵体形式存在,试验制备的兔抗chTLR3抗血清效价在1∶32 768以上,具有良好的免疫反应特性。
- 王杲强葛铭于群李广兴张瑞莉
- 关键词：基因表达多克隆抗体
- IBDV感染SPF雏鸡法氏囊中TLR3表达的动态变化被引量：3
- 2016年
- 为了研究鸡Toll样受体3(ch TLR3)基因在传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染的雏鸡法氏囊内的表达情况,试验用IBDV感染14日龄SPF雏鸡,采用荧光定量PCR技术及间接免疫荧光技术检测法氏囊中TLR3基因及蛋白的表达情况。结果表明:感染组雏鸡法氏囊中TLR3 mRNA及蛋白表达均呈先升高后降低的趋势。说明TLR3参与雏鸡抵抗IBDV入侵的过程。
- 赵霞张瑞莉王海彬姜岩栾亚男葛铭
- 关键词：SPF雏鸡法氏囊
- 感染传染性法氏囊病病毒的DF-1细胞中chTLR3表达的动态变化被引量：3
- 2014年
- 为研究鸡Toll样受体3(chTLR3)基因在传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染DF-1细胞过程中的表达情况,用3种不同毒力的IBDV感染DF-1细胞,采用实时荧光定量PCR法以及间接免疫荧光法对细胞内chTLR3基因的表达情况进行了检测。结果显示,DF-1细胞感染IBDV标准株后,其chTLR3mRNA的表达量呈增长趋势,感染后第48小时mRNA表达量达到峰值(P<0.01),之后逐渐下降;DF-1细胞分别感染IBDV弱毒疫苗株与分离株后,其chTLR3mRNA表达量均出现先上升后下降的趋势,但其表达量低于标准株(P<0.01)。采用间接免疫荧光法检测的chTLR3蛋白的表达变化规律与其基因的表达变化规律相同。结果证实,chTLR3参与IBDV感染DF-1细胞的过程;IBDV的毒力可影响chTLR3的表达。
- 王成成王杲强葛铭于群潘龙张瑞莉
- 关键词：传染性法氏囊病病毒
