辽宁省教育厅高等学校科学研究项目(05L488)
- 作品数:4 被引量:3H指数:1
- 相关作者:佟海侠陆春伟张锦华王秋实王秀丽更多>>
- 相关机构:中国医科大学鞍山市中医院更多>>
- 发文基金:辽宁省教育厅高等学校科学研究项目国家自然科学基金卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- IFNγ联合TRAIL诱导神经母细胞瘤细胞凋亡的研究
- 2006年
- 目的探讨IFNγ(γ-干扰素)对TRAIL(肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体)诱导神经母细胞瘤细胞株SMS-KCNR(KCNR)细胞凋亡的影响及其发生机制。方法应用RT-PCR方法检测IFNγ作用前后KCNR细胞Caspase8的表达;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪(FCM)检测IFNγ、TRAIL、IFNγ+TRAIL及IFNγ+Caspase8抑制剂(zIETD-FMK)+TRAIL对KCNR细胞生长及凋亡的影响;应用比色法测定Caspase8相对活性。结果KCNR细胞不表达Caspase8,IFNγ作用48h后的KCNR细胞Caspase8表达明显增加;KCNR细胞对TRAIL不敏感,IFNγ诱导表达Caspase8的KCNR细胞对TRAIL敏感;IFNγ+TRAIL组Caspase8相对活性明显高于TRAIL组及抑制剂组;zI-ETD-FMK能阻断Caspase8的活化而抑制TRAIL对KCNR细胞的诱导凋亡作用。结论IFNγ通过诱导Caspase8表达而逆转KCNR细胞对TRAIL诱导凋亡的耐受。
- 杨艳敏佟海侠潘作东吴宝刚胡莹张锦华
- 关键词:神经母细胞瘤脱噬作用
- 5氮杂胞苷联合干扰素-γ上调神经母细胞瘤细胞Caspase 8表达的研究被引量:2
- 2011年
- 目的:应用去甲基药5氮杂胞苷(5AZA)和/或干扰素(IFNγ)诱导神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞Caspase 8的表达,并观察是否可以恢复NB细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的敏感性。方法:应用Western blot方法检测5AZA和/或IFNγ作用前后SY5Y细胞Caspase 8蛋白的表达;应用流式细胞术检测5AZA、IFNγ、TRAIL、5AZA和/或IFNγ+TRAIL、5AZA和/或IFNγ+Caspase 8抑制剂zIETD-FMK+TRAIL对NB细胞生长及凋亡的影响;应用比色法测定Caspase 8相对活性。结果:对TRAIL耐药的SY5Y细胞不表达Caspase 8,经5AZA和/或IFNγ处理后Caspase 8蛋白表达水平逐步增加;IFNγ与5AZA联合作用后其Caspase 8表达较单一用药明显增加。IFNγ和/或5AZA与TRAIL联用对SY5Y细胞有明显诱导凋亡作用。5AZA和/或IFNγ+TRAIL组的SY5Y细胞Caspase 8相对活性明显高于对照组、IFNγ组、5AZA组、TRAIL组及抑制剂组。结论:5AZA联合IFNγ可以明显上调NB细胞Caspase 8表达;表达Caspase 8的NB细胞对TRAIL的诱导凋亡作用敏感;TRAIL诱导NB细胞凋亡过程中伴随Caspase 8活性的增加。
- 佟海侠陆春伟王秋实王立维
- 关键词:神经母细胞瘤CASPASETRAIL干扰素-Γ
- IFN-γ增强细胞毒类药物对神经母细胞瘤的诱导凋亡作用被引量:1
- 2009年
- 目的探讨细胞毒类药物对神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y(SY5Y)细胞的作用及γ-干扰素(IFN-γ)对其抗瘤活性的影响。方法应用逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测IFN-γ作用前后半胱-天冬氨酸蛋白酶8(Caspase8)mRNA的表达;应用流式细胞仪检测细胞毒类药物[阿霉素、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)]及IFN-γ联合细胞毒类药物对SY5Y细胞的诱导凋亡作用;应用比色法测定Caspase8相对活性。结果SY5Y细胞不表达Caspase8,经IFN-γ作用后Caspase8mRNA表达明显增加。SY5Y细胞对阿霉素相对敏感,对TNF-α和TRAIL不敏感;经IFN-γ预处理后,表达Caspase8的SY5Y细胞对三种细胞毒类药物的诱导凋亡作用敏感并伴随Caspase8活性增高,此作用可被Caspase8抑制剂所阻断。结论IFN-γ通过上调Caspase8表达而增强细胞毒类药物对神经母细胞瘤细胞的诱导凋亡作用。
- 马瑀王秀丽佟海侠陆春伟张继红张锦华
- 关键词:神经母细胞瘤细胞毒类药物Γ-干扰素CASPASE8
- 应用Alamarblue法检测TRAIL对神经母细胞瘤细胞的细胞毒作用
- 2010年
- 目的:神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞对TRAIL的杀伤效应不敏感与其Caspase 8表达的缺失有关。本研究中我们用γ-干扰素(Interferonγ,IFNγ)诱导NB细胞株CHP212和SH-SY5Y(SY5Y)Caspase 8表达,观察表达Caspase 8的NB细胞是否对TRAIL的细胞毒作用敏感,从而探讨Alamar blue法用于测定细胞体外增殖及细胞毒实验的可行性。方法:应用Western-blot方法检测IFNγ作用前后NB细胞Caspase 8蛋白的表达;应用Alamar blue还原率测定IFNγ、TRAIL、IFNγ+TRAIL、Caspase 8抑制剂+TRAIL对NB细胞生长的影响。结果:对TRAIL敏感的CHP212细胞表达Caspase 8且经IFNγ处理后Caspase 8表达水平逐步增加;对TRAIL不敏感的SY5Y细胞不表达Caspase 8,IFNγ作用后其Caspase 8蛋白表达明显增加。CHP212细胞还原率随TRAIL浓度的增加和作用时间的延长而降低,各实验组与对照组比较有显著差别(P<0.05)。SY5Y对TRAIL耐药,而IFNγ+TRAIL组的SY5Y细胞还原率与单独用IFNγ或TRAIL组比较,显著降低(P<0.01)。结论:Alamar blue还原率测定结果表明CHP212细胞对TRAIL的细胞毒作用敏感,存在时间和剂量依赖性;经IFNγ诱导表达Caspase 8的SY5Y细胞对TRAIL的细胞毒作用亦敏感。本研究结果证实Alamar blue法是一种简便、敏感、安全的方法,可用于体外测定细胞增殖及化疗药的细胞毒作用。
- 金冬岩何蓉佟海侠
- 关键词:神经母细胞瘤TRAIL