山东省技术创新项目(201220916006) 作品数:6 被引量:36 H指数:3 相关作者: 沈志强 魏凤 郭广君 王金良 苗立中 更多>> 相关机构: 山东省滨州畜牧兽医研究院 吉林大学 更多>> 发文基金: 山东省技术创新项目 山东省自然科学基金 现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
猪伪狂犬病病毒 gE-/gI-/TK-多基因缺失活疫苗对猪的安全性与免疫效力研究 被引量:19 2014年 为了研制猪伪狂犬病病毒三基因缺失疫苗,本试验在前期工作的基础上,将TK基因缺失的质粒pBTK与gI-/gE-PRV SA738病毒基因组共转染BHK21细胞,通过蚀斑法进行筛选。用鉴定成功的重组病毒制备活疫苗,分别接种新生仔猪及妊娠母猪,观察仔猪、妊娠母猪产仔数及仔猪健康情况,并进行抗体中和试验和攻毒保护试验。同时与双基因缺失株gI-/gE-/PRV和PRV Bartha k61做对比,以生理盐水做对照。结果成功筛选到重组病毒,命名为gI-/gE-/TK-/PRV SA738,TCID50为5.75~6.125。重组病毒制备的活疫苗,对仔猪和妊娠母猪健康状况均无影响,安全性好,免疫保护率为100%(5/5),有效诱导了机体的保护性免疫应答。结果表明,gI-/gE-/TK-PRV SA738突变株适合作为疫苗毒株使用。 吕素芳 郭广君 魏凤 王文秀 董炳梅 毕研丽 苗立中 沈志强关键词:伪狂犬病病毒 安全性 免疫效力 伪狂犬病病毒gE/gI双基因缺失株的生物学特性 被引量:3 2014年 为了解gE和gI双基因缺失株伪狂犬病病毒gE-/gI-PRV SA738和野毒株PRV-SA的生物学特性,对该病毒进行了理化特性和体外增殖曲线的研究。结果显示:该缺失株对氯仿、酸、热及冻融次数敏感,从双基因缺失毒株与野毒株在BHK-21细胞上的增殖曲线来看,在病毒培养50h之前野毒株的毒价均高于缺失株,而在50h以后缺失株的毒价又高于野毒株,并且在36h时2株病毒的毒价均达到最高峰。 魏凤 郭广君 吕素芳 张文通 王金良 董炳梅 沈志强关键词:伪狂犬病病毒 GI 基因缺失 生物学特性 SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测猪伪狂犬病毒gE基因缺失病毒株方法的建立 被引量:11 2014年 为建立一种快速、特异、敏感的方法检测伪狂犬病毒(PRV)gE基因缺失病毒株,本研究根据PRV野毒SA株的gD和gE基因序列设计引物,建立了SYBR Green I实时定量PCR方法,并对反应条件进行优化,建立了检测PRV gE基因缺失病毒株的SYBR Green I实时定量PCR方法,其灵敏度比传统PCR方法的灵敏度高100倍,前者可达17.5拷贝/μL,后者为1.75×103拷贝/μL。该方法可以检测出PRV,但PCV2、PPV、CSFV、PRRSV均为阴性,具有良好的特异性和重复性。该方法可以用于病原学监测、流行病学调查及定量研究。 吕素芳 郭广君 李峰 魏凤 管宇 张文通 丁壮 沈志强关键词:伪狂犬病毒 实时定量聚合酶链反应 猪伪狂犬病毒分子生物学检测方法研究进展 被引量:3 2016年 通过综述猪伪狂犬病病毒分子生物学检测方法,主要包括核酸探针、常规PCR方法、套式PCR方法、多重PCR方法、荧光定量PCR方法、环介导等温扩增等6种方法,希望对猪狂犬病病毒病防控有一定的参考价值。 于新友 李天芝 高鹏 王金良关键词:分子生物学 新型鸭黄病毒病研究进展 2010年以来,在中国东南部众多省份相继爆发的鸭产蛋急剧下降疫病是由新型鸭黄病毒感染引起的。目前国内外专家学者对该病的流行病学、临床症状与病理剖检变化、病原学、快速诊断方法的建立等取得了阶段性的研究成果,本文就上述方面进... 吕素芳 郭广君 李峰 莫玲 沈志强关键词:鸭黄病毒 文献传递