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甲型H1Nl流行性感冒病毒血凝素HAl氨基端的表达及双抗体夹心ELISA法的建立被引量：1: 2011年; 甲型H1N1流行性感冒（简称流感）病毒是一种人类最常见的流感病毒之一，2009年引起流感大流行的病毒并非一种全新的流感病毒[1]，陆一涵等[2]推测可能是北美地区的H1N1病毒发生了一定程度的变异（包括重组和重排）所致。基因组测序发现，该病毒包含禽流感、猪流感和人流感3种流感病毒的基因片段[3-4]，其中血凝素（HA）蛋白来源于猪谱系，; 秦利胡健萍杨宇王林林王静; 关键词：流行性感冒病毒双抗体夹心ELISA法血凝素甲型 H1N1病毒流感大流行

裂谷热病毒荧光定量PCR检测方法的建立被引量：1: 2012年; 目的建立一种快速、敏感、特异的实时荧光定量PCR方法,用于裂谷热病毒的检测。方法通过序列对比在裂谷热病毒L基因保守区设计引物及Taqman探针,建立实时荧光定量PCR反应体系。结果经优化的荧光定量PCR方法有较好的灵敏度和特异性,对阳性对照质粒标准品的灵敏度可达37拷贝/μl,通过检测同为蚊媒传播的日本脑炎病毒、黄热病毒、登革病毒、基孔肯亚病毒无交叉反应。结论本方法的建立在国境口岸传染病的防控方面有较好的应用前景。; 杨志红李长田杨宇白琳魏莲王静; 关键词：荧光定量PCR 裂谷热

委内瑞拉马脑炎病毒重组抗原的制备纯化及其胶体金免疫层析检测方法的建立被引量：3: 2011年; 目的:表达委内瑞拉马脑炎病毒E2重组蛋白,并结合胶体金免疫层析技术建立一种简便检测委内瑞拉马脑炎病毒特异性抗体的方法。方法:利用已经构建的表达E2抗原的工程菌,用IPTG诱导,表达蛋白主要以包涵体的形式存在。通过一系列条件的变性、复性、透析,所制抗原用以包被硝酸纤维素膜,利用胶体金标记和免疫层析技术,建立委内瑞拉马脑炎病毒快速检测方法。对该方法的敏感性、特异性和稳定性作出评价。结果:重组工程菌可表达分子质量为40 kDa的目的蛋白,纯化后的蛋白质经SDS-PAGE显示纯度达95%以上。建立的检测方法可在20 min内完成检测。对症状相似及近缘的其他病毒进行检测,均无非特异反应。试纸条在37℃下保存2周,检测结果不变。该方法与R&D公司商品化的ELISA试剂盒灵敏度检测无明显差异;对92份阴性血清进行检测,两种检测方法的符合率为96.7%。结论:重组委内瑞拉马脑炎病毒蛋白产生的包涵体变性复性后生具有良好的重复性和稳定性,可作为委内瑞拉马脑炎病毒多种检测方法的抗原原料。胶体金免疫层析法具有快速、灵敏、特异、稳定的特点,适用于现场检测。; 王振东王林林杨宇杨永莉王静

胶体金免疫层析快速定量检测西尼罗病毒抗体方法的建立被引量：5: 2011年; 目的建立一种胶体金免疫层析快速定量检测西尼罗病毒抗体的方法。方法利用胶体金免疫层析技术,建立快速检测西尼罗病毒抗体的方法,评价其特异性和敏感性,进行定量检测并拟合标准曲线。结果该法可在15min内完成定性和定量检测,定量检测灵敏度为1:104/test,线性范围1:101/test～1:104/test、回收率86.5%～122.7%。结论建立的检测西尼罗病毒抗体的胶体金免疫层析方法,能快速、灵敏、特异、准确地对样本中的西尼罗病毒抗体进行定性、定量检测。; 杨宇谢士嘉王静秦成峰; 关键词：西尼罗病毒胶体金免疫层析

复合检测5种重要发热病原悬浮芯片筛查方法的建立被引量：1: 2011年; 目的建立同时检测甲型流感病毒、人禽流感病毒、鼠疫耶尔森菌、SARS冠状病毒、结核分枝杆菌5种发热病原抗体蛋白悬浮芯片方法。方法分别用各病原体的诊断抗原耦联不同编码的微球作为反应载体,采用间接反应模式,建立蛋白悬浮芯片方法检测引起发热体征的5种病原的特异性抗体,在同一反应体系中对人血清中的流感、禽流感、鼠疫、SARS、肺结核等特异性抗体进行复合检测。结果建立的蛋白悬浮芯片5种病原抗体快速筛查系统具有较高的特异性和敏感性,同时检测鼠抗流感NPIgG、兔抗禽流感H5N1IgG、兔抗鼠疫F1IgG、兔抗SARSNIgG、兔抗结核分枝杆菌IgG的检测灵敏度分别为968.80ng/ml、69.40ng/ml、6.30ng/ml、15.50ng/ml、1.60ng/ml。结论重要发热病原悬浮芯片快速筛查系统能快速、敏感、特异、同时检测人血清中的5种病原抗体,对口岸出入境人员是否携带病原的快速筛查具有广阔的应用前景。; 杨永莉王静杨宇孙肖红王旺; 关键词：悬浮芯片免疫学

初步建立胶体金免疫层析法快速检测东部马脑炎抗体被引量：2: 2011年; 东部马脑炎病毒（eastern equine encephalitis virus，EEEV，以下简称为东马病毒）是引起东部马脑脊髓炎的病原体。东马病毒主要是通过黑尾脉毛蚊（Culisetamelanura）和环跗库蚊（Culextarsalis）传播，而且可以经含有病毒的气溶胶通过呼吸道感染人类，感染后发病率高，传染性强，致死率高，缺乏有效的预防方法，病愈后多留有后遗症，所以被国际社会列为防制生物恐怖的主要病种之一，备受世界各国关注。; 王林林杨宇王振东胡健萍王静; 关键词：胶体金免疫层析法 ENCEPHALITIS 抗体脑脊髓炎

西方马脑炎病毒抗体快速检测试纸条的研制被引量：1: 2011年; 目的研制一种快速检测西方马脑炎病毒(WEEV)抗体的试纸条。方法利用胶体金标记和免疫层析技术,用25 nm胶体金标记葡萄球菌A蛋白,并用硝酸纤维膜包被WEEV抗原及羊抗兔IgG作为检测带和质控带,研制出WEEV抗体快速检测试纸条。对该试纸条的敏感性、特异性和稳定性做出评价,并拟合检测曲线进行半定量检测。在健康人血清、兔血清和鼠血清中添加WEEV抗体模拟污染样品,评价该方法的检测能力。结果该试纸条可在20 min内完成定性和半定量检测,灵敏度为120 ng/ml,模拟样品的检测灵敏度也相同。线性范围120～1200 ng/ml。对发病症状相似以及近缘的其他病毒进行检测,均无非特异反应。试纸条在37℃下保存1个月,检测结果不变。结论该试纸条具有快速、简便、灵敏、特异、稳定的特点,适用于现场检测。; 王林林杨宇王旺王振东王静; 关键词：免疫层析技术

4种病原抗体液相芯片同步检测方法建立被引量：1: 2012年; 全球经济化的发展、贸易的开通,交通的便捷,无不为各国旅行、探亲、交易打开了方便之门,人口流动速度加快,与此同时传染病的传播也随之蔓延[1]。为保障居民生命健康安全,进行国境口岸传染病病原抗体的快速筛查,为传染病的传入与传出建立一道屏障有重要意义[2]。; 杨永莉王静杨宇王旺; 关键词：登革病毒禽流感病毒西尼罗病毒液相芯片抗体同步检测

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国家质检总局科技计划项目(2010IK211)