四川省科技支撑计划(2008SZ0013)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 相关作者：章俊王宗奎李长清林方昭肖小璞更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：四川省科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 蝮蛇毒蛋白C激活物的纯化与活性分析被引量：1
- 2011年
- 目的探索从国产蝮蛇毒中分离纯化人血浆蛋白C激活物(PCA)的方法及其用于蛋白C的鉴定。方法以国产蝮蛇毒为原料,通过溶解、离心、透析,利用Q Sepharose Fast Flow离子交换层析和Superdex G75凝胶过滤法分离纯化PCA组份。通过SDS-PAGE观察PCA组份的分子量,用发色底物法和凝固法分别测定活化PC(APC)的酰胺酶活性和抗凝活性。结果经两步层析,从蝮蛇粗蛇毒中纯化出PCA组份,SDS-PAGE图谱显示在分子量51 kD左右呈现1条蛋白带;经生物学活性鉴定:该组份在体外能迅速将PC激活为APC,APC的酰胺酶活性(A405)最高约为Protac(唯一商品化的PC激活剂产品)作用的2.8倍,抗凝活性(秒值)最高约为Protac作用的1.4倍,比活性2.20 IU/mg;不同浓度组份激活PC的酰胺酶活性和抗凝活性均随组份浓度的增大而升高,有明显的量效关系。结论采用离子交换层析和凝胶过滤法,可以从国产蝮蛇粗蛇毒中分离纯化出PCA组份,该组份具有较强的激活PC的能力,其生物活性与浓度呈正相关。
- 章俊肖小璞李长清王宗奎林方昭
- 关键词：蝮蛇毒纯化活性
