国家自然科学基金(30571689)
- 作品数：4 被引量：15H指数：2
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- 相关机构：复旦大学上海医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”上海市科学技术委员会资助项目更多>>
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- CD4^+ CD25^- T细胞凋亡机制的研究被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨CD4+CD25-T细胞AICD发生的机制。方法:磁性细胞分离器(MACS)分离CD4+CD25-T细胞。以CD3/CD28单克隆抗体活化BALB/c小鼠CD4+CD25-T细胞或以OVA323-339肽、抗原递呈细胞活化DO11.10小鼠CD4+CD25-T细胞两种方式建立AICD模型。基因芯片检测CD4+CD25-T细胞和CD4+CD25+T细胞凋亡相关基因的表达。流式细胞仪检测细胞的凋亡率。并观察FasL中和抗体、TRAIL中和抗体及zVAD-fmk对CD4+CD25-T细胞凋亡的影响。结果:MACS成功分离CD4+CD25-T细胞,纯度可达98%。建立了CD3/CD28抗体以及OVA特异性抗原活化的CD4+CD25-T细胞AICD模型,CD4+CD25-T细胞凋亡率达35%~40%。基因芯片分析发现CD4+CD25-T细胞相对高表达TRAIL、FAS,而CD4+CD25-T细胞相对高表达DR5、FasL。FasL、TRAIL中和抗体及zVAD-fmk可明显抑制CD4+CD25+T细胞的凋亡。结论:FasL、TRAIL及其它凋亡相关分子可能参与了CD4+CD25-T细胞的凋亡。
- 任学芳蒋正刚徐林叶菲熊思东王缨
- 关键词：AICDFASLTRAIL
- CD4^+CD25^+调节性T细胞AICD机制的研究被引量：8
- 2006年
- 目的探讨CD4+CD25+调节性T细胞活化诱导的细胞死亡(AICD)发生的机制。方法CD4+CD25+T细胞以磁性细胞分离器(MACS)从BALB／c小鼠或DO11．10小鼠的静息T细胞分离纯化。体外细胞增殖抑制实验证实其免疫调节作用。CD4+CD25+T细胞的AICD以CD3／CD28单克隆抗体活化或以特异性OVA323-339瑚肽、抗原提呈细胞活化等两种方法获得。CD4+CD25+T细胞凋亡相关基因的表达通过实时定量PCR检测。流式细胞仪检测细胞的凋亡率。进一步观察FasL中和抗体、TRAIL中和抗体及caspase抑制剂zVAD-fmk对CD4+CD25+T细胞凋亡的影响。结果MACS成功分离CD4+CD25+T细胞,纯度可达98％,该细胞可特异性表达Foxp3基因,能明显抑制效应性T细胞的体外增殖。CD3／CD28抗体以及OVA特异性抗原活化8 d的CD4+CD25+调节性T细胞AICD达39％-45％。活化前后的CD4+CD25+调节性T细胞死亡受体家族表达发生明显变化;FasL、TRAIL中和抗体及zVAD-fmk可明显抑制CD4+CD25+调节性T细胞的凋亡。结论FasL/Fas及其他凋亡相关分子可能参与了CD4+CD25+调节性T细胞的凋亡。
- 任学芳徐林叶菲蒋正刚熊思东王缨
- 关键词：CD4^+CD25^+调节性T细胞AICDFASLFAS
- CD4^+ CD25^+调节性T细胞对树突状细胞的杀伤作用被引量：2
- 2006年
- 目的探讨CD4^+ CD25^+调节性T细胞是否对树突状细胞发挥免疫调节作用及其可能的机制。方法用MACS(magnetic cell sorting)从BALB/c小鼠静息T细胞分离纯化CD4^+ CD25^+ T细胞,体外细胞增殖实验观察其对CD4^+ CD25^- T细胞的免疫抑制作用；GM-CSF/IL-4培养自体小鼠骨髓来源DC,FACS(fluorescence-activated cell sorting)鉴定其表面分子特性；以CD3/CD28单克隆抗体活化CD4^+ CD25^+调节性T细胞,FACS体外杀伤实验研究其对自体DC的调节作用,并观察穿孔素抑制剂EGTA对上述作用的影响。结果用MACS法成功分离出CD4^+ CD25^+ T细胞,纯度可达98％,特异性表达Foxp3基因,能明显抑制CD4^+ CD25^- T细胞的体外增殖；骨髓来源的DC表达CD11c、MHCⅡ及少量协同刺激分子CD80、CD86；FACS体外杀伤实验证实以CD3/CD28抗体体外活化的CD4^+ CD25^+调节性T细胞对自体DC有显著杀伤作用(P＜0．05),穿孔素抑制剂EGTA能部分抑制该杀伤效应(P＜0．05)。结论CD4^+ CD25^+调节性T细胞可通过杀伤作用对自体DC发挥免疫调节作用,穿孔素/颗粒酶杀伤途径可能参与其中。
- 任学芳熊思东王缨
- 关键词：树突状细胞杀伤EGTA
- 凋亡相关分子的表达上调在免疫性肝损伤中的作用探讨被引量：3
- 2007年
- 检测刀豆蛋白A(concanavalin A,ConA)诱导的小鼠急性肝损伤模型中凋亡相关分子的表达,并探讨其意义。以小鼠尾静脉注射15 mg/kg ConA建立急性肝损伤模型;AnnexinⅤ染色检测肝细胞的凋亡率;流式细胞术检测不同时间点肝细胞表面凋亡受体Fas、DR5的表达,以及肝浸润淋巴细胞表面凋亡配体FasL、TRAIL的表达。结果显示,与正常小鼠肝细胞凋亡率3.36%±0.69%相比,ConA诱导小鼠急性肝损伤后肝细胞的凋亡率显著上升,12 h为13.52%±0.68%,24 h达20.92%±0.66%。同时,肝细胞表面Fas、DR5的表达明显上升,肝浸润淋巴细胞表面FasL、TRAIL亦呈显著上调表达。结果表明,在ConA诱导的急性肝损伤发生发展过程中,肝细胞表面凋亡相关分子Fas、DR5与肝浸润淋巴细胞表面凋亡配体FasL、TRAIL的表达上调以及相互作用是导致肝损伤的重要因素。
- 叶菲阎淑储以微任学芳熊思东王缨
- 关键词：FASLDR5肝细胞凋亡
