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抗P185工程抗体的精细纯化: 人类的原癌基因Her-2编码一个185kDa的跨膜受体酪氨酸激酶,也称为p185,是肿瘤相关蛋白, 在多种癌细胞,例如乳腺癌中有高表达。本实验室用SEM法构建了抗HER-2／p185的单链抗体A18 和A21,经测定其具...; 乔婧娟眭贤明刘兢; 文献传递

SARS冠状病毒S蛋白结构预测及表达初探被引量：1: 2005年; 利用生物信息学的工具和方法,对SARS病毒基因组中预测的S蛋白(spikeprotein)的编码序列进行了分析,预测了其结构特征和可能的功能域。选择其中最有可能参与受体识别及产生主要免疫原性的区域(S401～659)作为待表达区域。将通过PCR获得的此段S蛋白片段的编码序列克隆至大肠杆菌载体pET28a(+)和酵母表达载体pPIC9K中,分别构建了pET28a(+)S和pPIC9KS表达质粒,转化至大肠杆菌菌株BL21(DE3)star和毕赤酵母中表达。产物的蛋白电泳和蛋白印记结果表明,S蛋白片段获得成功表达。采用镍离子螯合层析法纯化变性的包涵体样品,纯度达90%以上。; 孙美玲朴锦华尹长城杨公社黄华樑; 关键词：SARS 冠状病毒 S蛋白

抗HER-2工程抗体chA21对人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤血管生成的影响: 2009年; 目的探讨抗HER-2工程抗体chA21对过表达HER-2的人卵巢癌细胞株SKOV3裸小鼠移植瘤血管生成的影响。方法建立人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤模型,随机分成阴性对照组和chA21组,连续5周尾静脉注射给药,观察肿瘤生长变化;5周后处死裸鼠取下瘤体,利用组织芯片及免疫组化方法结合显微图像分析系统定量检测VEGF、DLL4表达情况,并用CD31免疫组化染色比较两组微血管密度(MVD)值。结果chA21组肿瘤组织中VEGF、DLL4的表达及MVD值均显著低于阴性对照组(P<0.05)。结论抗HER-2工程抗体chA21能显著抑制人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤的血管生成。; 张安莉吴强杨枫沈国栋刘兢; 关键词：HER-2 CHA21 SKOV3 血管生成

抗HER-2工程抗体chA21和Herceptin对人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤的抑制作用被引量：4: 2006年; 目的研究抗HER-2工程抗体Herceptin及chA21对高表达HER-2的人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤的生长抑制作用及其机制。方法建立人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤模型,随机分组,Herceptin和chA21均按30 mg/kg体重每周两次静脉注射,连续6周给药,观察肿瘤生长变化,计算抑瘤率;利用组织芯片及免疫组化方法结合显微图像分析系统定量检测肿瘤细胞Ki-67和NFκB的表达。结果Herceptin(30 mg/kg)和chA21(30 mg/kg)能显著抑制SKOV3移植瘤的生长,抑瘤率分别为51.12%和30.53%。Herceptin组和chA21组肿瘤组织Ki-67和NFκB的表达显著低于对照组(P<0.01),而两组之间比较统计学无显著性差异(P>0.05)。结论chA21和Herceptin均能抑制高表达HER-2的SKOV3移植瘤的生长。通过抑制NFκB的表达而影响肿瘤细胞的增殖是其可能的共同分子机制之一。; 凌晓光吴强薛花杨枫程联胜刘兢; 关键词：工程抗体 HER-2 CHA21 HERCEPTIN SKOV3 移植瘤

富含二硫键的膜蛋白p185胞外区在大肠杆菌中的可溶性表达和性质鉴定被引量：7: 2005年; Her2/c_erbB_2基因(其产物为膜蛋白p185)是表皮生长因子受体(EGFR)基因家族的一员,在约30%的乳腺癌中发现了其过量表达。为了鉴定抗p185单克隆抗体的抗原表位并进一步研究它们的相互作用,采用PCR的方法从含Her2/c_erbB_2基因的pBabe/erbB_2质粒中扩增了p185胞外区的富含二硫键的第一、二结构域和第四个结构域。产物克隆到pGEX/4T_1载体后,转化大肠杆菌OrigamiB(DE3)pLysS菌株,用低浓度IPTG进行低温过夜诱导后将菌体压力破碎,SDS_PAGE检测表达上清,得到了可溶性表达的融合有GST的目的蛋白。经ELISA、Westernblot等方法鉴定,可溶性表达产物具有完全的抗体结合活性,且当用凝血酶把GST切掉后该活性仍然保留。p185胞外区融合蛋白的成功表达将为二硫键富含类蛋白的表达提供参考;并为将来具有肿瘤细胞生长抑制活性的抗p185单克隆抗体的抗原表位鉴定,以及为EGFR家族受体的结构和功能关系的研究打下基础。; 李良维刘海波胡思怡梁顿程联胜刘兢; 关键词：融合蛋白谷胱甘肽S转移酶

抗HER-2嵌合抗体chA21对卵巢癌细胞MMP-2和TIMP-2表达的影响被引量：4: 2007年; 目的观察抗HER-2嵌合抗体chA21对卵巢癌细胞MMP-2和TIMP-2表达的影响。方法采用免疫细胞化学法检测不同质量浓度chA21(6 mg/L和12mg/L组)作用36 h后,培养的高表达HER-2人卵巢癌细胞株SKOV3中MMP-2和TIMP-2表达的变化;建立SKOV3裸小鼠移植瘤模型,制作组织芯片,观察chA21(30 mg/kg)对肿瘤组织MMP-2和TIMP-2表达的作用。结果细胞实验显示,随着chA21浓度的升高,MMP-2明显降低(P<0.01,r=-0.945),而TIMP-2显著升高(P<0.01,r=0.926),MMP-2/TIMP-2比值也明显降低(P<0.01,r=-0.945),且均呈浓度依赖性改变;裸鼠荷瘤实验结果显示,chA21能明显下调MMP-2的表达(P<0.01),上调TIMP-2的表达(P<0.01),并使MMP-2/TIMP-2明显降低(P<0.01)。结论chA21能调节高表达HER-2人卵巢癌细胞SKOV3的MMP-2和TIMP-2表达水平。; 高毅吴强凌晓光程联胜刘兢; 关键词：嵌合抗体 CHA21 HER-2 MMP-2 TIMP-2

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国家高技术研究发展计划(2001AA215381)