国家自然科学基金(20471025)
- 作品数：12 被引量：25H指数：4
- 相关作者：李连之田素燕李海丽冀海伟赵超更多>>
- 相关机构：聊城大学南华大学中国人民大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学理学更多>>
- Study on Unfolding Process of Neurogiobin mutant K95L in Urea and Guanidine Hydrochloride
- The unfolding of neuroglobin mutant K95L induced by urea and guanidine hydrochloride (GdnHCl) with or without ...
- 李海丽薛泽春李连之
- 关键词：NEUROGLOBINUNFOLDINGUREA
- 文献传递
- 神经红蛋白的表达、分离纯化和谱学表征被引量：4
- 2005年
- 报道了神经红蛋白(NGB)的基因表达、分离纯化和谱学表征.将载有NGB基因的pET3a质粒转入E.ColiBL21(DE3)plys细菌,于TB培养基中进行表达,其表达量占菌体总蛋白的10%左右.依次经硫酸铵分级沉淀,DEAE-Sepharose阴离子交换柱,Hiload16/60Superdex75凝胶过滤柱和Hiprep16/10QFF阴离子交换柱纯化,得到了电泳纯的血红色可溶性蛋白.电喷雾质谱测得其分子量为16930.0Da.紫外-可见吸收光谱表明,还原态的NGB在425nm有一强吸收峰,在531和559nm处有弱吸收峰,它们可分别归属为金属卟啉的γ,β和α吸收带,氧化态的NGB在413nm处有强吸收,则对应于金属卟啉的γ吸收带,是电子在卟啉环中非定域化π电子的轨道跃迁(π→π?)的结果.荧光激发谱最大波长为281nm,发射谱最大波长为338nm.圆二色谱表明其二级结构为典型的α螺旋结构,在410nm处有一血红素正峰.酸稳定性研究表明,pH>4时蛋白稳定.
- 李连之冀海伟赵超许涛刘国富付崇罗闫华超
- 关键词：谱学表征分离纯化紫外-可见吸收光谱荧光激发谱GB基因凝胶过滤
- 多肽基金属离子传感器被引量：3
- 2021年
- 多肽基金属离子传感器作为一种基于多肽序列而设计的新型传感器,越来越受到研究者的关注。多肽作为一类重要的生物小分子,具有合成方法成熟、简便、成本低,且能够以多齿配位状态与金属离子结合等优点。多肽基传感器对金属离子具有高灵敏性和高选择性,且可以通过调节多肽序列进一步优化。与其他类型传感器相比,多肽基金属离子传感器具有良好的水溶性、生物相容性以及低毒性,因而在环境检测和生物医学分析与诊断,尤其是金属离子成像等方面,有重要的应用前景。本文主要综述了近年来不同类型的多肽基金属离子传感器,包括基于紫外-可见吸收光谱法、荧光光谱法和电化学分析法等的研究进展,以及它们在一些领域中的应用,特别是针对具有高生物学毒性的重金属离子(如Hg^(2+)、Cd^(2+)),以及在生物体内发挥重要功能的金属离子(如Cu^(2+)、Zn^(2+))等的检测与生物成像等。最后,文章总结了多肽基金属离子传感器的优缺点,并展望了其未来发展方向和应用前景。
- 于帅兵王召璐庞绪良王蕾李连之林英武
- 关键词：多肽传感器金属离子荧光光谱电化学
- Studies on the stability of Cytoglobin
- Cytoglobin(CYGB) is a recently discovered hemeprotein belonging to the globin superfamily together with hemogl...
- 田素燕李连之
- 关键词：CYTOGLOBINSTABILITY
- 文献传递
- 圆二色光谱法研究环境因素对细胞红蛋白二级结构的影响被引量：5
- 2009年
- 采用远紫外圆二色光谱法系统地研究了细胞红蛋白(cytoglobin,Cygb)的浓度、环境温度、溶液的pH值和溶剂性质对细胞红蛋白二级结构的影响。结果表明:当Cygb浓度<1μmol/L时,它主要以α-螺旋形式存在,其α-螺旋含量>60%;当Cygb浓度从0.3μmol/L增大到2.0μmol/L时,其α-螺旋含量迅速降低;当Cygb浓度>2.0μmol/L时,其α-螺旋含量随浓度的增大变化很小(约30%)。随着温度的升高,Cygb的α-螺旋含量逐渐减小,但既使温度达到368K,它仍保持有20%的α-螺旋结构,说明该蛋白具有较高的热稳定性。在弱酸性和弱碱性溶液中,Cygb的二级结构都会有不同程度的破坏。在甲醇和乙醇中,Cygb的α-螺旋含量明显增加,这说明醇类可以诱导其α-螺旋的生成。
- 田素燕李连之高磊穆建帅刘晓燕谭相石
- 关键词：圆二色光谱Α-螺旋
- 神经红蛋白突变体(F28Y,F106Y)的构建、表达与表征被引量：5
- 2006年
- 构建了神经红蛋白F28Y,F106Y的两种突变体,并进行了表达、纯化和谱学表征.电喷雾质谱表明突变体蛋白的分子量与理论值一致.氧化型和还原型F28Y及F106Y的紫外-可见吸收光谱与野生型相似,仅氧化型F28Y的Soret带有2 nm的蓝移,说明这两种突变体蛋白仍保持六配位形式.F28Y的荧光最大发射峰明显红移(340 nm→347 nm),表明其荧光基团更加暴露于极性环境中.圆二色光谱表明,突变体蛋白的α-螺旋含量降低且F28Y产生了β-折叠,这是由于F28相对于F106则位于疏水腔外部且更加接近于溶剂表面所致.热稳定性顺序为NGB>F28Y>F106Y,F106Y最不稳定,是因为其与血红素间存在着较强的疏水作用,突变使F106与血红素间的作用力减弱,从而导致血红素在热变性条件下更容易从蛋白中解离出来.
- 赵超李连之冀海伟王莉许涛刘金凤
- 关键词：突变体稳定性
- 神经红蛋白突变体H64V与叠氮离子的作用
- 2018年
- 将64位组氨酸(His64)突变为缬氨酸(Val),构建了神经红蛋白(Ngb)突变体H64V基因并进行了蛋白的表达纯化,突变使Ngb的血红素Fe由六配位结构变成五配位结构.利用光谱法研究了突变体H64V与叠氮离子(N_3^-)的相互作用.紫外-可见吸收光谱表明,H64V与N_3^-键合后其Soret带吸收峰由406 nm红移至418 nm;荧光光谱表明N_3^-可使H64V的荧光发生静态猝灭.计算得到了H64V与N_3^-键合的平衡解离常数和热力学参数.另外,还研究了不同阴离子对H64V与N_3^-结合的影响,发现阴离子的存在减弱了N_3^-与H64V之间的结合力.
- 高朝辉李海丽王蕾邱章磊穆建帅李连之
- 关键词：光谱法
- 重组人神经红蛋白的圆二色光谱研究
- ＜正＞神经红蛋白（Neuroglobin,NGB）是一种新颖的脊椎动物珠蛋白类型,它主要在脑和其他神经组织中表达,在视网膜中具有较高的浓度。虽然它的氨基酸序列与血红蛋白 （Hb）和肌红蛋白（Mb）的同源性很低（20-25...
- 李连之赵超
- 文献传递
- 重组人神经红蛋白的圆二色光谱研究被引量：4
- 2006年
- 神经红蛋白(neuroglobin,NGB)是近期在人和其他脊椎动物脑中发现的一种新颖的血红素蛋白.利用远紫外圆二色(CD)光谱的方法,研究了NGB的浓度、溶剂性质、溶液pH值以及温度对NGB二级结构的影响.结果表明,NGB浓度小于10μmol/L时,它主要以α-螺旋形式存在,浓度大于10μmol/L时,随着浓度的增大其α-螺旋含量逐渐减少,当浓度达到40μmol/L后基本不再变化,可能是由于NGB在浓度较高时其分子间可以形成二硫键以及蛋白分子间可相互聚集所造成的.NGB在醇中的α-螺旋含量比在水中稍有增加,也表明NGB对醇类溶剂具有较高的稳定性.在酸性或碱性溶液中,NGB的二级结构都有不同程度的破坏.随着温度的逐渐升高,NGB的α-螺旋含量逐渐减少,但温度高达110℃时仍有16.8%的α-螺旋存在,说明NGB具有高热稳定性.
- 赵超李连之王莉冀海伟
- 关键词：圆二色光谱稳定性
- 光谱法研究人胞红蛋白与铜(Ⅱ)离子的相互作用（英文）被引量：2
- 2017年
- 胞红蛋白(Cygb)是近期在脊椎动物中发现的一种球蛋白家族成员,具有典型珠蛋白的"3+3"式的α-螺旋三明治折叠结构。利用紫外可见吸收光谱、荧光光谱、同步荧光光谱及圆二色(CD)光谱法研究了Cu^(2+)离子与Cygb的相互作用。结果表明,当Cu^(2+)离子加入到Cygb溶液中后,Cygb在280nm处的紫外吸收强度增大,说明Cu^(2+)与Cygb发生了相互作用;Cu^(2+)使Cygb的内源性荧光发生猝灭,其猝灭方式为静态猝灭。同步荧光光谱研究表明,Cu^(2+)可使色氨酸和酪氨酸的微环境发生较小的改变,与酪氨酸相比Cu^(2+)对Cygb的键合部位更接近于色氨酸。圆二色光谱研究表明,Cu^(2+)对Cygb的二级结构未引起明显变化。
- 李景红边琳田素燕孔金明李连之
- 关键词：胞红蛋白荧光猝灭
