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蝮蛇毒抗凝蛋白组分对人结肠癌细胞株SW480凋亡的实验研究被引量：2: 2009年; 目的探讨蝮蛇毒抗凝蛋白组分诱导人结肠癌细胞株SW480凋亡及其可能的作用机制。方法CCK-8比色法测定蝮蛇毒抗凝蛋白组分对体外培养的SW480细胞的细胞毒作用，流式细胞术（flow cytometry，FCM）检测细胞线粒体膜电位（mhochonal membrane potential，MMP）变化和细胞周期分析，Western blot检测凋亡相关蛋白半胱-天冬氨酸蛋白酶3（cysteine containing aspartate，capase-3）、bcl-2的表达。结果蝮蛇毒抗凝蛋白组分对SW480细胞具有明显的生长抑制作用，显微镜下观察到细胞圆缩，悬浮细胞增多，细胞分裂相减少，培养液内细胞碎片明显增多，流式细胞仪直方图上亦出现特征性的亚二倍体峰，随着蝮蛇毒抗凝蛋白组分浓度的增加，线粒体膜电位逐渐下降，凋亡率逐渐增加，capase-3蛋白表达增加，bcl-2蛋白表达无变化。结论皖南尖吻蝮蛇毒抗凝蛋白组分可诱导SW480细胞发生凋亡，通过线位体／半胱天冬氨酸蛋白酶3途径可能是SW480细胞发生凋亡的机制之一。; 汪德明芮景; 关键词：尖吻蝮蛇毒抗凝 SW480细胞凋亡

尖吻蝮蛇毒提取物ACPC1、ACPC2对人肝癌细胞抑制作用的研究: 2011年; 目的探讨从中国皖南尖吻蝮蛇(agkistrodon acutus)蛇毒中提取的ACPC1,ACPC2对人肝癌BEL-7404细胞株的抑制作用。方法通过DEAE-sepharose fast flow阴离子交换层析、SP-sepharose fast flow阳离子交换层析、Sephadex G-75凝胶过滤层析及Butyl-S Sepharose 6 FF疏水柱从皖南尖吻蝮蛇蛇毒(Wannan agkistrodon acutus venom)中分离纯化出两个抗凝蛋白组分ACPC1、ACPC2;用MTT法检测ACPC1、ACPC2对人肝癌细胞Bel-7404的抑制作用。结果人肝癌细胞BEL-7404经ACPC1或ACPC2处理72h后,当ACPC1浓度≥3·125μg·mL-1,ACPC2浓度≥1·563μg·mL-1时,显示出明显的抑瘤作用,且呈剂量依赖关系。结论 ACPC1、ACPC2对体外培养的人肝癌细胞BEL-7404均具有明显的抑制作用。; 张志友芮景; 关键词：尖吻蝮蛇蛇毒抗肿瘤肝癌

人胎中后期大脑额叶一氧化氮合酶阳性神经元发育的免疫组织化学观察被引量：3: 2008年; 目的探讨人胎发育中后期大脑额叶内一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元的生长发育规律。方法采用免疫组织化学方法对人胎大脑额叶NOS阳性神经元的发育进行观察。结果第7～8个月龄时,大脑额叶皮质板深层NOS阳性神经元大小不一,形态多样,呈散在分布,NOS阳性反应较强;在神经元之间脑组织内有膨体神经纤维分布。第9～10个月龄时,大脑皮质板深层NOS阳性神经元胞体略大,胞质丰富,形态饱满,染色深;膨体神经纤维明显;在皮质板浅层出现散在分布的NOS阳性神经元,胞体呈圆形或椭圆形,核大,胞质少,神经突起明显。结论大脑额叶皮质深层NOS阳性神经元基本形成神经网络系统,产生较高浓度的一氧化氮微环境,有利于各种类型神经元的分化、增殖、迁移和发育。; 郑兰荣黄小梅顾倩邵金贵; 关键词：一氧化氮合酶阳性神经元额叶大脑人胎

皖南尖吻蝮蛇毒提取物体外抗肿瘤活性的实验研究被引量：2: 2009年; 目的:从中国皖南尖吻蝮蛇(Agkistrodon acutus)蛇毒中提取蛇毒金属蛋白酶x(snake venommetalloproteinases,SVMP-x)并观察其体外抗癌活性。方法:尖吻蝮蛇粗毒冻干粉溶解并经过离子交换和凝胶过滤后纯化后得到SVMP-x组分,CCK-8比色法测定该组分对体外培养的肿瘤细胞的细胞毒作用。结果:从中国皖南尖吻蝮蛇毒中分离出一种单一组分(SVMP-x),SVMP-x呈剂量依赖性抑制体外培养的人胃癌细胞株(SGC7901)、结肠癌细胞株(SW480)、神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y)、肝癌细胞株(HepG2)及小鼠黑色素瘤细胞株(B16)的增殖,并且对SGC7901及B16的抑制作用强于5-氟脲嘧啶(5-FU),对SGC7901的抑制作用呈剂量-时间依赖关系。结论:从尖吻蝮蛇粗毒冻干粉中成功提取出抗肿瘤组分SVMP-x,该组分对体外培养的肿瘤细胞有明显的抑制作用。; 陈冬云潘学兵吉兆宁; 关键词：尖吻蝮蛇纯化抗肿瘤

皖南尖吻蝮蛇毒抗凝蛋白组分的分离纯化及其急性毒性实验研究被引量：1: 2009年; 目的:从皖南尖吻蝮蛇毒中分离纯化一种新的抗凝蛋白组分-7221(ACPF-7221)。研究小鼠对ACPF-7221的急性毒性反应及死亡率并确定其LD50及95%可信区间。方法:先后用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换柱层析、Sephadex G75分子筛、SP Sepharose Fast Flow阳离子交换柱层析、Sephadex G50分子筛过滤对尖吻蝮蛇粗毒进行分离纯化,利用部分凝血活酶活性时间(APTT)活性检测筛选出抗凝成分。ACPF-7221从小鼠的尾静脉注射,根据每组小鼠的体重确定其相对应的给药量。根据死亡结果计算出LD50及其95%可信区间。结果:分离纯化的ACPF-7221由相对分子质量分别为25000、30000、50000的3种蛋白所构成三聚体,其蛋白含量约为65%。小鼠静脉注射LD50为7.848mg/kg,LD50(95%可信区间)分别为7.353～8.375mg/kg。结论:利用离子交换柱层析法可从皖南尖吻蝮蛇毒中提取出一种新的抗凝蛋白组分,此组分由3种相对分子质量各异的蛋白所构成三聚体。通过对小鼠急性毒性实验确定LD50及其95%可信区间。肺为急性毒性的靶器官,肺出血窒息是其死亡的原因。; 怀建国芮景; 关键词：蛇毒抗凝急性毒性半数致死量

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安徽省高校省级自然科学研究项目(KJ2007A039)