国家自然科学基金(81101883) 作品数:9 被引量:66 H指数:4 相关作者: 陈凛 卫勃 张庆鹏 崔建新 郗洪庆 更多>> 相关机构: 中国人民解放军总医院 内蒙古医科大学 军事医学科学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京市科技新星计划 国家杰出青年科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 机械工程 更多>>
磷酸化Akt1(Thr308)位点突变真核表达载体的构建及其生物学功能研究 2016年 目的:构建磷酸化Akt1(Thr308)位点突变真核表达载体,并瞬时转染胃癌耐药细胞,对其生物学功能进行初步检测。方法:以带有pc DNA3.0-Flag标签的Akt1质粒为模板,采用重组PCR技术扩增得到Akt1(T308A)(苏氨酸突变成丙氨酸)、Akt1(T308E)(苏氨酸突变成谷氨酸)位点突变编码区序列,将其插入pc DNA3.0-Flag载体,双酶切和测序验证后瞬时转染人胚肾293T细胞,Western印迹检测其表达情况;将突变质粒与空载体分别转染人胃癌耐药细胞BGC-823/c DDP,通过Western印迹和实时定量PCR检测Notch1蛋白和m RNA水平的变化,通过CCK-8法检测对耐药细胞生长曲线的影响。结果:双酶切和测序结果表明Akt1(T308A)、Akt1(T308E)的真核表达质粒构建成功,转染293T细胞后获得表达;转染人胃癌耐药细胞BGC-823/c DDP后,利用实时定量PCR和Western印迹证明去磷酸化Akt1(T308A)可抑制Notch1的转录和蛋白水平,模拟持续磷酸化Akt1(T308E)升高Notch1的转录和蛋白表达;细胞生长曲线结果显示,转染Akt1(T308A)较空载体耐药细胞生长慢,而Akt1(T308E)促进耐药细胞生长。结论:PI3K/Akt与Notch1信号通路的激活在胃癌耐药的发生、发展过程中发挥重要作用。 熊加秀 丁丽华 刘文忠 张亚楠 陈志达 罗晓丽 贾小萌 陈滢洁 叶棋浓 卫勃关键词:AKT1 NOTCH1 点突变 胃癌神经侵袭的细胞与分子机制 被引量:14 2015年 神经侵袭是胃癌的转移途径之一,常导致局部复发及疼痛,侵袭和转移所导致的复发是胃癌预后极差的主要原因。在胃癌的发生发展过程中,神经与血管、淋巴管等因素共同构成肿瘤的微环境,对肿瘤细胞的各种生物学特征起着决定性作用。神经与肿瘤细胞之间的相互作用包括分子间作用及细胞形态改变,但胃癌神经侵袭的现象及分子细胞机制尚缺乏定论,本文就肿瘤神经侵袭发生发展过程中的细胞及分子改变作一综述。 夏启俊 陈凛关键词:胃肿瘤 嗜神经侵袭 原发性腹膜后肿瘤手术联合放射治疗患者预后的Meta分析 被引量:5 2015年 目的系统评价手术联合放射治疗腹膜后肿瘤的预后情况。方法检索Cochrane librar y、Med line、EMBASE、中国生物医学文献数据库、中国期刊全文数据库、万方等数据库,学术会议资料和学位论文,以及一些图书馆纸质出版物,全面收集关于腹膜后肿瘤外科手术联合放射治疗的相关文献。制定相应的文献排除和纳入标准,并通过复习文献制定效应指标的评价标准。由两名研究者按照相应的文献评价标准分别对收集的文献进行评价,然后应用STATA软件进行Meta分析,计算治疗组和对照组的生存率、风险率(HR)及95%CI,对不能进行Meta分析的文献进行描述性分析,客观评价各种治疗方案的疗效。结果最终共有9篇文献纳入本研究,其中中文文献1篇,英文文献8篇,累计治疗组573例,对照组1403例。Meta分析结果显示,腹膜后肿瘤手术联合放疗组患者的生存率明显高于单纯手术组(合并HR=0.57,95%CI 0.40~0.74),差异有统计学意义(P=0.000)。结论腹膜后肿瘤患者在严格完成手术的同时,可根据具体情况选择合适的方案进行放射治疗以改善预后,提高生存率。 邱畅 张庆鹏 陈志达 刘国晓 陈凛 卫勃关键词:腹膜后肿瘤 放射疗法 META分析 Current status of laparoscopic surgery for gastric cancer 被引量:1 2013年 Surgical resection remains the mainstay of curative treatment for gastric cancer.Laparoscopic surgery is a form of minimally invasive surgery (MIS) that has become increasingly used in the resection of gastric cancer.Laparoscopic surgery is designed to minimize surgical insults and to maximize patient survival,while not compromising oncologic clearance. XI Hong-qing CUI Jian-xin CHEN Lin18氟-脱氧葡萄糖正电子发射计算机断层成像术在胃癌术前分期中应用价值的Meta分析 被引量:7 2013年 目的系统评价18氟-脱氧葡萄糖正电子发射计算机断层成像术(18F-FDGPET-CT)对胃癌术前分期的诊断价值。方法通过检索PubMed、EMbase、Coehrane、CBM和CNKI数据库相关文献.根据QUADAS评价量表对文献质量进行评价,并采用MetaDisc软件对其诊断的敏感性,特异性等进行合并分析和异质性检验。结果15篇文献符合纳入标准,合并分析结果显示,18F-FDGPET—CT对胃癌原发灶诊断的敏感度为0.921(95%CI:0.871—0.956),特异度为0.895(95%CI:0.785—0.960),阳性似然比为5.12(95%CI:2.69~9.73),阴性似然比为0.13(95%CI:0.08—0.20),SROC曲线下面积(AUC)为0.9520;对局部淋巴结转移诊断的敏感度为0.613(95%CI:O.555-0.668),特异度为0.986(95%CI:0.960~0.997),阳性似然比为11.68(95%CI:5.52—24.73),阴性似然比为0.36(95%CI:0.24~0.55),AUC为0.9343;对远处转移灶诊断的敏感度为0.792(95%CI:0.703~0.865),特异度为0.976(95%CI:0.951~0.990),阳性似然比为16.70(95%CI:9.00~39.97),阴性似然比为0.26(95%CI:0.18—0.39),AUC为0.9454。结论。18F-FDGPET-CT应用于胃癌术前分期具有较高的诊断价值。 崔建新 李婷 郗洪庆 卫勃 陈凛关键词:术前分期 META分析 胃癌同时性肝转移患者不同治疗方法的疗效比较 被引量:3 2014年 目的评价不同治疗方案对胃癌同时性肝转移的疗效。方法回顾性分析解放军总医院1998年1月至2012年11月收治的271例胃癌同时性肝转移患者的临床病理资料,其中单纯接受手术治疗者34例(手术组),单纯接受化疗者103例(化疗组),接受综合治疗者134例(综合治疗组)。通过随访比较3组接受不同治疗方案患者的预后情况。结果手术组中位生存期为8(3—41)个月,1、3、5年生存率分别为32.4%、2.9%和0;化疗组中位生存期为7(3-50)个月,1、3、5年生存率分别为21.1%、1.1%和0;综合治疗组中位生存期为11(3—84)个月,1、3、5年生存率分别为50.0%、5.0%和O.8%;3组比较,差异有统计学意义(P〈0.05);手术组与化疗组比较、手术组与综合治疗组比较以及化疗组与综合治疗组比较,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。淋巴结转移程度、治疗方式和肝转移灶是否局部处理是影响胃癌同时性肝转移患者生存期的独立预后因素。结论以手术为基础的多学科综合治疗可以改善胃癌同时性肝转移患者的预后。 李佶阳 崔建新 申伟松 郗洪庆 刘森锋 陈凛关键词:胃肿瘤 肝转移癌 上皮-间质转化在皮肤创面修复中作用的研究进展 2017年 上皮一间质转化( epithelial - mesenchymal transition,EMT)最早的描述见于19世纪60年代Trelstad等。发现在鸡胚胎形成过程中,单胚层重组为三层结构,此过程也被称为原肠胚形成。随后,Greenburg和Hay提出了EMT的概念,即上皮细胞失去细胞极性,细胞间黏附降低,迁移能力增加,逐渐获得间质样细胞特性。EMT主要分为以下三种类型:(1)胚胎发育和器官形成;(2)创伤修复和器官纤维化;(3)肿瘤形成与转移。可见,EMT广泛存在于生物个体的各生理及病理过程中。 霍嘉慧 孙苏静 耿志军 李想 孙晓艳 孙晓艳 马奎关键词:上皮-间质转化 创面修复 器官纤维化 EMT 细胞极性 腹腔镜在65岁以上胃肠外科急腹症患者手术中的应用 被引量:32 2015年 目的:探讨腹腔镜技术在65岁以上老年急腹症患者中的应用价值。方法回顾性分析2006年1月至2014年6月在解放军总医院因急腹症接受腹腔镜手术138例65岁以上患者的临床资料(腹腔镜组),并与同期接受开腹探查手术的170例65岁以上急腹症患者临床资料(开腹组)进行比较分析。结果腹腔镜组与开腹组相比,术中出血量减少[(107.1±47.7) ml比(163.6±106.5) ml, P=0.000],术后并发症发生率降低[2.9%(4/138)比12.9%(22/170), P=0.022],住院时间缩短[(10.5±7.5) d 比(16.5±9.9) d, P=0.044],术后下地活动时间和术后胃肠功能恢复时间提前[(25.6±7.7) h比(33.2±5.6) h, P=0.020;(36.9±9.1) h比(49.3±10.6) h, P=0.031]。急性阑尾炎、上消化道穿孔和肠梗阻患者腹腔镜组在住院时间、术后下地活动时间、术后胃肠功能恢复时间和术中出血量等方面明显优于开腹组(P<0.01);而对于结肠穿孔和肠系膜血管病变患者,两组在住院时间、术中出血量和术后胃肠功能恢复时间等方面差异无统计学意义(P>0.05)。结论腹腔镜手术对于65岁以上急腹症尤其急性阑尾炎、上消化道穿孔和肠梗阻患者安全有效。 张庆鹏 卫勃 陈凛关键词:急腹症 老年人 腹腔镜 开腹探查术 敲低Runt相关转录因子2(Runx2)表达抑制结肠癌细胞生长和迁移 被引量:4 2016年 目的构建稳定低表达Runt相关转录因子2(Runx2)的HCT-8结肠癌细胞,检测对结肠癌细胞生长和迁移等生物学行为的影响。方法首先采用Western blot法检测Runx2在不同结肠癌细胞系中表达,确定HCT-8结肠癌细胞高表达Runx2;将含有Runx2的慢病毒短发卡RNA(shRNA)的干扰载体与慢病毒包装辅助质粒共转染人胚肾HEK293FT细胞后,收集病毒上清,感染HCT-8结肠癌细胞。经嘌呤霉素筛选后,获得慢病毒介导的Runx2 shRNA的稳定表达细胞,利用实时定量PCR和Western blot法检测Runx2的shRNA的干涉效果;用CCK-8法检测细胞增殖活性、平板克隆形成实验检测癌细胞生长、Transwell^(TM)侵袭实验和划痕愈合实验检测Runx2 shRNA转染对癌细胞侵袭和迁移的影响。结果建立了稳定敲低Runx2水平的HCT-8结肠癌细胞;敲低HCT-8细胞Runx2表达水平后,癌细胞的生长、侵袭和迁移受到明显抑制。结论敲低Runx2抑制结肠癌细胞的生长、侵袭和迁移。 熊加秀 叶棋浓 卫勃 刘文忠关键词:慢病毒属 结肠癌