国家自然科学基金(81001601)
- 作品数：10 被引量：60H指数：5
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- 稀土元素镧、铈对铁皮石斛组培苗生长影响的研究被引量：9
- 2016年
- 目的探讨添加稀土元素镧、铈对铁皮石斛组培苗以及移栽后铁皮石斛苗的生长的影响,寻找能显著促进铁皮石斛生长发育的稀土元素,以获得品质优良的铁皮石斛苗。方法以铁皮石斛小苗为外植体,通过添加不同浓度硝酸镧、硝酸铈的培养基上进行培养,并对其性状特征、生理活性、移栽后生长状况等进行统计比较研究。结果通过90 d的培养后,添加稀土元素组别的铁皮石斛的鲜质量、根数、株高、叶绿素含量均高于空白组,分蘖数低于空白组,而且随着硝酸镧和硝酸铈浓度的增高,铁皮石斛组培苗的鲜质量、株高、根数、叶绿素含量基本呈递增的趋势,分蘖数呈递减的趋势,硝酸铈浓度为40 mg/L时,其鲜质量、根数、株高最大,分蘖数最少;铁皮石斛移栽培养30 d后,稀土元素组比空白组中的存活率和抽芽率高,硝酸铈为40 mg/L时其生长情况最佳;一定浓度的稀土元素La、Ce能增强铁皮石斛组培苗的T-SOD酶、CAT酶活性和根系活力,添加10.0~40.0 mg/L La^(3+),SOD酶活性和CAT酶活性均呈现先增后降的趋势;添加10.0~40.0 mg/L Ce^(3+),SOD酶活性逐渐增强,但CAT酶活性在Ce^(3+)10~30.0 mg/L时逐渐增强,40.0 mg/L时又稍下降;添加10.0~40.0 mg/L La^(3+),根系活力呈先增后降的趋势,10~30.0mg/L时根系活力逐渐上升,40.0 mg/L时略有下降;添加10.0~40.0 mg/L Ce^(3+),根系活力逐渐上升,40.0mg/L时最高。结论稀土元素镧、铈对铁皮石斛组培苗的生长及T-SOD酶、CAT酶活性和根系活力均有较显著的影响,本文结果为铁皮石斛组培苗的壮苗以及品质的提高提供了依据。
- 张桂芳闫小巧王艳李一凡林颖赖小平
- 关键词：铁皮石斛稀土元素根系活力
- 基于GC-MS代谢组学的铁皮石斛与胶孢炭疽菌互作机制研究被引量：3
- 2018年
- 目的利用代谢组学技术探讨与铁皮石斛炭疽病病程相关的代谢物及其可能的作用机制,为铁皮石斛抗病品种选育提供依据。方法分别采集铁皮石斛正常叶片与经胶孢炭疽菌处理的感病叶片,经样本前处理、GC-MS分析、生物信息学分析等找出差异代谢物,初步探讨参与病程的差异代谢物并分析代谢通路。结果成功建立了各分析组的多维统计分析模型,选取VIP>1.0的分散点为潜在差异物质,同时结合单维统计分析(test)中P<0.05为标准加以验证,从鉴定出的305个代谢物中共筛选出84个差异代谢产物,被认为是病程相关代谢物;通过对差异代谢物进行通路富集分析,共有34个差异代谢物参与了代谢途径,且获得的正常-感病代谢通路具有显著意义。结论基于GC-MS技术对铁皮石斛不同处理组(正常/感病)样本进行了代谢组学分析,并找出与铁皮石斛炭疽病病程相关的代谢物,可为从分子水平研究铁皮石斛病害及培育抗病品种奠定基础。
- 闫小巧王艳李一凡钟志敏谢观雯赖小平张桂芳
- 关键词：铁皮石斛胶孢炭疽菌代谢组学互作机制
- 铁皮石斛人工种子制作及影响因素研究被引量：15
- 2011年
- 目的建立铁皮石斛人工种子制作方法,并考察相关影响因素,为铁皮石斛的繁育提供一条新途径。方法以铁皮石斛原球茎为包埋体制作人工种子,考察胚乳、种皮组分对人工种子萌发和成苗的影响。结果以MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L NAA+3 g/L AC+30 g/L海藻酸钠+3 g/L百菌清为基本胚乳,在2%CaCl2中反应15 min是铁皮石斛人工种子制作的较佳条件,胚乳中分别添加15 g/L木薯淀粉和10 g/L保水剂能明显提高人工种子的萌发率和成苗率,种皮中添加10 g/L纳米SiO2和10 g/L纳米TiO2均能明显提高萌发率,但添加10 g/L纳米SiO2成苗率最高。结论建立了铁皮石斛人工种子制作方法,获得了较高的萌发率和成苗率。
- 张桂芳黄松刘宏源刘星华朱彩霞赖小平
- 关键词：铁皮石斛人工种子纳米材料胚乳种皮
- 铁皮石斛原球茎的诱导与增殖影响因素研究被引量：17
- 2011年
- 目的:研究铁皮石斛原球茎诱导与增殖的最适培养基配方。方法:以铁皮石斛种胚为材料,以MS培养基为基本培养基,研究不同植物激素6-苄基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)和激动素(KT)或其组合及马铃薯提取液(PE)、香蕉提取液(BE)、苹果提取液(AE)和椰乳(CM)等有机添加物对铁皮石斛原球茎诱导和增殖的影响。结果:6-BA与NAA配比不利于种胚萌发,萌发度均低于MS培养基;添加10%的PE、CM有利于原球茎诱导;2,4-D对原球茎的生长和增殖不利,一定浓度的BA、KT和NAA有利于原球茎的增殖;KT浓度为1.0 mg/L时,原球茎40 d增殖倍数最高,达9.0;PE、CM、AE都能不同程度的促进原球茎的增殖,以10%的CM效果最好。结论:适宜铁皮石斛原球茎的诱导培养基为MS+10%CM+1.0 g/L AC;适宜铁皮石斛原球茎增殖的培养基为MS+1.0mg/L KT+0.2mg/L NAA+10%CM。
- 张桂芳关杰敏黄松刘宏源刘星华朱彩霞赖小平
- 关键词：铁皮石斛原球茎增殖
- 流式细胞仪检测铁皮石斛核DNA初探被引量：3
- 2017年
- 目的利用流式细胞仪建立一套快速检测铁皮石斛核DNA的方法,为铁皮石斛倍性育种提供技术支持。方法以二倍体铁皮石斛为试材,通过优化实验材料用量、提取液用量、离心时间、染色剂用量、染色时间对离体培养的铁皮石斛新鲜幼嫩叶片进行核DNA检测。结果表明铁皮石斛最佳流式细胞术条件为叶片150 mg、Otto提取缓冲液2 ml、2 000 r/min离心8 min、PI含量50μg/ml、孵化50min。碎片峰较少,变异系数(CV)低。结论筛选出了较为快速、准确的利用流式细胞仪检测铁皮石斛倍性的方法。
- 张桂芳王艳闫小巧李一凡邵晓茹赖小平
- 关键词：铁皮石斛流式细胞仪
- 野生铁皮石斛rDNA ITS序列分析被引量：2
- 2012年
- 目的:测定和分析不同产地野生铁皮石斛样品的rDNA ITS序列,探讨利用ITS序列推测铁皮石斛样品产地来源的可行性。方法:提取总基因组DNA,使用通用引物ITS5F/ITS4R进行PCR扩增,产物经电泳检测、纯化和测序后用Sequin 11.0提交GenBank。用Bioedit 7.0中的Clustal W对GenBank中包括本研究提交的11条在内的所有33条铁皮石斛的ITS序列进行多重序列比对,随后以金钗石斛和密花石豆兰为外群,用邻接法构建NJ系统发育树。结果:从所有测定的ITS序列中选择11条提交GenBank,获得登录号JF803235-JF803245。所有铁皮石斛经比对后共发现645个同源位点,9个信息位点(ITS1区3个,5.8 S区4个,ITS2区2个)。系统发育分析发现,金钗石斛和密花石豆兰位于树的基部,另外32条铁皮石斛共同形成单个大的分支,未发现产地来源与系统树的拓扑结构之间存在对应关系。结论:由于缺乏完善的铁皮石斛标准品及其DNA参考序列的提交标准,同时单个ITS序列仅能提供有限的系统发育信息位点,因此通过ITS序列分析的方法推测铁皮石斛样品的产地来源目前尚不具有可行性。
- 李海霞黄海波刘鹏黄松张桂芳张丹雁张建霞陈念赖小平
- 关键词：铁皮石斛内转录间隔区系统发育分析物种鉴定
- 铁皮石斛围小丛壳菌的生物学特性被引量：5
- 2018年
- 以近期分离鉴定的铁皮石斛炭疽病原新纪录种铁皮石斛围小丛壳菌(Glomerella cingulata)为试材,采用组织培养的方法系统研究了铁皮石斛围小丛壳菌的生物学特性。以期找到高效快速的防治方法,以解决铁皮石斛炭疽病频繁发生且有日益加重趋势的问题。结果表明:铁皮石斛围小丛壳菌菌丝适应性强,在不同培养基均能生长,在PDA培养基上生长最快;在10~35℃下均可以生长,25~30℃下较适合菌丝体的生长,28℃菌丝生长最快,产子囊壳最多;不同光照条件下生长均较好,但光照可促进子囊壳的产生;在pH 5~12下均可生长,但pH 8时菌丝生长最快,pH 9时子囊壳产量最高;在不同碳氮源上均可生长,山梨醇对菌丝的生长最有利,在麦芽糖碳源上菌丝浓密,子囊壳的产量达到最高;菌丝对蛋白胨氮源的利用率最高。菌丝体的水浴致死条件是50℃。
- 王艳张桂芳闫小巧李一凡赖小平
- 关键词：铁皮石斛生物学特性
- 胶孢炭疽菌粗毒素对铁皮石斛生长的影响
- 2018年
- 【目的】探究胶孢炭疽菌粗毒素对铁皮石斛幼苗生长状况的影响,为铁皮石斛抗性突变体筛选和培育提供前期基础。【方法】添加不同浓度胶孢炭疽菌粗毒素的MS培养基对铁皮石斛幼苗进行培养,观察粗毒素对幼苗生长的影响,并初步筛选适宜抗性选择压。【结果】胶孢炭疽菌粗毒素浓度在5%~15%(体积分数)范围内,对铁皮石斛株高、茎粗、新增芽数、根数、鲜重的增长起促进作用,其中以浓度为5%(体积分数)时促进作用最为显著;粗毒素浓度在35%~40%(体积分数)范围内对铁皮石斛株高、叶片数、新增芽数、根数、鲜质量的增长起到抑制作用;粗毒素浓度在20%(体积分数)时,铁皮石斛出现开花现象,且花的形态出现变异现象。【结论】胶孢炭疽病菌粗毒素具有生物活性,且有一定的毒性,可以考虑代替病原菌作为离体筛选铁皮石斛抗炭疽病突变体的选择剂,但筛选铁皮石斛抗性突变体的抗性选择压还有待进一步研究。
- 闫小巧梁凯华李一凡钟志敏谢观雯赖小平张桂芳
- 关键词：胶孢炭疽菌粗毒素铁皮石斛栽培
- 铁皮石斛壮苗生根与移栽种植研究被引量：5
- 2015年
- [目的]筛选出较适宜铁皮石斛壮苗生根的培养基和移栽基质及移栽管理方式。[方法]以已分化出真叶的丛生苗为试材,通过研究不同植物激素配比和有机添加剂对铁皮石斛壮苗生根的影响,筛选出促进铁皮石斛试管苗快速生根和壮苗的培养基,同时对铁皮石斛试管苗的移栽进行全面研究,设置不同的移栽基质及移栽管理方式,以提高试管苗的脱瓶移栽成活率。[结果]适宜铁皮石斛生根的培养基为1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+IBA 2.0 mg/L;适宜铁皮石斛壮苗的培养基为1/2MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA0.5 mg/L;适宜铁皮石斛生根壮苗的有机添加剂为20%香蕉汁;适宜铁皮石斛移栽种植的管理方式为单栽,其中运用单栽管理方式适合铁皮石斛移栽种植的基质为1/3泥炭+1/3松树皮+1/3兰石,60 d后成活率达80.0%。[结论]建立一套适合铁皮石斛壮苗生根与移栽种植的方法,为铁皮石斛的产业化大规模种植奠定基础。
- 王艳徐迎亚闫小巧张桂芳
- 关键词：铁皮石斛壮苗
- 铁皮石斛原球茎增殖与分化影响因素研究被引量：5
- 2015年
- 【目的】研究适宜铁皮石斛原球茎增殖与分化的培养基配方,以获得较高的增殖率与分化率。【方法】考察不同浓度植物激素6-苄基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和激动素(KT)或其组合,及土豆汁(PE)、香蕉汁(BE)、苹果汁(AE)和椰乳(CM)等有机添加物对铁皮石斛原球茎增殖与分化的影响。【结果】一定浓度的6-BA、NAA、KT有利于原球茎的增殖与生长,KT浓度为1.0 mg/L时较适宜,原球茎50 d增殖倍数达到7.20;2,4-D对原球茎生长和增殖有明显抑制作用;6-BA、NAA和KT配合使用对原球茎增殖效果较单独使用更为明显,其中以0.5 mg/L 6-BA、1.0 mg/L KT和1.0 mg/L NAA配合使用增殖倍数最高,50 d达9.52;一定浓度的PE、AE对原球茎的分化均有促进作用,以添加100 g/L土豆汁的分化率最高,达到92.6%,且试管苗的生长状态良好。【结论】获得了铁皮石斛原球茎增殖与分化的适宜激素配比和添加物浓度,将为其快速繁育和人工种子制作奠定基础。
- 徐迎亚王艳刘宏源赖小平张桂芳
- 关键词：原球茎增殖分化
