福建省自然科学基金(2009J05050)
- 作品数：8 被引量：54H指数：5
- 相关作者：陈如凯许莉萍阙友雄郭晋隆刘金仙更多>>
- 相关机构：福建农林大学中华人民共和国农业部武夷学院更多>>
- 发文基金：引进国际先进农业科技计划福建省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 甘蔗杂交后代遗传变异评价及高糖和低糖池构建被引量：2
- 2009年
- 以甘蔗品种CP84-1198为母本,科5为父本,配置杂交组合1;以ROC20为母本,桂73-167为父本,配置杂交组合2。调查了2个杂交组合有性世代和无性世代的主要经济形状,并应用相关分析、差异显著性分析、多元线性回归分析和逐步回归分析等方法分析了甘蔗主要经济性状的相关性及其在世代间的差异和重演性。结果表明:有性世代中,株高与锤度、丛重、锤重都呈显著正相关,有效茎数对甘蔗经济产量的直接效应大于株高与茎径;无性世代中,锤度的变异系数最小,锤度性状稳定性相对较高;同一组合无性世代的株高、茎径和锤度的均值均显著高于有性世代;不同世代中株高和锤度重演力强,而茎径的相关系数不显著,重演力较弱,"Brix-clumpweigh"拟合图显示了有望从杂交后代群体中筛选出高糖、高产聚合基因型个体。根据以上结果,还探讨了杂交后代高产优质个体的选择策略,同时构建了能用于标记分析的高糖和低糖池。
- 阙友雄黄文华许莉萍张木清陈如凯
- 关键词：甘蔗杂交后代经济性状
- 甘蔗S-腺苷蛋氨酸脱羧酶基因Sc-SAMDC的克隆和表达分析被引量：18
- 2010年
- 【目的】克隆甘蔗(Saccharum officinarum)S-腺苷蛋氨酸脱羧酶(S-adenosylmethionine decarboxylase,SAMDC)基因,并进行序列特征、原核表达和不同逆境胁迫下表达特性分析。【方法】通过对甘蔗茎全长cDNA文库测序和分析,获得SAMDC基因cDNA全长,命名为Sc-SAMDC,并进行序列分析。随后将编码S-腺苷蛋氨酸脱羧酶的cDNA片段克隆到原核表达载体pET29a(+)中,构建融合表达质粒,转化至Esherichia coli BL21(DE3)中进行表达。最后利用定量PCR技术分析甘蔗幼苗中该基因在不同外源胁迫下的表达特性。【结果】序列分析显示,甘蔗Sc-SAMDC基因(GenBank Accession number:GQ246459)cDNA全长1968bp,存在3个读码框(袖珍读码框tORF、上游读码框uORF和主读码框mORF),mORF长1200bp,编码399个氨基酸的SAMDC酶原,预测分子量为43.6kD,该酶原含有两个高度保守的功能结构域(酶原剪切位点和PEST结构域)。原核表达产物经SDS-PAGE表明,Sc-SAMDC以融合蛋白形式表达,相对分子量约为50kD。定量PCR分析表明,Sc-SAMDC基因在聚乙二醇(PEG)、NaCl、水杨酸(SA)和H2O2外源胁迫下表达特性不同,受PEG和NaCl的诱导,受SA和H2O2的抑制。【结论】本研究成功地克隆了Sc-SAMDC基因并在原核生物中进行了表达研究,分析了该基因的表达特性,为其进一步的生物学功能研究及其应用奠定了基础。
- 刘金仙阙友雄郭晋隆许莉萍徐景升陈如凯
- 关键词：甘蔗原核表达定量PCR
- 利用改进的Oligo-Capping法构建甘蔗茎全长cDNA文库被引量：5
- 2009年
- Oligo-Capping法是目前全长cDNA文库构建的重要方法之一。笔者在引进、消化和吸收的基础上,通过对特异引物和接头序列的设计,及cDNA扩增反应条件的优化,对该方法进行了一些切实可行的改进,形成了一套简便易行的技术体系。利用本研究中改进的Oligo-Capping法,成功地构建了甘蔗茎全长cDNA文库。综合评价结果表明,本研究中所构建的甘蔗茎全长cDNA文库的库容大于2.5×106cfu,重组率为91%,全长率高达88.9%。本文库的构建为进一步甘蔗茎中全长基因的克隆和功能基因的表达分析奠定了基础。
- 郭晋隆阙友雄刘金仙郑益凤陈如凯许莉萍
- 关键词：全长CDNA文库
- 甘蔗谷胱甘肽硫转移酶基因的全长克隆、序列分析和表达特性
- 甘肽硫转移酶是解毒多环芳烃类物质的一类重要酶系,其编码基因的克隆、序列分析和表达特性研究可以为深入阐述该基因的确切功能积累基础资料.本研究在构建文库和大规模测序的基础上,从甘蔗叶片全长cDNA文库中获得一个甘蔗GST全长...
- 阙友雄刘金仙许莉萍郭晋隆徐景升张木清陈如凯
- 关键词：甘蔗原核表达定量PCR黑穗病菌
- 转基因植物及其产品PCR检测引物的筛选研究被引量：1
- 2010年
- 建立了一种转基因植物及其产品PCR检测引物筛选方法。以转基因大豆Roundup Ready为材料,设计了5对引物,通过荧光定量PCR方法对其扩增产物的Ct值、引物与模板的结合效率、PCR产物的溶解曲线方面进行分析,证明RRS2引物对是转基因大豆Roundup Ready最佳品系特异性检测引物。
- 王恒波陈平华陈如凯
- 关键词：转基因植物PCR引物筛选
- 宿根矮化病菌的竞争定量PCR检测方法建立被引量：5
- 2009年
- 利用宿根矮化病菌的特异检测引物,构建竞争定量PCR检测的非同源模板,建立宿根矮化病菌的竞争定量PCR检测方法。实验中非同源模板(竞争模板)构建是采用PCR方法对大肠杆菌基因组进行低严谨度扩增,回收合适的DNA片段并将其构建到T-esay载体上,通过测序和序列比对,除两端引物序列完全相似外,其余部分没有同源性,因此可以作为定量检测的非同源模板。通过计算非同源模板的拷贝数,进行竞争定量PCR检测宿根矮化病,建立宿根矮化病菌的标准竞争曲线和直线回归方程。本研究建立的竞争定量PCR检测方法操作简单、特异性和敏感性高,适合于宿根矮化病菌的检测,并可为其它病菌竞争定量PCR检测方法的建立提供参考。
- 王恒波郭晋隆陈平华阙友雄陈如凯许莉萍
- 关键词：甘蔗
- 转基因大豆GTS40-3-2转化事件特异性PCR检测被引量：6
- 2010年
- GTS40-3-2是抗草甘膦转基因大豆,为建立GTS40-3-2大豆转化体特异性PCR检测方法,本研究以GTS40-3-2标准品为实验材料,根据已公布转基因大豆GTS40-3-2基因与大豆基因组连接序列信息,利用Primer5.0软件设计了5对品系特异性引物,对每对引物进行了退火温度、特异性及扩增效率的PCR检测,结果显示,5对特异性引物均能够从GTS40-3-2中扩增出大小约279bp、238bp、470bp、490bp和257bp的预期产物,可用于特异性检测转基因大豆GTS40-3-2转化事件。以转基因大豆GTS40-3-2含量为5%、2%、1%、0.5%和0.1%的标准品进行PCR灵敏度检测,结果表明5对引物的检测灵敏度均能达到0.1%。通过荧光定量PCR对5对特异性引物的Ct值与溶解曲线比较,最后选择出RRS2引物对为转基因大豆GTS40-3-2品系特异性检测的最适引物。本文结果将为我国未来转基因生物产品成分检测提供科学合理的实验参考。
- 王恒波陈平华郭晋隆陈如凯许莉萍
- 关键词：转基因大豆
- 甘蔗锰超氧化物歧化酶基因的全长克隆、序列分析和表达特性
- 化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)是生物体内重要的自由基清除剂,研究表明SOD基因与植物的抗逆性密切相关.本研究在构建文库和大规模测序的基础上,从甘蔗叶片全长cDNA文库中获得一个甘蔗SOD全...
- 阙友雄刘金仙许莉萍郭晋隆徐景升张木清陈如凯
- 关键词：甘蔗原核表达定量PCR黑穗病菌
- 甘蔗亲环蛋白基因的克隆和表达特性分析
- 亲环蛋白是一类广泛存在于生物细胞,且与环孢素A(cyclosporineA,CsA)有高度亲和力的细胞内结合蛋白,其表达和积累受逆境胁迫因素的调节和影响,与植物响应逆境胁迫相关。目前
- 阙友雄刘金仙郭晋隆许莉萍徐景升张木清陈如凯
- 关键词：亲环蛋白特性分析
