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重庆市医学重点学科建设基金(2005BB5116)
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人AB型血清培养体系体外培养扩增人脐血源基质细胞的试验研究
2009年
目的建立并优化AB型健康成人血清培养体系对人脐血源基质细胞的体外培养条件,观察基质细胞的生物学特性。方法人脐带血标本分离培养人脐血源基质细胞,经密度梯度分离后,在含有15%人AB型血清、bFGF(2,5~20.0μg/L)、10^(-6)mol/L氢化可的松的DMEM/F12培养液中进行原代培养和传代。倒置显微镜观察细胞生长情况,HE染色观察细胞形态特征,并采用常规HE染色和免疫细胞化学染色对培养细胞进行鉴定。结果成功获得人脐血源基质细胞并进行体外扩增培养和传代,培养细胞能形成纤维细胞样集落。优化的培养条件为:DMEM/F12培养基添加15%人AB型血清、10.0μg/LbFGF、10^(-6)mol/L氢化可的松。免疫细胞化学染色Vimentin+、CD34+、TdT-、CD45-、CK-,符合造血基质细胞特点。结论采用人AB型血清培养体系可成功培养扩增人脐血源基质细胞,为下一步临床应用研究打下坚实的基础。
龚奕
陈幸华
张曦
彭贤贵
邹仲敏
关键词:
细胞培养技术
血型抗原
胎血
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