国家自然科学基金(30972183)
- 作品数:6 被引量:72H指数:4
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- 禽波氏杆菌单因子血清的制备及血清分型的探索
- 禽波氏杆菌病主要是由禽波氏杆菌引起的一种高度接触性传染病,利用波氏杆菌的14个菌株分别制备相应的抗血清,然后对抗血清进行交叉吸收试验,得到Ⅰ型和Ⅱ型2种单因子血清,不同血清型的单因子血清不与其他血清型菌株发生凝集。利用这...
- 马荣德朱瑞良郭文龙朱明华孙寅剑
- 关键词:禽波氏杆菌血清型
- 文献传递
- 不同动物种源肺炎克雷伯氏菌分离株23S rRNA序列分析被引量:10
- 2013年
- 为分析动物种源肺炎克雷伯氏菌分离株(K.p妇)的进化特点,本研究通过PCR扩增不同动物种源K.pn的23SrRNA基因片段,克隆测序,进行BLAST比对;构建K-pm菌株的系统进化树。结果显示,本实验室保存的12株K.p力核苷酸序列与GenBank收录的X87284株K-pm核苷酸序列同源性为96.8%~99.0%,而与沙门氏菌和奇异变形杆菌同源性只有90.0%~92.7%;8株毛皮动物K.加核苷酸序列同源性为98.1%~99.9%,与猪源、鸡源K.p力的核苷酸序列同源性分别为95.5%~98.1%、96.7%~97.9%;猪源与鸡源K.pn的核苷酸序列同源性为95.9%~97.4%。结果表明,不同动物种源K-pn23SrRNA基因序列同源性差异明显,具有种属的特异性,23SrRNA基因序列可以作为鉴定K-pm的一种快速、简便的方法。
- 钟世勋王迪曲亭合潘德琴黄璇李奕芙邵明旭朱瑞良
- 关键词:肺炎克雷伯氏菌RRNA同源性进化基因分析
- 食源性致病菌沙门氏菌与奇异变形杆菌二重PCR检测方法的建立被引量:4
- 2014年
- 目的建立快速检测食物中致病菌奇异变形杆菌与沙门氏菌的双重PCR方法。方法根据奇异变形杆菌尿素酶合成的正向调节因子R基因(ureR)和沙门氏菌属侵袭性抗原保守基因(invA)设计特异性引物,建立其双重PCR检测方法,并对反应条件进行优化。结果两对引物分别能扩增出374 bp和724 bp的目的条带,具有高度特异性,反应条件优化后,两菌可同时检出的浓度限度为104cfu/ml。结论该方法特异性和灵敏度高,检验周期短,可用于对食物中奇异变形杆菌与沙门氏菌的快速诊检和监控。
- 张海霞孙桂珍王慧孙振红
- 关键词:奇异变形杆菌沙门氏菌二重PCR
- 16S-23S rRNA基因间隔序列PCR及RFLP对奇异变形杆菌分离株的鉴别与系统发育分析被引量:2
- 2013年
- 根据临床常见致病菌16S-23SrRNA基因间隔序列(ISR)两端的16S及23SrRNA保守序列设计PCR扩增的通用引物,对9株奇异变形杆菌和6株相近菌株应用通用引物PCR扩增16S-23SrRNA ISR序列。通过PCR长度多态性比较、RFLP分析以及部分序列测序比较,分析鉴别奇异变形杆菌。结果显示,PCR长度多态性可以将奇异变形杆菌同其余菌种进行区分;RFLP分析可以将所有试验菌种进行区分;部分序列测序可以对奇异变形杆菌进行分型。由此表明,16S-23SrRNA ISR序列PCR及RFLP分析可以简单、快速、准确的鉴定奇异变形杆菌。
- 崔国林朱瑞良左雪梅钟世勋杨世发梁漫飞孙婧刘静静
- 关键词:奇异变形杆菌16S-23SRRNAPCRRFLP
- 山东部分地区毛皮动物肺炎克雷伯氏菌的分离鉴定及系统发育分析被引量:19
- 2013年
- 为确诊近两年造成毛皮动物(狐狸、貉子、水貂)死亡的主要细菌性病原,本研究在流行病学调查基础上,对新鲜病死毛皮动物进行临床症状观察、病理学检查,同时取病变肝、肺、气管为样品分离纯化细菌,对所分离的细菌进行形态特征、理化特性检查及药敏试验、致病性试验和16S rRNA基因的分子鉴定。结果显示,从剖检病死毛皮动物的肺、肝、气管组织等均检出同种细菌,分离菌株对菌必治和舒巴坦高度敏感,对小白鼠具有较强致病作用,与已知的肺炎克雷伯氏菌16S rRNA序列的同源性为98.6%~100%。综合分析,该分离菌株为克雷伯氏菌属的肺炎克雷伯氏菌。
- 钟世勋朱瑞良崔国林左雪梅杨世发梁漫飞孙婧刘静静
- 关键词:毛皮动物肺炎克雷伯氏菌RRNA系统发育分析
- 奇异变形杆菌与沙门氏菌双重PCR检测方法的建立
- 偏简单目的:建立快速检测奇异变形杆菌与沙门氏菌的双重PCR方法。方法:根据奇异变形杆菌尿素酶合成的正向调节因子R基因(ureR)和沙门氏菌属侵袭性抗原保守基因(invA)设计特异性引物,建立其双重PCR检测方法,并对反应...
- 王慧朱瑞良谭燕玲魏凯王新建孙振红盛鹏程
- 关键词:奇异变形杆菌沙门氏菌双重PCR
- 文献传递
- 泰山松花粉多糖和乳酸杆菌对禽波氏杆菌OMP亚单位疫苗免疫增强的协同作用被引量:4
- 2013年
- 采用改进的水提醇沉法提取泰山松花粉粗多糖,并制备禽波氏杆菌OMP亚单位疫苗。取1日龄SPF雏鸡300只,随机分为6组,Ⅰ~Ⅴ组分别免疫含有松花粉多糖100g/L的禽波氏杆菌OMP亚单位疫苗,Ⅵ组只免疫禽波氏杆菌OMP亚单位疫苗,Ⅰ、Ⅱ组在前2周分别口服高、低剂量的乳酸杆菌活菌菌液1mL,Ⅲ、Ⅳ分别口服高、低剂量的乳酸杆菌热灭活菌菌液1mL。在首免后,每周采取血液和小肠,用间接ELISA法检测血清抗体水平、MTT法检测外周血淋巴细胞转化率﹑全自动血细胞分析仪测定外周血淋巴细胞比率、ELISA法检测小肠sIgA含量和IL-2水平。结果表明,Ⅰ~Ⅳ组抗体水平、IL-2含量、淋巴细胞比率、淋巴细胞转化率、sIgA含量显著高于V组、Ⅵ组(P<0.05);V组各检测指标显著高于Ⅵ组(P<0.05);乳酸杆菌活菌组各检测指标比灭活菌组略高,高剂量组略高于低剂量组。因此,泰山松花粉多糖作为免疫佐剂能显著提高疫苗的免疫效果,同时口服乳酸杆菌能进一步增强动物对疫苗的免疫应答能力,口服乳酸杆菌活菌与口服热灭活菌效果差异不显著,泰山松花粉多糖和乳酸杆菌对增强禽波氏杆菌OMP疫苗的免疫力有协同作用。
- 左雪梅崔国林杨世发梁漫飞钟世勋朱瑞良
- 关键词:乳酸杆菌禽波氏杆菌OMP亚单位疫苗雏鸡免疫增强
- 规模化肉种鸡场胚胎性细菌病的多重感染
- 为了解近年来造成规模化种鸡场鸡胚死亡率增加、孵化率降低的主要病原菌因素及多重感染的情况。本研究对山东某3个大型肉种鸡场17日龄~19日龄的死亡鸡胚进行细菌分离鉴定,经形态特性、生化特性、血清学试验及23S rRNA测序分...
- 谭燕玲朱瑞良王慧魏凯孙振红王新建
- 关键词:鸡胚禽波氏杆菌
- 文献传递
- 泰山松花粉多糖对小鼠免疫增强作用的研究
- 为研究泰山松花粉多糖对健康小鼠免疫功能的增强作用以及对免疫抑制小鼠的免疫恢复作用。本研究选取160只20 g~24 g的清洁级昆明小鼠(雌性),随机分为8组,3个多糖组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),3个环磷酰胺(CTX)-多糖组(Ⅳ、...
- 魏凯朱瑞良孙振红谭燕玲王慧王新建
- 关键词:环磷酰胺抗体免疫增强淋巴细胞IGA
- 鸡奇异变形杆菌外膜蛋白的抗血清制备及其荧光标记抗体检测方法的建立
- 为建立鸡奇异变形杆菌(P.mirabilis)直接荧光标记抗体检测方法,本研究采用改良的方法提取了奇异变形杆菌OMP。以该OMP免疫健康新西兰家兔制备兔抗鸡奇异变形杆菌OMP高免血清,制得纯化的IgG,用FITC标记得到...
- 朱明华朱瑞良王慧孙寅剑马荣德谭燕玲魏凯王新建郭文龙
- 关键词:奇异变形杆菌外膜蛋白荧光抗体
- 文献传递