国家高技术研究发展计划(2001AA215301)
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 相关作者:马小彤宋玉华吴克复张秀军林永敏更多>>
- 相关机构:中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 白细胞介素-23和白细胞介素12在人白血病细胞系中的表达被引量:1
- 2004年
- 目的:检测人白细胞介素-23(IL-23)和白细胞介素-12(IL-12)亚基在各类白血病细胞系中的表达并探讨佛波二酯对IL-23和IL-12亚基表达的调控作用。方法:半定量RT-PCR方法检测13株人白血病细胞系IL-23p19,IL-12p35,IL-12p40 亚基的表达。用佛波二酯处理白血病细胞系,不同时间点取样,半定量RT-PCR方法检测上述亚基的表达变化。结果:检测的大多数白血病细胞系均表达p19 mRNA,p19比p35表达更为普遍;而p40仅在EB病毒感染的LCL和J6-1细胞中测到。佛波二酯可以提高EB病毒阳性细胞系中p19,p35和p40的表达水平。结论:p19可能广泛表达于各类血细胞。佛波二酯可上调EB病毒阳性细胞系p19,p35和p40的表达,表明IL-23与IL-12相类似,其在白血病细胞系中的表达可能与EB病毒感染相关。
- 马小彤吴克复张秀军李戈林永敏宋玉华
- 关键词:白细胞介素-23白血病细胞系EB病毒
- 重组人IL-6/IL-2融合蛋白的高密度发酵和纯化
- 2003年
- 克隆的IL-6/IL-2融合蛋白编码基因插入pBV220载体,转化BL21(DE3)菌株中表达。发酵过程中,30℃扩增生长6小时,42℃诱导培养4小时,控制溶解氧在30%~50%。发酵液中最终菌体密度(OD600)达29.17(相当于每升发酵液含55克湿菌体),表达的融合蛋白呈包涵体形式。表达蛋白占菌体总蛋白的30%左右。菌体经过超声破碎后反复洗涤包涵体,融合蛋白纯度达到70%,进一步用离子交换层析和凝胶过滤层析纯化使其纯度达95%以上。IL-6/2融合蛋白中的IL-6和IL-2活性分别为1×107和2×105 U/mg。重组人IL-6,/IL-2融合蛋白在大肠杆菌中达到了中试水平的高表达。
- 李董袁文肃马小彤蔡辉国明宇李静赵春华
- 关键词:白细胞介素离子交换层析凝胶过滤层析