湖北省教育厅科学技术研究项目(D20121809)
- 作品数:5 被引量:12H指数:2
- 相关作者:余晓丽陈高瞻张舒林马峻雷航更多>>
- 相关机构:武汉轻工大学武汉市医疗救治中心上海交通大学更多>>
- 发文基金:湖北省教育厅科学技术研究项目武汉市卫生局临床医学科研项目上海市科技型中小企业技术创新基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 武汉地区结核分枝杆菌链霉素耐药分离株rpsL基因分子特征研究被引量:1
- 2014年
- 探讨武汉地区结核分枝杆菌链霉素(SM)耐药临床分离株rpsL基因分子特征。收集71株临床分离株,采用刃天青法测定临床分离株对SM的最低抑菌浓度(MIC),同时用直接测序法分析rpsL基因的突变情况;用RD105基因缺失检测法鉴定71株临床分离株中"北京基因型"菌株。结果显示20株SM敏感株rpsL基因未发现突变(MICs<0.25 mg/L);51株SM耐药株中,35株(68.6%)检测到rpsL基因突变,主要发生在第43位和88位密码子,MIC1 mg/L的SM耐药株(低水平耐药株)总突变率低于MIC2mg/L(高水平耐药株);北京基因型与耐药株的相关性不大。研究表明SM耐药菌株rpsL基因突变类型存在地域差异;rpsL突变与SM高水平耐药的相关性在本研究中关联度不大;"北京基因型"菌株在武汉地区呈流行趋势。
- 芦莲陈高瞻黄小琴雷航胡申才李睿刘志国余晓丽
- 关键词:结核分枝杆菌RPSL基因耐药
- 结核分枝杆菌链霉素耐药临床分离株rrs基因突变与其耐药水平相关性研究被引量:3
- 2014年
- 研究武汉地区耐链霉素(SM)结核分枝杆菌的耐药分子机制,进一步研究阐明rrs基因突变与结核分枝杆菌耐链霉素的关系;同时探究武汉地区结核分枝杆菌"北京基因型"菌株的流行趋势,为进一步研究武汉地区耐链霉素菌株rrs基因突变与"北京基因型"的相关性奠定基础。84株结核分枝杆菌中,44株对链霉素耐药,20株耐其它药物,20株对链霉素敏感,采用PCR直接测序法分析链霉素菌株rrs基因突变情况;采用RD105缺失法鉴定84株临床分离菌株中"北京基因型"菌株。结果显示44株SM耐药菌株中,16(36.4%)株检测到rrs基因突变,其中9株1401位点A→G,6株514位点A→C突变,1株1487位点G→A突变;20株耐其它药菌株中1401位点A→G和514位点A→C突变各1株,20株敏感菌株中发现1株1029位点C→T点突变;84株临床分离菌株中有77(91.8%)株"北京基因型"菌株,7株非"北京基因型"菌株。研究表明链霉素耐药菌株rrs基因主要突变位点在514和1401位点,武汉地区"北京基因型"菌株为当地流行的结核分枝杆菌,且SM耐药菌株中突变菌株93.8%(15/16)为"北京基因型","北京基因型"菌株研究及其鉴定是有其科学价值的,值得我们重视。
- 陈高瞻芦莲雷航马峻孙战强孙庆文余晓丽张舒林
- 关键词:结核分枝杆菌链霉素耐药北京基因型
- XTT/mPMS组合显色系统用于抗分枝杆菌药物筛选的性能评估被引量:2
- 2013年
- 目的评估一种用于抗分枝杆菌药物高通量筛选的XTT/mPMS组合显色系统。方法评估XTT/mPMS系统的检测限、稳定性、细胞毒性、培养基组分干扰作用以及药物筛选试验的信噪比、Z'因子等性能指标,进行常用抗分枝杆菌药物最低抑菌浓度(MIC)测定,与刃天青显色法(resazurin microtitre assay,REMA)结果比较。结果 XTT/mPMS对分枝杆菌的检测下限为2.4×107CFU/mL,检测上限不同菌种在1.8×108~7.5×108CFU/mL之间。XTT/mPMS和7H9培养基37℃恒温共培养时至少在7 d内保持相对稳定。XTT/mPMS能与7H9-S培养基组分的营养添加剂(OADC)发生非细胞还原反应;其工作浓度(XTT 0.2 mmol/L,mPMS 0.04 mmol/L)对分枝杆菌具有低细胞毒性;XTT/mPMS检测的Z'因子均大于0.8,信噪比较低;分枝杆菌7H9-S液体培养MIC检测5~7 d(快生菌36~48 h)即可获得结果;MIC结果除M.tuberculosis的乙胺丁醇(EMB)有差异外基本与REMA法一致。结论 XTT/mPMS组合显色系统反应快速、稳定、低毒,适合于抗分枝杆菌药物高通量快速筛选。
- 张朝宝马峻温子禄玄松花周业成余晓丽孙战强张舒林王洪海
- 关键词:分枝杆菌最低抑菌浓度药物筛选
- 基于16S rRNA基因的戈登氏菌演化分析被引量:2
- 2014年
- 探讨19种戈登氏菌共31株间16S rRNA基因演化关系。利用16S rRNA基因序列进行相似性分析和同源性比对,并运用Neighbor-Joining法构建进化树,进行演化分析。其中13条16S rRNA基因序列来自临床分离株,其他16S rRNA基因序列来自Genbank。结果表明:13株临床分离菌株包含4株Gordonia paraffinivorans,6株Gordonia bronchialis和3株Gordonia sputi,临床分离株的相似性百分比为93.5%-99.7%;16S rRNA基因序列在戈登氏菌不同种间存在较为明显的差异性(2%—6.2%),可将临床分离株鉴定到种。进化分析结果显示:戈登氏菌分为两大类群,三种临床分离株在演化上按出现的先后依次为Gordonia bronchialis、Gordonia sputi、Gordonia paraffinivorans。所做研究可为戈登氏菌相关疾病的流行、预防、治疗和控制提供一定的参考。
- 雷航王文靖曾驰余绍为芦莲陈高瞻余晓丽
- 关键词:RRNA菌种鉴定
- 武汉地区结核分枝杆菌临床分离株乙胺丁醇耐药分子特征研究被引量:4
- 2013年
- 探讨武汉地区结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药基因embB的分子特征,为深入研究结核分枝杆菌乙胺丁醇(EMB)耐药分子机制、快速检测技术的建立和个体化临床用药奠定基础;同时探索武汉地区"北京基因型"菌株的传播类型,为结核防控提供参考。收集85株临床分离株,采用PCR直接测序法分析embB基因的突变特征;采用RD105基因缺失检测法鉴定85株分离株中"北京基因型"菌株。结果显示22例EMB耐药株中,15(68.2%)例在embB基因检测到突变,其中14例为306位点突变,突变类型为M306V ATG→GTG和M306I ATG→ATA,1例为319位点突变,突变类型为Y319C TAT→TGT;同时,在63例EMB敏感株中也检测到了5株(7.9%)发生了embB基因突变,其中4例在306位点,1例在319位点。85例临床分离株中78株为"北京基因型"菌株,占全部菌株的91.8%,非"北京基因型"菌株有7株,占8.2%。研究表明embB306位点突变不仅在乙胺丁醇耐药菌株中,而且在乙胺丁醇敏感菌株中也能检测到。由于乙胺丁醇耐药菌株同时还耐其他药物,故不能排除其他药物与embB306位点突变的关系,因此embB306位点突变与结核分枝杆菌耐药的相关性有待深入探讨。本研究发现武汉地区结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药株中embB基因突变类型并不存在地域差异,而在敏感株中却存在明显的地域差异性。本研究同时表明,"北京基因型"菌株在武汉地区呈主要流行趋势,应该引起我们的重视。
- 丁冰冰马峻陈高瞻刘志国李睿胡申才郭利余晓丽张舒林
- 关键词:结核分枝杆菌耐药EMBB基因北京基因型