国家自然科学基金(90713042) 作品数:6 被引量:20 H指数:3 相关作者: 余伯阳 寇俊萍 宋佳希 颜景峰 李金平 更多>> 相关机构: 中国药科大学 南京军区南京总医院 国家林业局 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 教育部“新世纪优秀人才支持计划” 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
非肌肉肌球蛋白重链ⅡA(NMHCⅡA)生理病理功能研究进展 被引量:3 2009年 非肌肉肌球蛋白重链ⅡA(NMHCⅡA)是Ⅱ型非肌肉肌球蛋白的主要亚型,近年来NMHCⅡA基因及蛋白功能的研究日益增多,引起国内外学者的广泛重视。已证实NMHCⅡA基因突变导致多种遗传性疾病,临床多见巨大血小板减少,并逐渐发展为伴有听力障碍、白内障和肾功能损伤;NMHCⅡA参与胞质分裂、细胞吞噬、细胞运动、血栓形成、炎症、肿瘤转移、视网膜变性、听力、肾脏功能调节等病理生理过程。MYH9不同位点的基因突变,NMHCⅡA蛋白构象的变化,表达量的改变,在细胞内分布的变化,磷酸化的强弱以及其结合蛋白的改变都可能成为影响肿瘤、心血官疾病发生发展的重要机制之一。本文就近年来NMHCⅡA主要生理病理功能做一综述。 宋佳希 寇俊萍 余伯阳关键词:血栓 薯蓣皂苷元对白细胞的粘附与迁移及内皮细胞ICAM-1的表达和NF-κB活化的影响(英文) 被引量:4 2012年 目的:探讨薯蓣皂苷元的抗炎活性及其可能机制,为其临床应用提供药理学依据。方法:采用酵母多糖A诱导的小鼠腹膜腔白细胞游走模型,评价薯蓣皂苷元的体内抗炎活性;利用白细胞与肿瘤坏死因子(TNF-α)活化的内皮细胞粘附的实验,验证薯蓣皂苷元的抗炎活性;采用聚合酶链式反应和流式细胞术,考察内皮细胞细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的表达;蛋白印迹法测定细胞核中转录因子NF-κB/p65的表达及细胞裂解液中NF-κB/p65的磷酸化情况,以探讨薯蓣皂苷元抗炎的可能机制。结果:薯蓣皂苷元1,3mg·kg1灌胃给药1次,可显著减少酵母多糖A诱导的小鼠腹腔内白细胞数量;薯蓣皂苷元0.1,1μmol·L1体外加药5h,显著抑制人HL-60细胞与TNF-α活化的ECV304细胞的粘附,但对ECV304细胞活力无明显影响,也不影响HL-60细胞与静息状态ECV304细胞的粘附。同时,薯蓣皂苷元0.1,1μmol·L1明显抑制TNF-α诱导的ECV304细胞ICAM-1mRNA和蛋白的过量表达,1μmol·L1可抑制NF-κB/p65的核转移;薯蓣皂苷元明显减少TNF-α刺激10~30min诱导的NF-κB/p65的磷酸化,并呈一定浓度依赖性。结论:薯蓣皂苷元具有显著抑制白细胞的黏附迁移活性,其部分机制与抑制内皮细胞NF-κB活化,下调ICAM-1的表达有关。 宋佳希 马丽 寇俊萍 余伯阳关键词:薯蓣皂苷元 细胞间粘附因子-1 调节组织因子功能的中药有效成分研究进展 被引量:2 2010年 组织因子(tissue factor,TF)是凝血级联反应的关键启动因子,在生理性止、凝血过程及多种病理性血栓形成、炎症反应、肿瘤血管发生及转移中起关键作用,干预TF途径已经成为心血管疾病治疗的新靶点,并可能为肿瘤、败血症等多种疾病的防治提供新的策略。从中草药中寻找对TF有调节作用的活性成分,对于发现防治TF相关重大疾病的先导化合物继而研制创新药物具有重要意义。综述了近5年的相关研究进展,以供参考。 孙祺 邵方娴 李晶晶 王俊 寇俊萍 余伯阳关键词:中药 创新药物 心血管疾病 基于中药有效成分的防治血栓性疾病的靶标发现 2015年 中药作为中医治则指导下防病治病的重要手段,蕴涵着丰富的理论内涵,其作用特点可能有别于基于现代医学理论的化学药.基于上述思考,课题组综合利用系列亲和色谱技术,识别出麦冬皂苷抗炎抗血栓的活性成分母核- 鲁斯可皂苷元的特异性结合蛋白为非肌肉肌球蛋白重链ⅡA(Non-muscle myosin heavy chainⅡA,NMMHCⅡA),并利用抑制剂和RNA干扰技术和基因过表达技术,在细胞分子与整体动物水平上,证实NMMHCIIA与肿瘤坏死因子受体2相互作用,调节Akt/GSK3β-NF-κB信号通路,调控组织因子表达,参与深静脉血栓的形成;并采用分子对接、亲和色谱、干扰、过表达等多种手段,确证麦冬皂苷D39通过干预NMMHCIIA与肿瘤坏死因子受体2的解离,抑制相关信号通路活化,发挥调节内皮组织因子表达防治静脉血栓的作用.上述研究为静脉血栓的防治提供潜在靶标和可能的候选化合物,也为体现中药特点的中药药理研究提供一定思路和方法借鉴。 寇俊萍 余伯阳关键词:中药药理 血栓性疾病 NF-ΚB信号通路 靶标 RNA干扰技术 鲁斯可皂苷元对小鼠脑缺血缺氧的保护作用 被引量:11 2010年 目的研究鲁斯可皂苷元(Ruscogenin,Rus)对小鼠脑缺血缺氧的保护作用。方法采用小鼠断头致全脑缺血缺氧模型,通过观察小鼠断头呼吸维持时间,考察鲁斯可皂苷元抗脑缺氧活性及其量效时效关系;采用双侧颈总动脉结扎再灌注模型,考察鲁斯可皂苷元对脑组织含水量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及Na+-K+-ATP酶活性、Ca2+-ATP酶活性等生化指标的影响。结果 Rus 3~27 mg/kg灌胃给药1次,可显著延长小鼠断头后呼吸维持时间;给予Rus 9 mg/kg时,1 h即可明显延长小鼠断头后呼吸维持时间,2 h达到作用高峰,保护作用持续到8 h;Rus可明显降低反复缺血再灌注模型小鼠脑含水量,减少脑组织MDA含量,增加SOD活性、Na+-K+-ATPase活性和Ca2+-ATPase活性。结论 Rus在一定剂量范围内,明显改善小鼠脑缺血缺氧损伤,减轻缺血再灌注导致的脑水肿、氧化损伤和能量代谢障碍,具有起效较快,维持时间较长的作用特点。 颜景峰 李金平 寇俊萍 余伯阳关键词:脑缺血 脑缺氧 小鼠 RNA干扰技术抑制人内皮细胞非肌肉肌球蛋白重链ⅡA(MYH9)表达的研究 2008年 目的:构建人MYH9(非肌肉肌球蛋白重链ⅡA)的siRNA表达体系,抑制原代人脐静脉内皮细胞(HUVEC)MYH9基因的表达。方法:针对人MYH9基因序列,构建siRNA表达质粒,通过酶切和测序鉴定确定其序列正确性。分别转染重组质粒pGCsi-MYH9-1/2/3至HUVEC细胞,通过半定量RT-PCR和蛋白质印迹,分别检测在转染后24h、48h、72h MYH9在mRNA转录水平及蛋白表达的变化。结果:在构建的3种重组质粒中,pGCsi-MYH9-2、pGCsi-MYH9-3在转染后24h均表现出一定的干扰作用,转染后48h干扰作用最强,转染后72h干扰作用减弱;pGCsi-MYH9-3的干扰作用最明显,转染后48h,能明显下调HUVEC的MYH9蛋白表达,抑制率平均可达71.2%,此时MYH9基因mRNA转录明显减少,抑制率为86.5%。结论:在转染后48h pGCsi-MYH9-3可明显抑制HUVEC细胞内源MYH9的表达,为进一步研究MYH9在相关疾病中的功能奠定基础。 黄娅琳 寇俊萍 宋佳希 余伯阳关键词:RNA干扰