广东省医学科学技术研究基金(B2012244)
- 作品数:3 被引量:8H指数:2
- 相关作者:夏学颖邹和群张瑛关小倩胡丽莉更多>>
- 相关机构:南方医科大学第三附属医院广东省妇幼保健院中山大学更多>>
- 发文基金:广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- MADPH氧化酶抑制剂对晚期氧化蛋白产物诱导内皮细胞高通透性的影响及机制被引量:2
- 2015年
- 目的:探讨NADPH氧化酶(Nox)抑制剂对晚期氧化蛋白产物(AOPP)刺激下血管内皮的保护作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞进行实验,人血清白蛋白(HSA)作为阴性对照,用不同浓度(50、100和200mg/L)AOPP-HSA共同孵育8 h后,利用5-氯甲基二乙酸荧光素标记人急性单核细胞白血病细胞株THP-1的细胞渗出数量反映内皮细胞的通透性,研究不同浓度AOPP-HSA对单层细胞通透性的影响。此外,另将细胞分为HSA组、AOPP-HSA组和AOPP-HSA+二联苯碘(DPI)组,进而探讨AOPP-HSA对Nox活化水平的影响以及DPI对内皮细胞骨架重构和细胞通透性改变的作用。结果:AOPP-HSA可使血管内皮细胞通透性明显增加(P<0.05)。AOPP-HSA可导致Nox磷酸化水平上升,并呈剂量依赖性。Nox抑制剂DPI预处理组可抑制AOPP-HSA刺激下Nox磷酸化水平的上升,从而抑制血管内皮细胞通透性增加及细胞骨架重构。结论:AOPP-HSA可通过激活Nox导致血管内皮细胞通透性受损,Nox抑制剂DPI可以降低其通透性及细胞骨架重构,起到一定的保护作用。
- 张瑛夏学颖王春筱王晓红邹和群
- 关键词:NADPH氧化酶晚期氧化蛋白产物内皮细胞氧化应激细胞通透性
- 晚期糖基化终产物对脂肪细胞产生活性氧的诱导作用及其机制被引量:2
- 2014年
- 目的观察晚期糖基化终产物(AGEs)对脂肪细胞产生活性氧(ROS)的影响及机制。方法 3T3-L1前脂肪细胞体外培养并诱导分化为成熟的脂肪细胞,以小鼠血清白蛋白(MSA)作为阴性对照,用不同浓度(25、50、100μg/mL)AGEs共同孵育不同时间(0、5、15、30 min及1、3 h)后,荧光探针2',7'-二氯荧光素乙二酯测定细胞ROS生成水平,间接反映ROS的产生量。分别应用酶特异性抑制剂预处理脂肪细胞,观察AGEs-MSA刺激脂肪细胞生成ROS的变化。结果 AGEs能诱导脂肪细胞产生ROS,ROS的产生量随MSA氧化程度的升高和AGEs-MSA浓度的增加而增多。AGEs诱导脂肪细胞产生的超氧阴离子能被NADPH氧化酶的阻断剂DPI和apocynin明显抑制,不能被其他酶的阻断剂所抑制。结论 AGEs能够诱导脂肪细胞产生ROS,其部分机制可能与NADPH氧化酶激活有关。
- 张瑛夏学颖胡丽莉关小倩邹和群
- 关键词:晚期糖基化终产物活性氧NADPH氧化酶脂肪细胞
- 改良酶消化法体外培养人脐静脉内皮细胞被引量:4
- 2012年
- 目的观察改良酶消化法分离、培养人脐静脉内皮细胞(human umbilial vein endothelial cells,HUVECs)的效果,探讨获取高纯度、高活性HUVECs的培养方法。方法采集健康新生儿脐带,应用改良的酶消化法(含0.016%EDTA的0.25%胰蛋白酶)进行HUVECs的分离培养;通过细胞形态学观察及免疫荧光化学鉴定HUVECs及其特异性抗原的表达。结果体外培养的HUVECs细胞形态呈铺路石样,Ⅷ因子相关抗原荧光染色阳性,细胞纯度可达99%。结论通过本实验改良的分离培养方法,可以在体外获得较高数量的HUVECs,在细胞形态、表面抗原标志等方面具内皮细胞特征,可以用于血管内皮细胞模型的构建。
- 张瑛邹和群夏学颖
- 关键词:脐静脉内皮细胞细胞培养抗原表达