广州市科技计划项目(12A62121523)
- 作品数：2 被引量：9H指数：1
- 相关作者：裘宇容潘洁康霞杨春莉冯平锋更多>>
- 相关机构：南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：广州市科技计划项目广东省教育部产学研结合项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- ECLIA、CMIA、ELISA3种方法测定血清抗CCP抗体在RA诊断中的应用被引量：9
- 2014年
- 目的评价电化学发光法(ECLIA)、化学发光法(CMIA)及酶联免疫吸附测定法(ELISA)3种方法测定血清抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体的差异及在类风湿关节炎(RA)诊断中的作用。方法采用ECLIA、CMIA及ELISA测定45例临床确诊的RA患者、34例非RA患者及24例其他患者(包括HBsAg阳性9例、anti-HCV阳性8例、EB-IgA阳性7例)血清中抗CCP抗体水平。结果 3种方法测定所有标本抗CCP抗体阳性率差异无统计学意义(P>0.05),但ELISA与ECLIA及CMIA间的一致性均较差(Kappa<0.75),ECLIA与CMIA间一致性良好(Kappa>0.75),ECLIA灵敏度优于CMIA及ELISA,CMIA特异性优于ECLIA及ELISA。HBsAg、anti-HCV、EB-IgA阳性均可造成ELISA结果假阳性,累计阳性率达33.33%。结论在临床标本抗CCP抗体检测中,ECLIA灵敏度最高,CMIA特异性最好,ECLIA、CMIA优于ELISA,具有重要临床应用价值。
- 康霞李欣杨春莉冯平锋潘洁袁帅裘宇容
- 关键词：电化学发光法化学发光法抗环瓜氨酸肽抗体
- 颗粒型环瓜氨酸肽抗原的制备及条件优化
- 2013年
- 目的探讨颗粒型环瓜氨酸肽抗原的制备方法,并对实验条件进行优化。方法通过碳二亚胺交联法将人工合成的CCP与BSA共价偶联,使偶联产物蛋白大小在70-170KD之间,经紫外吸收光谱鉴定偶联成功。采用碳二亚胺两步法将偶联成功的CCP与BSA复合物又与聚苯乙烯微球偶联,优化偶联条件,根据蛋白偶联量和偶联效率判断偶联效果。结果 (1)BSA与CCP偶联质量比为1∶1,EDC与NHS用量比为2∶3,偶联pH为6.0,BSA与CCP偶联可以达到较好的效果。BSA与CCP偶联产物在70KD-170KD之间,紫外吸收峰有明显左移。(2)微球与偶联蛋白的吸附效率随着EDC用量的增大而增大,当EDC用量达到7.5 mg/ml时,偶联蛋白最大效率达到63.66%。(3)随着偶联时间的延长,蛋白偶联微球的效率不断增加,在偶联时间为0.5-2h内,偶联效率增加最快,当反应时间2h后,反应趋于平衡。(4)对不同偶联反应pH值条件进行筛选,pH为7.5时偶联效果最好,pH7.0-8.0为适宜偶联的pH范围。结论 CCP-BSA偶联产物蛋白与胶乳颗粒偶联,当EDC浓度为7.5mg/ml,偶联时间为2h,反应PH值为7.5,蛋白偶联效率可达到63.66%。
- 付琳裘宇容姜云飞夏佳音王海芳
- 关键词：环瓜氨酸肽
