上海市浦江人才计划项目(10PJD016)
- 作品数：6 被引量：80H指数：3
- 相关作者：王会玲张金元胡伟锋李芮刘楠梅更多>>
- 相关机构：中国人民解放军上海中医药大学解放军第455医院更多>>
- 发文基金：上海市浦江人才计划项目上海市青年科技启明星计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人参总皂苷对体外培养肌管形态及Atrogin-1表达的影响被引量：1
- 2012年
- 目的:慢性肾衰竭(CKD)尤其进入终末期透析的患者常并发以骨骼肌蛋白质-能量消耗为特征的营养不良,研究表明Atrogin-1激活是肌肉蛋白分解的关键步骤。本实验通过培养肌细胞,观察人参总皂苷的干预下,对糖皮质激素作用下肌细胞形态改变及Atrogin-1的表达的影响。方法:培养小鼠肌原细胞C2C12并使之融合成肌管,以不同浓度的地塞米松(0～10μm)和人参总皂苷(100μmol/L)刺激肌管后,镜下观察肌管形态改变,Westernblot检测Atrogin-1蛋白表达水平。结果:糖皮质激素地塞米松作用下,可剂量依赖性地使肌管变细,肌管Atrogin-1蛋白表达水平显著增高;在人参总皂苷干预后,肌管形态较地塞米松组增粗,同时肌管Atrogin-1蛋白降低(P<0.05)。结论:人参总皂苷能够改善地塞米松作用下肌肉消耗,并下调肌管Atrogin-1蛋白表达水平。
- 许烨丁婷婷王会玲张金元
- 关键词：骨骼肌人参皂苷ATROGIN-1
- 糖尿病肾病患者不同分期中医证候特点及证型分布的临床调查被引量：44
- 2016年
- 目的:观察不同分期的糖尿病肾病(DKD)患者中医证候特点及证型分布,为提高DKD中医辨证精准水平提供相关依据。方法:依据纳入标准选择DKD患者,根据尿蛋白定量和肾小球滤过率水平(e GFR)分为3期:即早期DKD、进展期DKD、终末期DKD,收集各期患者主证和兼证的主要临床表现,通过描述性统计研究方法,对不同分期的中医证候特点及证型分布规律进行分析。结果:根据本研究制定的DKD分期标准,发现早期DKD处于微蛋白尿期,肾功能轻度受损,进展期出现临床大量蛋白尿,肾功能处于CKD3B期;终末期则以肾功能严重衰竭为主。三期中医证候分布各有特点:早期DKD以气阴两虚证为主,并可兼杂血瘀证;进展期DKD以脾肾气虚证为主,兼证以血瘀证和水湿盛多见;终末期DKD以脾肾阳虚证为主,并呈血瘀、水湿、痰浊兼杂重症。随着DKD临床蛋白尿水平升高和肾功能损害加剧,中医临床症状积分也随之增多。结论:随着DKD临床蛋白尿水平升高和肾功能损害加剧,不同DKD分期的中医症状出现频次增加、严重程度加剧,辨证分型各有特点。
- 李芮王会玲胡伟锋刘楠梅李燕张金元
- 关键词：糖尿病肾病中医症状脉象
- 小檗碱对糖尿病db／db小鼠骨骼肌蛋白质代谢的影响及机制研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨小檗碱对糖尿病／胰岛素抵抗模型db／db小鼠骨骼肌蛋白质代谢及肌萎缩蛋白Fbox-1（Atrogin-1）表达的影响。方法db／db小鼠为研究对象，以野生型为对照组。予小檗碱（5mg·kg-1·d-1）腹腔注射3周，观察体重和食量；3周末处死，分离胫骨前肌和腓肠肌。胫骨前肌冰冻切片行层黏连蛋白免疫组化染色，荧光显微镜下观察并拍照，测量肌纤维横截面积并计算肌纤维面积分布图；同位素[14C]．苯丙氨酸掺入法检测肌肉蛋白合成，[3H]-酪氨酸释放率分析检测肌肉分解代谢；Northern印迹检测腓肠肌Atrogin-1和肌环指蛋白1（MurF-1）转录水平，Western印迹检测蛋白翻译水平。结果小檗碱能明显降低db／db小鼠血糖水平[（18．55±3．79对26．32±4．02）mmol／L，P〈O．01]，降低脂肪重量[（2．75±0．30对3．77±0．52）g，P〈O．05]，使胫骨前肌的肌重／胫骨长度比值及肌纤维横截面积下降，肌纤维面积分布图明显左移；小檗碱使野生型小鼠和db／db小鼠的蛋白质合成率下降18％～22％；蛋白质分解率升高24％～26％，使肌肉特异性的Atrogin-1、MurF-1转录和翻译水平增高，同时使真核转录因子3调节亚基（eIF3-f）蛋白水平降低。结论小檗碱具有降糖降脂作用，但可引起骨骼肌蛋白质合成下降，促进蛋白质分解代谢，加剧糖尿病的骨骼肌消耗，其机制与上调Atrogin-1和MurF-1表达，同时下调eIF3-f有关。
- 王会玲丁婷婷胡兆永张金元
- 关键词：小檗碱ATROGIN-1
- 小檗碱在高糖及糖基化终末产物诱导足细胞损伤中的保护作用被引量：7
- 2016年
- 目的探讨小檗碱对糖基化终末产物(AGE)和高糖诱导下足细胞损伤及其骨架蛋白的影响及机制。方法以条件永生性人足细胞作为研究对象,于含10%胎牛血清及100 U/Lγ-干扰素的RPMI 1640培养液中进行体外培养,细胞增殖并诱导分化后进行分组处理。分别用高糖(30 mmo/L)、AGE(100μg/ml)、小檗碱(10μmo/L)处理48 h后,激光共聚焦检测技术观察纤维状肌动蛋白(F-actin),球状肌动蛋白(G-actin)变化;原位细胞免疫组化检测cspase-3,nephrin表达。采用SPSS13.0统计软件包进行统计学分析。结果共聚焦显微镜下观察显示,高糖及AGE作用下,足细胞F-actin出现重排,G-actin易位,小檗碱干预后有所恢复。免疫组化结果显示,对照组及高糖组几乎未见capase-3阳性表达,但高糖+AGE组,capase-3呈阳性表达(F=99.339,P<0.001);高糖+AGE组nephrin表达显著降低(F=165.84,P<0.001),与对照组及高糖组比较,差异均有统计学意义。小檗碱作用后,高糖+AGE组capase-3的水平下降(F=6.927,P=0.048),nephrin表达水平升高(F=165.84,P=0.025),差异均有统计学意义。结论在持续的高糖和AGE作用下,可引起足细胞骨架蛋白F-actin、G-actin重构及分布异常,并诱导足细胞凋亡,小檗碱能改善高糖和AGE引起的足细胞骨架蛋白损伤,并抑制足细胞的凋亡,其机制可能与nephrin的参与有关。
- 李芮王会玲刘楠梅胡伟锋徐凯
- 关键词：足细胞糖基化终末产物小檗碱
- 小檗碱影响AMPK/PGC-1信号途径改善糖尿病胰岛素抵抗和线粒体功能的研究被引量：26
- 2014年
- 目的探讨小檗碱改善糖尿病鼠糖代谢及胰岛素抵抗作用及对骨骼肌线粒体功能的影响和机制。方法采用db/db小鼠为研究对象,以野生型小鼠为对照组。给予小檗碱(5 mg·kg-1·d-1)腹腔注射3周,观察食量、体重和空腹血糖水平;第3周末处死,留取血标本分离血清,检测胰岛素水平并计算胰岛敏感指数,留取附睾脂肪垫并称重;提取腓肠肌线粒体,检测细胞色素C氧化酶活性和ATP定量,Western blot检测腓肠肌AMPK/PGC-1α表达。结果小檗碱给药3周后,db/db小鼠的体重和脂肪垫重量均显著降低,血糖水平下降,胰岛素敏感指数改善;但给药前后的胰岛素释放水平无明显改变。小檗碱可一定程度地升高骨骼肌线粒体COX活性水平,明显提高ATP含量,并使AMPK磷酸化水平显著激活,PGC-1α转录活性增强。结论小檗碱具有明显的降糖、降脂、改善胰岛素抵抗作用,其降糖作用与刺激胰岛素释放水平无关,而与激活AMPK/PGC-1α信号途径,提高线粒体能量代谢有关。
- 王会玲李燕胡伟锋田军张金元
- 关键词：小檗碱糖尿病线粒体胰岛素抵抗AMPK
- 高糖及糖基化终末产物对肾小管上皮细胞转分化的影响及小檗碱的干预被引量：2
- 2016年
- 目的:探讨小檗碱对糖基化终末产物(advanced glycation end product,AGE)和高糖诱导下肾小管上皮细胞转分化的影响及机制。方法:人肾小管上皮细胞株(HK-2细胞)于含10%胎牛血清的D-MEM/F12培养基中进行体外培养。细胞增殖达到70%左右,换无血清培养液继续培养12 h后,进行分组处理。分别用高糖(30 mmol)、AGE(100μg/ml)、小檗碱(10μmol)处理48 h后,倒置显微镜下观察细胞形态,原位细胞免疫组化检测AGE受体(RAGE)、α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,Western blot检测RAGE、α-SMA、转化生长因子(TGF-β1)的蛋白翻译水平。结果:经高糖刺激细胞48 h后,细胞体积逐渐变大,形态变为长梭形,排列紊乱,少部分细胞脱落,高糖+AGE组细胞形态与高糖组相似;小檗碱干预后,细胞形态改变较少见,排列紊乱现象较轻微。免疫组化结果显示对照组及高糖组几乎未见RAGE阳性表达,但高糖+AGE组RAGE呈强阳性表达,Col-Ⅰ和α-SMA显著升高。小檗碱干预后可抑制细胞肥大,并使RAGE和α-SMA的水平有一定下降,同时Col-Ⅰ也有所降低;蛋白印迹法分析显示高糖和AGE可使RAGE蛋白表达显著上调,并刺激TGF-β1表达水平升高,小檗碱可抑制RAGE、TGF-β1的蛋白表达。结论:持续的高糖和AGE作用下可引起肾小管上皮细胞肥大,促进细胞外基质合成,并诱导肾小管上皮细胞转分化。小檗碱能改善高糖和AGE引起的细胞肥大和胶原蛋白合成,抑制肾小管上皮细胞转分化,其机制与下调RAGE,抑制TGF-β1表达有关。
- 李芮王会玲胡伟锋刘楠梅徐凯张金元
- 关键词：肾小管上皮细胞糖基化终末产物小檗碱
