国家自然科学基金(30070368)
- 作品数：15 被引量：234H指数：8
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- 相关机构：中国人民解放军第一军医大学潍坊医学院南方医科大学更多>>
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- 人骨形态发生蛋白12前体蛋白cDNA的克隆及序列分析被引量：1
- 2004年
- 目的克隆人骨形态发生蛋白12前体蛋白的基因。方法根据Genbank人骨形态发生蛋白12的基因序列合成两条引物,从人胎盘组织中提取总RNA,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术扩增出长920 bp编码人骨形态发生蛋白12(BMP12)前体蛋白的基因序列。将所得的基因片段插入载体pTARGETTM质粒中并转化大肠杆菌JM109,提取重组质粒进行鉴定并测序。结果RT-PCR产物琼脂糖凝胶电泳显示一长约920 bp的条带,阳性克隆质粒经PCR扩增出约920 bp的片段,全自动DNA测序结果表明和Genbank中的序列完全相符。结论通过RT-PCR可从人胎盘组织中成功地克隆出人BMP12前体蛋白基因,基因序列完全正确。
- 路艳蒙付文玉朴英杰
- 关键词：前体蛋白CDNA克隆
- 多核巨细胞在人发生物材料降解中的超微观察被引量：1
- 2008年
- 目的:在超微结构水平观察人发生物材料修复周围神经缺损过程中自身的降解与多核巨细胞的关系。方法:制备SD大鼠坐骨神经缺损模型,用人发生物材料来桥接缺损的坐骨神经,电镜观察巨噬细胞与多核巨细胞对降解的人发生物材料吞噬消化过程。结果:术后3周,巨噬细胞聚集在人发周围,毛小皮已经开始剥脱断裂;6周时,人发周围出现由多个巨噬细胞融合形成的多核巨细胞,均质状的崩解颗粒及部分毛小皮碎片被巨噬细胞吞噬;12周时,有些皮质颗粒已降解为角蛋白细丝,巨噬细胞内含有大量颗粒。结论:在人发生物材料的降解过程中,多核巨细胞作为屏障隔离了材料和宿主组织细胞,毛小皮断裂的碎片和疏松的皮质颗粒,被巨噬细胞所吞噬,然后在大量溶酶体酶的水解下,完成对人发生物材料的清除。
- 路艳蒙周志涛朴英杰
- 关键词：生物材料巨噬细胞多核巨细胞
- 人胚胎骨髓间充质干细胞的初步培养及鉴定被引量：10
- 2001年
- 目的分离培养并鉴定人胚胎骨髓间充质干细胞。方法抽取流产胎儿股骨骨髓，梯度离心，取含有骨髓间充质干细胞的低密度血小板层进行培养；免疫细胞化学法鉴定细胞膜抗原；酶细胞化学法测定细胞碱性磷酸酶活性。结果培养的细胞呈现纺锤形外观；细胞膜抗原CD29、CD44有阳性表达，CD34、CD45呈阴性表达；碱性磷酸酶检测呈阴性反应。结论培养的细胞不是骨髓中的造血干细胞，是处于未分化阶段的骨髓间充质干细胞。
- 路艳蒙傅文玉朴英杰
- 关键词：间充质干细胞骨髓免疫细胞化学酶细胞化学
- 人骨髓间充质干细胞的培养及多能性研究被引量：85
- 2002年
- 目的 培养人骨髓间充质干细胞 (mesenchymalstemcells,MSC)并检测其多能性。方法 抽取人胚胎股骨骨髓 ,Percoll分离液梯度分离后 ,将含MSC的低密度层培养于MSCGM培养基并扩增MSC。将MSC种植于裸鼠皮下 ,4周后观察MSC的分化情况。结果 成功地进行了人MSC的原代和传代培养。植入裸鼠体内后MSC可分化成骨、软骨、脂肪、骨骼肌、肌腱样组织等结构。
- 傅文玉路艳蒙朴英杰
- 关键词：间充质干细胞细胞培养细胞分化骨髓
- 大鼠骨髓间质干细胞的培养及表型特征被引量：8
- 2002年
- 目的 :分离培养大鼠骨髓间质干细胞 ,观察生长特性并检测某些表型特征 ,为进一步研究其分化提供实验基础。方法 :活体抽取成鼠骨髓 ,分离骨髓间质干细胞 ,进行形态学观察和免疫细胞化学鉴定。结果 :分离细胞体外培养呈梭形 ,7代以前增殖速度较快 ;免疫细胞化学染色显示细胞表达CD2 9、CD44和Fibronectin ,但不表达CD3 4、CD45、CollagenⅡ和Laminin。结论 :培养的细胞是骨髓间质干细胞 ;在体外培养条件下 ,早期生长性状稳定 ,可作为组织工程的种子细胞。
- 李佩英路艳蒙傅文玉朴英杰
- 关键词：免疫细胞化学骨髓间质干细胞表型特征
- 重症休克时平滑肌细胞内的钙动力学变化被引量：1
- 2004年
- 使用荧光比率方法研究血管平滑肌细胞钙动力学变化在重症休克血管反应性降低中的作用.复制SD大鼠失血性休克模型,分离肠系膜细动脉血管平滑肌(ASMC),使用荧光探针Fluo-3/AM、FuraRed双标记比率方法结合激光扫描共聚焦显微成像技术测定单个平滑肌细胞钙动力学变化,观察ATP敏感钾通道(KATP)特异性阻滞剂优降糖对血管反应性和钙动力学影响.实验结果发现休克后2h(失代偿期),血管反应性明显降低,norepinephrine作用带来的平滑肌细胞内钙离子浓度升高的程度明显减弱;加入优降糖可明显提高NE对平滑肌细胞内钙离子的升高作用,改善细动脉对NE的反应性,带来血管反应性部分恢复.
- 王水云马晓冬晏芳郑昌东
- 关键词：血管反应性钙离子
- 人骨髓间充质干细胞的分化与端粒酶活性被引量：51
- 2001年
- 目的 研究人骨瞩间充质干细胞（Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ，ＭＳＣｓ）的分化特性及其端粒酶活性。方法 取人胚胎股 骨骨瞩，分离、培养、扩增ＭＳＣｓ，原位杂交法检测ＭＳＣｓ的端粒酶活性。将ＭＳＣｓ种植于裸鼠皮下，４周后观察ＭＳＣｓ的 分化情况。结果人 ＭＳＣｓ呈端粒酶反应阳性。植入裸鼠体内后可分化成骨、软骨、脂肪、骨骼肌、肌腱样组织和无髓神经 纤维束样结构。结论人ＭＳＣｓ是一种具有多向分化能力的干细胞，具有较高的端粒酶活性。
- 傅文玉路艳蒙朴英杰
- 关键词：间充质干细胞细胞分化端粒酶骨髓MSCS骨髓细胞移植
- 间充质干细胞与人发角蛋白人工腱联合培养的形态学被引量：1
- 2003年
- 目的:研究培养的人骨髓间充质干细胞(MSCs)与人发角蛋白(HHK)人工腱的相容性以及MSCs在HHK上的生长情况。方法:人MSCs与HHK人工腱联合培养后,分别在倒置显微镜及扫描电镜和透射电镜下观察MSCs的生长状态和超微结构。结果:MSCs在光镜下呈单层或多层贴附于HHK人工腱表面,扫描电镜下呈细长梭形,有的呈扁平多角形,其生长方向与HHK人工腱长轴相一致。透射电镜下可见静息态和活动态两种不同功能状态。结论:MSCs与HHK人工腱之间有极好的粘附性和相容性,是一种理想的组织工程种子细胞。
- 付文玉路艳蒙朴英杰安连兵乔东访
- 关键词：间充质干细胞人发角蛋白人工腱形态学骨髓
- 体外培养兔骨髓间充质干细胞的超微结构观察
- 乔东访路艳蒙傅文玉朴英杰
- 文献传递
- 多核巨细胞在人发生物材料降解中的超微观察
- 目的:在超微结构水平观察人发生物材料修复周围神经缺损过程中自身的降解与多核巨细胞的关系。方法:制备 SD 大鼠坐骨神经缺损10mm 的动物模型,用人发生物材料来桥接缺损的坐骨神经,术后第3、6、12周取材,利用透射电镜观...
- 路艳蒙周志涛朴英杰
- 文献传递
