山东省自然科学基金(Y2007C150)
- 作品数:3 被引量:0H指数:0
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- pIRES-IL-24对Bel-7402肝癌细胞抑制的实验研究
- 2010年
- 目的:观察白细胞介素-24(IL-24)基因对肝癌细胞系Bel-7402生长的抑制作用,为肝癌的基因治疗提供理论基础。方法:将真核分泌表达载体pIRES-IL-24转染肝癌细胞系Bel-7402。RT-PCR检测IL-24基因的表达,蛋白质印迹法及ELISA检测IL-24蛋白的表达,MTT法检测IL-24对肝癌细胞的生长抑制和杀伤作用,流式细胞仪检测细胞的凋亡和细胞周期。结果:pIRES-IL-24能够在Bel-7402中高效表达。细胞培养上清液中IL-24蛋白表达浓度为124.1 ng/mL。IL-24能明显抑制Bel-7402肝癌细胞的生长,转染后第4天抑制率为46.3%,与对照组比较,P<0.05。IL-24促进肝癌细胞的凋亡,凋亡率41.0%,与对照组比较,P<0.05。细胞周期分析显示,IL-24阻滞肝癌细胞在G2/M期。结论:重组表达载体pIRES-IL-24介导IL-24基因在人肝癌细胞中高效表达,可杀伤肝癌细胞Bel-7402,促进细胞增殖阻滞及诱导肿瘤细胞凋亡。
- 韩建军薛德文刘吉兵吴会勇丛宁谢印发李胜
- 关键词:白细胞介素类
- 肝细胞癌介入栓塞前后血管内皮生长因子和内皮抑素的变化与预后的关系
- 2010年
- 目的 探讨肝细胞癌患者肝动脉化疗栓塞术(TACE)前后血管内皮生长因子(VEGF)和内皮抑素(ES)变化规律与预后的关系.方法 酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测患者TACE术前及术后1周血清VEGF和ES水平.结果 肿瘤直径≥5 cm的患者,ES在治疗前后分别为(43.35±9.80)ng/ml、(48.35±10.89)ng/ml;VEGF分别为(310.23±64.31)ng/ml、(369.10±60.11)ng/ml.肿瘤伴有门静脉癌栓的患者ES在治疗前后分别为(54.28±8.78)ng/ml、(50.28±7.51)ng/ml;VEGF分别为(331.26±63.38)ng/ml、(400.29±60.98)ng/ml.VEGF和ES水平与肿瘤大小、门静脉癌栓以及临床分期密切相关(P<0.05).肝细胞癌患者临床分期越晚,TACE前、后VEGF和ES水平均越高.晚期肝癌患者VEGF/ES比值明显高于早期患者.VEGF/ES比值越低生存时间越长.结论 VEGF、ES、VEGF/ES比值可作为预测肝细胞癌治疗效果的指标.
- 薛德文韩建军刘吉兵吴会勇谢印发李胜
- 关键词:肝肿瘤血管内皮生长因子类内皮抑素类
- 真核双基因表达载体pIRES-IL-24-ES的构建与鉴定
- 2010年
- 目的构建白介素24(IL-24)与内皮抑素(ES)的真核双基因表达载体,检测它们在体外的表达。方法从外周血和人胎肝组织中经RT-PCR分别扩增IL-24与EScDNA序列,并将其定向克隆至真核双基因表达质粒pIRES中,重组质粒pIRES-IL-24-ES,经酶切及测序鉴定后,转染NIH3T3成纤维细胞。经RT-PCR及ELISA法检测IL-24和ES在NIH3T3中的表达。结果重组真核双基因表达载体pIRES-IL-24-ES构建成功,IL-24与ES可在NIH3T3细胞中有效表达。结论真核双基因表达载体pIRES-IL-24-ES成功构建为研究肿瘤的基因治疗提供了一定线索。
- 韩建军胡三元智绪亭梁晓红薛德文
- 关键词:内皮抑素分泌表达载体