广东省科技计划工业攻关项目(2004A20105001)
- 作品数：3 被引量：34H指数：3
- 相关作者：张勇林浩然刘晓春马细兰黄卫人更多>>
- 相关机构：中山大学上海海洋大学惠州学院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目珠海市软科学研究计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 荧光实时定量PCR检测尼罗罗非鱼GH、GHR、IGF-Ⅰ基因方法的建立及初步应用被引量：7
- 2009年
- 为了准确分析尼罗罗非鱼生长激素(growth hormone,GH)、生长激素受体(growth hormone receptors,GHRs)和胰岛素样生长因子I(Insulin-like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)在早期发育阶段的作用,实验设计了尼罗罗非鱼GH、GHR、IGF-Ⅰ基因的特异性引物,提取垂体或肝脏总RNA并扩增出目的片段,将PCR产物克隆到pGEM-TEasy载体,经质粒PCR扩增、酶切和测序鉴定重组质粒,构建标准曲线等,成功建立了GH、GHR、IGF-Ⅰ基因荧光实时定量PCR检测方法。运用建立的荧光实时定量PCR检测了尼罗罗非鱼GH、GHR和IGF-Ⅰ基因表达的发育性变化。结果表明在早期发育阶段,尼罗罗非鱼GH与IGF-Ⅰ,GHR1与GHR2的mRNA表达存在一定的互补关系;GH的表达与GHR1的表达呈显著正相关,提示GH与IGF-Ⅰ,GHR1与GHR2在尼罗罗非鱼早期发育的不同阶段起主导作用,且GH可能主要通过与GHR1的结合起作用。
- 马细兰易诗白张勇李云黄卫人刘晓春林浩然
- 关键词：尼罗罗非鱼GHGHR发育性变化
- 尼罗罗非鱼生长激素及其受体的cDNA克隆与mRNA表达的雌雄差异被引量：24
- 2006年
- 尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)雌雄鱼生长差异明显,为了探讨其原因,本文采用RT-PCR方法克隆了尼罗罗非鱼生长激素(Growthhormone,GH)及其受体(Growth hormone receptor,GHR)的cDNA序列,并应用半定量RT-PCR方法比较了雌、雄尼罗罗非鱼垂体GHmRNA、肝脏GHRmRNA、肌肉GHRmRNA的表达差异。序列分析表明:GH开放阅读框为615bp,共编码204个氨基酸;GHR开放阅读框为1908bp,共编码635个氨基酸。以RT-PCR方法研究了GH、GHR在各组织的分布情况,结果表明:GH仅在垂体中检测到有表达,而GHR在所检测的18种组织中均有表达,其中以肝脏、肌肉、性腺、下丘脑、胸腺表达量较高。以半定量RT-PCR方法进一步比较了雌、雄尼罗罗非鱼垂体GHmRNA、肝脏GHRmRNA、肌肉GHRmRNA的表达量,结果表明:雄鱼垂体GHmRNA和肝脏GHRmRNA的表达量均显著高于雌鱼,肌肉GHRmRNA的表达量则无显著差异,推测垂体GHmRNA和肝脏GHRmRNA表达的雌雄差异是尼罗罗非鱼雌雄生长差异的主要原因之一。
- 马细兰张勇黄卫人刘晓春林浩然叶卫
- 关键词：尼罗罗非鱼生长激素生长激素受体
- 温度调控诱导尼罗罗非鱼仔鱼雄性化的研究被引量：3
- 2013年
- 罗非鱼Oreochromis spp.是我国重要的水产养殖品种。我国是世界最大的罗非鱼生产国和出口国。但罗非鱼性成熟早、繁殖过度,致使商品鱼品质偏低、资源浪费严重,解决途径为采用单雄性养殖。本文进行了温度调控诱导尼罗罗非鱼仔鱼雄性化的研究。较之前常采用的雄激素投喂方式更环保、安全、高效。控温处理开始时期为出膜后第7天(DPH,Days Post Hactching),进行正交试验:设置3个温度20、28、36℃(±0.5℃),3个控温时段7-14 DPH、7-21 DPH、7-28 DPH。主要结果如下:处理组合(温度+控温时段)为36℃+7-14 DPH、36℃+7-21 DPH、36℃+7-28 DPH时雄性率较对照组显著增高、与其它各组有显著差异(P<0.05),分别高达93.85%、96.00%和96.92%,这3组间无显著差异(P>0.05)。为了解控温对仔鱼的影响,还同步研究了相应的增质量率和存活率。由控温时段结束至60 DPH的绝对增质量率来看:处理组合36℃+7-14 DPH、28℃+7-14 DPH与对照组无显著差异(P>0.05);从存活率来看:只有处理组合20℃+7-21 DPH、20℃+7-28 DPH与对照组有显著差异(P<0.05)。综合来看,最佳处理组合为36℃+7-14 DPH,平均雄性率93.85%、最高达96.96%,且高温(36℃)处理后生长和存活不受影响。
- 陈兴汉刘晓春蒙子宁张勇叶卫林浩然
- 关键词：尼罗罗非鱼仔鱼温度调控雄性化
