黑龙江省自然科学基金(D2004-05)
- 作品数：4 被引量：12H指数：2
- 相关作者：周宏博邹朝霞张春晶于海涛董钦更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学齐齐哈尔医学院清华大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金黑龙江省卫生厅科研项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 人谷氧还蛋白1基因克隆及真核表达载体的构建被引量：2
- 2006年
- 目的从ECV304细胞中克隆谷氧还蛋白1(glutaredoxin1,Grx1)的cDNA序列并构建真核表达载体pcD-NA3.1(+)-Grx1。方法利用Trizol一步法从ECV304细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术从中获得Grx1的cD-NA,将质粒pcDNA3.1(+)进行双酶切、CIP处理并回收纯化,与纯化后的Grx1cDNA连接构成重组表达载体pcD-NA3.1(+)-Grx1,转化大肠杆菌JM109,筛选阳性克隆鉴定并进行测序分析。结果经RT-PCR和测序鉴定,成功地克隆了人Grx1cDNA。结论从ECV304细胞中获得Grx1的cDNA,成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(+)-Grx1,对Grx1在体外表达、进一步研究其在氧化应激中的作用及其作用机制具有重要意义。
- 邹朝霞张春晶吴丽芳刘莹莹房绍红周宏博
- 关键词：基因克隆真核表达
- 谷氧还蛋白的生物学活性及其与人类疾病的关系被引量：8
- 2006年
- 谷氧还蛋白(glutaredoxin,Grx),又称巯基转移酶(thioltransferase,TTase),是巯基-二硫键氧化还原酶家族的重要组分。Grx最早由Holmgren发现,在生物界普遍存在,是一种依赖谷胱甘肽(GSH)催化氧化状态的蛋白质二硫键还原为巯基,修复蛋白质活性的小分子酶蛋白。它具有多种生物学活性,在调节机体的氧化还原反应和细胞生长、抑制凋亡方面起重要作用,与人类某些疾病,如心脑血管疾病、白内障、糖尿病、AIDS、自身免疫性疾病、肿瘤和感染等的发生、发展,以及干预治疗有关。
- 张春晶于海涛邹朝霞董钦周宏博
- 关键词：谷氧还蛋白氧化应激抗氧化
- 谷胱甘肽化修饰与氧化还原信号转导被引量：4
- 2007年
- 蛋白质谷胱甘肽化(S-glutathionylation)是一种重要的翻译后修饰方式,氧化还原信号转导途径的很多相关分子都可受到谷胱甘肽化的调节,尤其是一些重要的蛋白激酶和转录因子。因此蛋白质的谷胱甘肽化修饰日益引起人们的重视。人们推测,谷胱甘肽化可能是细胞内氧化还原信号转导的一种重要机制。
- 邹朝霞周宏博高旭
- 关键词：磷酸化转录因子
- PC12细胞谷胱甘肽二硫键氧化还原酶cDNA的克隆表达与序列分析
- 2005年
- 目的获得PC12细胞谷胱甘肽二硫键氧化还原酶全长cDNA及表达的蛋白质,分析比较该cDNA及外推的蛋白质序列。方法用逆转录PCR(RT鄄PCR)获得该蛋白cDNA并将其分别克隆和亚克隆于PUC18和PQE31载体,受体细胞为BL21。亲和层析分离重组蛋白,SDS电泳分析表达产物。结果PC12细胞谷胱甘肽二硫键氧化还原酶全长cDNA含324个碱基,编码含107个氨基酸的蛋白质,并与小鼠和人的该序列有高度同源性,获得了具有活性的谷胱甘肽二硫键氧化还原酶。结论构建了PC12细胞谷胱甘肽二硫键氧化还原酶cDNA在大肠杆菌细胞的克隆表达体系;测定了该蛋白cDNA序列并推导出它的氨基酸排列顺序;证明了该蛋白与人和小鼠具有高度同源性。
- 杨歌德周宏博刘长振王爱民
- 关键词：谷胱甘肽PC12细胞蛋白C全长CDNA氧化还原酶克隆表达
