国家自然科学基金(30872025)
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
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- 相关机构：中国林业科学研究院中国检验检疫科学研究院天津出入境检验检疫局更多>>
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- 泡桐丛枝植原体胸苷酸激酶基因的克隆及序列分析
- 胸苷酸激酶(thymidylate,dTMP kinase or TMK),国际系统命名为:EC2.4.7.9,广泛存在于细菌、病毒和哺乳动物中,在ATP和Mg~(2+)参与的条件下,催化磷酰基从ATP转移到dTMP形成...
- 宋传生胡佳续林彩丽耿显胜田国忠
- 苦楝丛枝植原体质粒的测定与分子特征被引量：4
- 2011年
- 【目的】测定苦楝丛枝植原体(CWB植原体)质粒并分析其分子特征。【方法】扩增苦楝丛枝植原体质粒片段并进行系统进化分析,预测质粒编码蛋白的跨膜区、亚细胞定位;以质粒pCWBFq repA为模板制备探针,利用Southern blot方法检测苦楝丛枝植原体及其他几种植原体的质粒。【结果】测定了苦楝丛枝植原体福清株系的一个质粒pCWBFq,该质粒全长4446 bp,A+T含量为73.5%,编码6个蛋白,其中pCWBFq P2-P5五个编码蛋白分别含有3、2、1和2个跨膜区,其信号肽(Singnal Peptide,SP)信号值分别为0.989、0.505、0.918和0.914。氨基酸序列相似性比较表明:pCWBFq RepA蛋白与其他植原体质粒RepA的同源性在9.6%-85.6%之间,而pCWBFq SSB蛋白与其他植原体质粒SSB的同源性在74.0%-89.4%之间。用pCWBFq repA探针检测到苦楝丛枝植原体中质粒的存在,同时也能够检测到16SrI组的泡桐丛枝植原体(PaWBNy),海南长春花绿变植原体(PeVHn),苦楝丛枝植原体福州株系(CWBFz)和桑树萎缩植原体濮阳株系(MDPy)中的质粒,但16SrV组的枣疯植原体北京株系(JWBBj)、樱桃致死黄化西昌株系(CLYXc)和重阳木丛枝南昌株系(BiWBNc)中未能检测到任何杂交信号。【结论】苦楝丛枝植原体质粒pCWBFq编码的6个蛋白中,除与质粒复制有关的RepA和SSB外,另外4个均为含有疏水结构的分泌蛋白或膜蛋白。植原体质粒的同源基因间存在程度不同的变异,其中repA基因在所有植原体质粒上均存在,但变异性相对较大,而ssb基因仅存在于16SrI组植原体质粒中,且变异相对较小。16SrI组的CWBFq、PaWBNy、PeVHn、CWBFz和MDPy中均存在数量和大小不同的质粒,而16SrV组的JWBBj、CLYXc和BiWBNc中或含有的质粒因与pCWBFq repA探针的同源性较低而不能被检测到。
- 宋传生林彩丽田国忠赵文军朱水芳牟海青胡佳续王曦茁郭民伟
- 关键词：质粒系统进化DNA杂交
- 植原体病害诊断与病原检测和鉴定技术与方法评价
- 本文就当前植原体病害的诊断、病原检测和鉴定的技术与方法进行了系统的评估和分析,主要包括病害症状鉴别诊断、电子显微镜观察病原形态、抗生素处理、嫁接传病和介体昆虫传病、组织学和生物化学技术、植原体抗体制备与血清学测定技术、核...
- 田国忠赵文军朱水芳林彩丽宋传生牟海青胡佳续
- 文献传递
- 泡桐丛枝植原体侵染的泡桐组培苗酵母双杂交cDNA文库的构建
- 由植原体引起的泡桐丛枝病分布于整个泡桐栽培区,遍及全国各地。泡桐丛枝病的发生使泡桐的长势减弱,导致木材质量下降,严重时导致病株死亡。植原体具有多型性,形态大小约为80～1000nm,基因组大小为500～1300kb之间,...
- 郭颂林彩丽周涛田国忠范在丰
- 文献传递
- 四种植物植原体病害病原质粒全序列测定及分子特征
- 根据已发表植原体质粒序列设计引物,经两次PCR扩增,获得大小不同的两段DNA片段,测序后拼接得到了4个完整的环状质粒,分别是桑树萎缩植原体濮阳株系质粒(pMDPy)、长春花绿变植原体海南株系质粒(pPeVHn)、泡桐丛枝...
- 胡佳续宋传生林彩丽耿显胜田国忠
- 实时定量PCR检测樱桃黄化致死植原体含量
- ＜正＞由植原体引起的樱桃致死黄化病害首先在四川西昌发现,根据16S rRNA基因序列将其划分为组榆树黄化组（16S rV）。樱桃感染植原体后,产生叶片黄化、丛枝,开花推迟,果实小而少,不成熟,发病3～4年后全株枯死,造成...
- 林彩丽宋传生胡佳续赵文军朱水芳牟海青田国忠
- 文献传递
- 泡桐丛枝植原体质粒膜蛋白p19与泡桐互作蛋白的筛选
- ＜正＞泡桐丛枝病是最早发现由植原体引起的病害之一,植原体是寄生于植物韧皮部筛管细胞缺乏细胞壁的原核微生物。质粒作为能够移动的复制子广泛存在于细菌和真核生物细胞,质粒编码的基因对寄主菌来说并非所必需但通常对寄主菌的生长有很...
- 林彩丽郭颂胡佳续宋传生耿显胜周涛范在丰田国忠
- 文献传递
- 泡桐丛枝植原体胸苷酸激酶的原核表达、纯化及酶活性测定被引量：3
- 2014年
- 胸苷酸激酶是d TTP从头合成和补救途径的关键酶,催化d TMP形成d TDP,在DNA复制和生物的生存中发挥着必不可少的作用。本文在前期研究的基础上,对从泡桐丛枝(Pa WB)植原体中获得的的3个同源蛋白TMK-a-1、TMK-a-2及TMK-b与已报道的小麦蓝矮(WBD)、洋葱黄化(OY-W)植原体的TMK-a、TMK-b的氨基酸序列进行了比对和相似性分析,结果显示Pa WBPS TMK-b与WBD TMK-2和OY-W TMK-b之间的相似性分别为95.65%和99.03%;Pa WBPS TMK-a-1与Pa WBPS TMK-a-2的相似性为90.57%,且二者与WBD TMK-1和OY-W TMK-a之间的相似性为87.32%-94.26%;而Pa WBPS、WBD、OY-W三种植原体的TMK-a与TMK-b之间的相似性仅为22.22%-25.95%。构建了Pa WBPS TMK-b、TMK-a-1、TMK-a-2的p ET28a原核表达载体,对Pa WBPS TMK-b、TMK-a-1、TMK-a-2 3种蛋白进行了原核表达,经Ni-NTA柱纯化后,利用双酶法进行了胸苷酸激酶催化活性测定,结果表明,Pa WBPS TMK-b具有较高的胸苷酸激酶活性,为85.96±0.74 U·mg-1,而Pa WBPS TMK-a-1和TMK-a-2几乎没有胸苷酸激酶活性。本文为进一步研究胸苷酸激酶在植原体繁殖过程中的作用机理奠定了基础。
- 宋传生胡佳续林彩丽任争光耿显胜田国忠
- 关键词：原核表达酶活性
- 用泡桐丛枝植原体质粒pPaWBNy-10RF4蛋白抗血清测定几种植原体的血清学关系
- 植原体(phytoplasma)是一类无细胞壁的原核微生物,属柔膜菌纲(Mollicutes),寄生于植物韧皮部筛管内,主要由叶蝉等刺吸式昆虫传播。目前国际上对植原体鉴定分类的重要依据是保守基因16SrDNA。Lee等(...
- 宋传生林彩丽田国忠赵文军朱水芳胡佳续牟海青
- 文献传递
- 泡桐丛枝植原体miaA基因序列和多样性分析及原核表达
- 本研究根据已经公布的洋葱黄化植原体全基因组序列设计引物(iptf-bamH1/iptr-sall),用PCR方法从泡桐丛枝植原体(NY株系)中扩增并克隆了tRNA-异戊烯基焦磷酸转移酶基因miaA,序列分析表明miaA基...
- 胡佳续林彩丽郭颂周涛范在丰宋传生耿显胜田国忠
