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黑龙江省自然科学基金(zjy060102)
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
相关作者:
单蕾
李用国
兰英华
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张莹
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相关机构:
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乙型肝炎病毒在造血干细胞内复制及对其免疫活性的影响
被引量:1
2010年
目的研究不同载量HBV感染脐血来源的CD34+造血干细胞(HSC)的一般规律,以及探讨HBV感染HSC后诱生的树突状细胞(DC)的功能状态。方法无菌条件下采集脐血,磁珠分离仪分离纯化CD34+HSC。把CD34+HSC分为HBV感染组及对照组,用免疫组织化学及原位杂交方法检测HSC内病毒感染情况。分3组将HSC接种于24孔板连续培养12d,各组分别加入细胞因子组合及不同病毒载量HBV(A组1×10^7拷贝/mL,B组1×10^5拷贝/mL,c组1×10^3拷贝/mL)的血清,于培养的0、1、6、12d检测各组细胞数,上清液及细胞中HBVDNA拷贝数。用两步法诱生的DC作为刺激细胞,以异基因健康者外周血T淋巴细胞作为反应细胞,噻唑蓝比色法检测DC对同种异体T淋巴细胞的刺激增殖作用。组间比较采用t检验。结果免疫组织化学检测结果显示,HBV感染12d的HSC中可检测到HBsAg的表达,而未感染的HSC中无HBsAg阳性细胞。原位杂交检测结果显示,HBV感染12d的HSC中可检测到HBVDNA,未感染的HSC中无阳性细胞。C组第1天的细胞增殖与A、B组比较无明显差异,第6、12天细胞增殖高于A、B组,且第6天的细胞计数差异有统计学意义(t=5.125,t=6.327;均P〈0.05)。在第12天A组细胞内可检出1×10。拷贝/mLHBVDNA,B组可检出1×10^3拷贝/mL,C组则12d内均不能检出。上清液检出情况与细胞内相符。混合淋巴细胞反应显示HBV感染组诱生的DC对同种异体T淋巴细胞刺激增殖作用明显低于对照组,且差异有统计学意义(在DC与T淋巴细胞的比例达到0.05时,t=3.156,P〈0.05;在比例达到0.1、0.5时,t=4.873,t=5.103,均P〈0.01)。结论HBV可以在CD34’HSC内复制并随HSC扩增而同步增加。HBV感染的HSC诱生的DC对同种异体T淋巴细胞刺激增殖能力减低,即HBV感染HSC后其分化的免疫细胞的生物活性降低。
单蕾
兰英华
石艳梅
张莹
李用国
关键词:
乙型
树突细胞
病毒载量
CD34
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