国家自然科学基金(30370977) 作品数:13 被引量:221 H指数:6 相关作者: 程智慧 孟焕文 吴正景 董志刚 高芸 更多>> 相关机构: 西北农林科技大学 河南科技大学 湖州市农业科学研究院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技重大专项 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
番茄叶片液泡转化酶基因植物反义表达载体的构建与瞬时表达 被引量:2 2007年 在分析植物液泡转化酶基因保守区序列的基础上,设计1对PCR引物,以番茄(中蔬四号)叶片总RNA的反转录产物为模板,扩增出长为668 bp的cDNA片段,并克隆入pMD-18 T simple载体。测序结果表明,所获得的片段为番茄液泡转化酶基因TIV1的片段;PCR和酶切分析表明,该片段已成功定向连入到双无载体pBinAR的CaMV 35S启动子和OCS终止子间,构建成反义植物表达载体pBinAR-aTIV1;菌落PCR表明质粒成功转化入农杆菌EHA105;瞬时表达证明该反义片段对番茄叶片液泡转化酶活性具有明显的抑制效果。 程智慧 吴正景 孟焕文 许小勇关键词:番茄 反转录PCR 番茄品种资源芽苗期和幼苗期的耐盐性及耐盐指标评价 被引量:95 2009年 对芽苗期和幼苗期番茄耐盐鉴定指标进行检验,明确番茄芽苗期和幼苗期耐盐性的相关性,筛选耐盐的番茄品种资源,以便为耐盐育种和栽培提供材料和方法。试验采用不同浓度的NaCl水溶液人工模拟盐胁迫,以多项指标盐害系数隶属函数值和总隶属函数值为依据,比较了20个番茄品种资源芽苗期和幼苗期的耐盐性及两个时期耐盐性的相关性,并利用单一指标盐害系数隶属函数值和总隶属函数值进行了聚类分类。结果表明:芽苗期和幼苗期番茄耐盐性有所不同,耐盐和中等耐盐材料相同率为53.85%。进行番茄耐盐性筛选时可以把发芽势、发芽率、发芽指数、萌发活力指数、下胚轴长、地上鲜重作为芽苗期耐盐鉴定指标,把地上部鲜重、根鲜重、地上部干重、根干重、壮苗指数、根/冠比作为幼苗期耐盐鉴定指标。 董志刚 程智慧关键词:番茄 芽苗期 幼苗期 耐盐性 耐盐指标 温度胁迫对番茄转化酶表达和光合特性的影响 被引量:29 2006年 以栽培番茄中杂9号品种的幼苗为试材,在昼/夜温度分别为10/5,15/10,25/20,35/30和45/40℃条件下,研究了温度胁迫对叶片及根系转化酶种类和活性以及光合特性的影响。结果表明,在温度胁迫下,幼苗生长量下降,根系和地上部鲜重降低;在低温(10/5℃)和亚低温(15/10℃)胁迫下,光合色素(叶绿素和类胡萝卜素)含量下降;在亚高温(35/30℃)胁迫下,光合色素含量上升;与常温(25/20℃)相比,温度胁迫期间,气孔导度和光合强度先下降,再升高,然后随着胁迫时间的延长又呈现逐渐下降的趋势;在持续温度胁迫下,叶片和根系中可溶性转化酶和胞壁转化酶的活性基本都呈增强的趋势。 孟焕文 程智慧 吴洋 董志刚 支玉玺关键词:温度胁迫 转化酶 光合速率 气孔导度 NaCl处理对番茄幼苗光合作用和叶绿素荧光的影响 被引量:22 2008年 以6叶期幼苗为试材,通过水培试验研究了50,100,200,400 mg/L NaCl对番茄(Lycopersicon esculen-tumMill.)叶片光合色素含量、光合速率及叶绿素荧光参数的影响。结果表明:叶片光合色素含量随盐处理时间的延长而增加,气孔导度随盐浓度的增加而降低。各处理蒸腾速率在盐处理5 d后趋于稳定,但均低于对照,且盐浓度越大,蒸腾速率越低。盐处理初期(1 d),各处理的光合速率均低于对照,且盐浓度越大光合速率越低;盐处理3 d后光合速率开始恢复,并保持相对稳定;但处理11 d或13 d后又呈现下降趋势。NaCl处理期间,各处理的Fv/Fm值与Fv/Fo值和Fo与Fm分别有相似的变化趋势,在盐处理9 d后各处理趋向接近;qN值呈下降趋势,但随盐浓度的增加而增大。 高芸 程智慧 孟焕文关键词:番茄 盐分 光合色素 光合速率 叶绿素荧光 加工番茄离体再生体系的建立 被引量:25 2007年 以加工番茄B04子叶盘和下胚轴切段为外植体,研究了不同种类和浓度的细胞分裂素(ZT、6-BA和KT)和生长素(IAAI、BA和NAA)组合及附加物AgNO3对外植体不定芽诱导的影响。结果表明,细胞分裂素ZT的不定芽诱导效果明显优于6-BA和KT,KT诱导效果最差;生长素IAA的不定芽诱导效果优于IBA和NAA;在不同的激素组合中,不定芽诱导率最高的培养基为MS+2.0 mg/L ZT+0.2 mg/L IAA。再生芽在MS+0.1mg/L IAA生根培养基上能正常生根,并发育成完整的小植株。 陈丽萍 张丽华 程智慧关键词:加工番茄 子叶 下胚轴 多聚半乳糖醛酸酶反义基因转化加工番茄 被引量:2 2014年 利用农杆菌EHA105介导转化,将PG基因转入加工番茄B04植株。通过对影响外植体转化的因素(预培养时间、侵染时间、农杆菌浓度、共培养时间)进行了深入探讨,建立了加工番茄品种B04子叶外植体的高频遗传转化体系,并通过农杆菌介导法将PG反义基因导入加工番茄品种B04,获得PG抗性植株。其最佳预培养时间为2天;当农杆菌的菌液浓度为OD600=0.6、侵染时间为10 min时转化率最高;其最佳的共培养时间为2天。对获得的41株抗卡那霉素转基因植株进行PCR检测,其中9株为阳性植株,其转化率为22%。初步证实了部分加工番茄B04植株中已导入PG反义基因。 陈丽萍 程智慧 赵根 韩明丽关键词:加工番茄 反义基因 番茄子叶愈伤组织直接分化成花及果实 被引量:1 2011年 番茄(品种‘小番茄’)的子叶经一定条件诱导产生愈伤组织,随后在愈伤组织上直接产生花蕾,并可以开花结果。结果显示离体培养中的IBA在其成花诱导中起关键作用。IBA可能是番茄成花基因的启动信号。 吴正景 程智慧 孙淑伟关键词:番茄 愈伤组织 IBA 番茄叶片糖与转化酶的日变化研究 被引量:6 2007年 为探讨转化酶在叶片糖分含量和光合作用日变化中的作用,测定了番茄(Lycopersicon esculentum L.)叶片光合速率、转化酶活性、淀粉、蔗糖、葡萄糖和果糖含量,并分别分析了12:00前后它们间的相关关系.结果表明:番茄日间叶片净光合速率在10:00和16:00出现一大一小两个高峰;6:00~18:00叶片中淀粉和果糖呈现持续升高,而蔗糖和葡萄糖为先升后降趋势;光合速率同叶片蔗糖含量和胞质转化酶活性存在高度正相关,淀粉和果糖含量同光合速率未表现出显著相关性.由此可知,胞质转化酶在蔗糖代谢方面有明显的作用;果糖可能是通过抑制胞壁转化酶活性,促进了蔗糖外运. 吴正景 程智慧 孟焕文 周艳丽 徐强关键词:番茄叶片 光合速率 转化酶 糖分 盐胁迫对番茄幼苗转化酶表达及糖代谢的影响 被引量:14 2007年 以栽培番茄(Ly cop ersicon escu lentum M ill.)品种中杂9号6叶期幼苗为试验材料,在水培条件下研究了50,100,200,400 m g/L N aC l胁迫处理对番茄幼苗根系和叶片转化酶活性表达,及叶片中葡萄糖、果糖、蔗糖和淀粉代谢的影响。结果表明,转化酶的表达水平与盐胁迫强度和时间有密切关系,根系中转化酶在50 m g/LN aC l胁迫后5和11 d,或100 m g/L N aC l胁迫5和13 d均有极显著高表达;200和400 m g/L N aC l胁迫后11 d有极显著表达;叶片对微盐和高盐伤害的抵御反应强烈,转化酶在50和400 m g/L N aC l胁迫后11 d有显著表达。与叶片中转化酶表达的胁迫强度和胁迫时间相关,叶片中葡萄糖、果糖和蔗糖水平提高;胁迫后至第11天,50,100和200 m g/L N aC l处理叶片中淀粉含量增幅随胁迫强度的增加而增大,而400 m g/L N aC l处理的增幅较小。 程智慧 高芸 孟焕文关键词:番茄 盐胁迫 转化酶 糖代谢 水培 黄瓜品种资源芽苗期和幼苗期耐盐性及其评价指标研究 被引量:30 2008年 采用NaCl水溶液人工模拟盐胁迫,以多项指标的盐害系数为依据,比较了18个黄瓜品种资源在芽苗期和幼苗期的耐盐性及其两个时期耐盐性的相关性,并对两个时期各品种资源的耐盐性通过聚类分析进行了分类。结果表明:芽苗期的总盐害系数与发芽势、发芽率、发芽指数、下胚轴长、根长、地上部鲜重、根鲜重、活力指数的盐害系数的相关性达极显著水平;幼苗期与总盐害系数相关性达极显著水平的有地上部鲜重、地下部鲜重、地下部干重、壮苗指数、根/冠,达显著相关水平的有地上部干重,叶绿素a/b和叶绿素(a+b)/类胡萝卜素的盐害系数与总盐害系数相关性不显著。从两个时期的聚类分析图来看,它们的耐盐性并不相同。黄瓜品种资源耐盐性的强弱在芽苗期和幼苗期表现明显不同。在进行黄瓜芽苗期耐盐性筛选时可以将发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数、下胚轴长、地上鲜重、根鲜重综合起来作为评价指标。在对黄瓜幼苗期耐盐性鉴定时可以用地上部和地下部鲜重、地上部和地下部干重、壮苗指标、根/冠来衡量黄瓜材料在幼苗期耐盐性的强弱。 董志刚 孟焕文 程智慧关键词:黄瓜 品种资源 芽苗期 幼苗期 耐盐性 耐盐指标