国家教育部博士点基金(20060183071)
- 作品数：3 被引量：9H指数：1
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- 紧密连接蛋白claudin-6部分通过Bax和Bcl-2途径诱导乳腺癌细胞MCF-7凋亡
- 目的探讨紧密连接蛋白claudin-6对乳腺癌细胞MCF-7细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达的影响。方法采用脂质体转染技术建立稳定过表达claudin-6的乳腺癌MCF-7细胞克隆,应用TUNEL法、DAPI...
- 吴琼刘亚芳任玥许晓明于丽娜李玉林全成实
- 关键词：乳腺癌
- 文献传递
- 稳定过表达紧密连接蛋白claudin-6对乳腺癌细胞MCF-7的生物学表型的影响
- 2010年
- 目的探讨紧密连接蛋白claudin-6过表达对乳腺癌细胞MCF-7生物学行为的影响。方法用脂质体法将含有claudin-6的真核表达载体转染乳腺癌细胞系MCF-7后，采用RT—PCR、Western印迹和细胞免疫荧光的方法进行稳定克隆的筛选和鉴定；采用MTT法和克隆形成实验检测细胞生长情况；采用划痕法和Boyden小室体外侵袭实验检测细胞迁移和侵袭性。结果建立了稳定表达claudin-6基因的4株单克隆（C1，C2，C3，C4）；细胞免疫荧光结果显示，claudin-6的表达主要定位于细胞膜；与对照组和空载体组相比，稳定表达claudin-6的MCF-7细胞生长缓慢，转染6h时吸光度A值C1为1．62，C2为1．25，C3为1．30，C4为1．58与对照组A值1．78及空载组1．82比较明显降低。其克隆形成率C1为0．25，C2为0．17，C3为0．26，C4为0．21明显低于对照组（0．53）和空载组（0．45）；细胞的迁移性、侵袭性被抑制。结论claudin-6的过表达能够抑制MCF-7细胞的生长和转移等恶性表型，说明紧密连接蛋白claudin-6作为乳腺癌表型抑制基因在乳腺癌发生及转移中起负性调控作用。
- 吴琼刘亚芳任玥许晓明于丽娜李玉林全成实
- 关键词：紧密连接部
- 人紧密连接蛋白claudin-6真核表达载体的构建被引量：1
- 2009年
- 目的构建人紧密连接蛋白claudin-6的cDNA真核表达载体。方法应用RT-PCR、T-A克隆、限制性内切酶切及亚克隆等技术将claudin-6基因全长克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)质粒中。结果酶切鉴定、PCR扩增以及序列分析表明已经将claudin-6基因全长序列克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)质粒中。结论获得了人claudin-6基因的全长cDNA片段,构建了claudin-6原核克隆载体和真核表达载体。实验中发现,中国人claudin-6基因的461位点碱基为A,而GeneBank中西班牙人claudin-6基因的461位点碱基为G,说明claudin-6基因461位点可能存在多态性。
- 吴琼刘亚芳任玥许晓明于立娜张婷张明子全成实
- 关键词：乳腺癌真核表达载体
- 紧密连接蛋白claudin-6在人乳腺癌细胞和组织中的表达及其与乳腺癌淋巴结转移的关系被引量：9
- 2008年
- 目的:探讨紧密连接蛋白claudin-6在人乳腺癌细胞株、乳腺癌组织中的表达及与淋巴结转移的关系,为判定乳腺癌淋巴结转移及估计预后提供依据。方法:应用RT-PCR和免疫组织化学S-P法,对人乳腺上皮细胞株HBL-100、低侵袭性乳腺癌细胞株MCF-7、高侵袭性乳腺癌细胞株MDA-MB231和38例人乳腺癌组织claudin-6的表达进行检测,同时以30例乳腺良性肿瘤作为对照。结果:claudin-6在HBL-100细胞株中有表达,在乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB231中均无表达;乳腺癌组织中claudin-6表达明显低于对照组(P<0.05);claudin-6表达与乳腺癌组织的病理分级及淋巴结转移有关联(P<0.05),与患者年龄和临床分期无关(P>0.05)。结论:claudin-6可能在乳腺癌的发生和转移中起一定的负性调控作用,并可作为判断乳腺癌淋巴结转移和估计预后的参考指标。
- 吴琼吴晓艳张海英刘亚芳任玥曲珊珊全成实李玉林
- 关键词：逆转录聚合酶链反应
