深圳市科技计划项目(JC201005250073A)
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 相关作者：刘志刚刘立忠朱清仙刘志强杨成彬更多>>
- 相关机构：深圳大学南昌大学南方医科大学第三附属医院更多>>
- 发文基金：深圳市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 小麦GLB 1蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
- 2014年
- 以小麦主要过敏原Glb-1蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合。采用细胞融合和有限稀释法相结合的方法快速筛选获得稳定分泌的特异性杂交瘤细胞株,用杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水并用蛋白A亲和层析法纯化抗体后检测。采用间接ELISA法鉴定该单克隆抗体的IgG亚型;通过间接ELISA鉴定该单克隆抗体的特性和交叉性。利用双单抗夹心ELISA法检测单抗的抗原表位特异性。结果表明:共获得4株可稳定分泌小鼠抗小麦主要过敏原Glb-1蛋白的单克隆抗体,分别命名为1C4、4H5、1A9、4F5,经检测其Ig亚型均为IgG1,且4株单抗效价均在10-9以上。ELISA结果分析表明该4株单抗均能特异性识别小麦主要过敏原Glb-1蛋白且和其他常见食物无交叉反应性。将4株单抗两两配对进行ELISA实验,结果发现1C4与4H5可能有不同的抗原表位,以此建立的双抗夹心ELISA系统可以检测小麦Glb1-G3蛋白。实验成功制备了鼠抗小麦主要过敏原Glb-1蛋白抗原的单克隆抗体,并且建立了双单抗夹心ELISA检测系统,为小麦主要过敏原蛋白的检测奠定了基础。
- 孔令超杨成彬詹政科刘志强刘立忠刘志刚朱清仙
- 关键词：蛋白单克隆抗体免疫学鉴定
- IgA肾病患者血清6种常见过敏食物特异性抗体的检测被引量：4
- 2014年
- 目的初步探讨6种常见过敏食物的主要过敏蛋白与IgA肾病发病的关系。方法采用ELISA双抗体夹心法检测并比较31例IgA肾病患者及80例健康体检者血清中6种常见过敏食物的主要过敏蛋白特异性的IgA1、IgG及IgE水平,并对所有病人进行食物过敏情况问卷调查,观察多种食物抗体水平均明显升高的患者的临床特征。结果 IgA肾病组患者血清中6种常见过敏食物的主要过敏蛋白特异性的IgA1及IgG水平均显著高于健康对照组(P<0.05)。两组中均未检测到食物特异性的IgE。所有病人均无明确的食物过敏史。多种食物(大于4种)特异性IgG抗体水平均明显升高的患者均有蛋白尿。结论某些食物尤其是高致敏性食物在IgA肾病的发病及进程中可能伴有重要角色。
- 周朝敏刘志刚眭维国谷东风李永强邹和群
- 关键词：IGA肾病
- 动物源性食物抗原与糖尿病的相关性研究
- 2013年
- 目的探讨动物源性食物抗原与糖尿病的关系。方法选择糖尿病患者(糖尿病组)29例,其摄入动物源性食物(鱼、虾、牛奶和鸡蛋)后,采集血清。采用食物抗原包被ELISA法检测糖尿病组血清免疫球蛋白G(IgG)水平,ELISA法检测糖尿病组血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和干扰素-γ(IFN-γ)水平,并与正常对照组进行比较。结果 29例患者中,大量摄入虾的有4例(13.79%),大量摄入牛奶的有11例(37.93%),大量摄入鱼的有22例(75.86%),大量摄入鸡蛋的有19例(65.52%)。糖尿病组血清IgG、TNF-α、IL-1β和IFN-γ水平均较正常对照组显著升高(均P<0.05)。结论特异动物源性食物可引发体内炎性反应,炎性反应过程产生的炎性因子与糖尿病的发生存在密切关系。
- 孔令超刘立忠刘志强杨贵杨成彬朱清仙刘志刚
- 关键词：糖尿病免疫球蛋白G肿瘤坏死因子-Α白细胞介素-1Β干扰素-Γ
- 甜荞麦16kDa过敏原基因的克隆及其原核表达载体的构建
- 2012年
- 目的对甜荞麦(common buckwheat)过敏原的分子生物学开展研究。方法通过RT-PCR克隆甜荞麦16kDa过敏原蛋白的全长基因,并根据序列设计带有酶切位点的特异性引物,扩增甜荞麦16kDa过敏原基因的完整开放阅读框,与pET-28a载体连接,构建原核表达载体。结果本研究成功克隆了甜荞麦16kDa过敏原蛋白的基因,且构建了其原核表达载体。该基因含有长度为450bp的开放阅读框,编码149个氨基酸,在GenBank数据库中的登录号为EU883600,同源性分析发现其与数据库中已知的荞麦过敏原基因有高度的同源性。结论本研究为甜荞麦16kDa过敏原蛋白的重组表达和临床过敏性疾病的诊断奠定了基础。
- 刘晓宇王晓娟吴海强杨波刘志刚
- 关键词：甜荞麦克隆原核表达载体
