国家自然科学基金(30972449) 作品数:6 被引量:17 H指数:2 相关作者: 叶萌 刘秉慈 贾效伟 张夏男 李跃纲 更多>> 相关机构: 中国疾病预防控制中心 北京市疾病预防控制中心 唐山市疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 环境科学与工程 生物学 更多>>
活化蛋白-1和细胞周期蛋白在石英诱导的细胞周期改变中的作用 被引量:1 2011年 目的探讨在石英刺激的人胚肺成纤维细胞(HELF)中AP-1/细胞周期蛋白DI(cyclin D1)通路在细胞周期改变中的作用。方法建立稳定转染空载体PXJ的HELF系(HELnPXJ)及空载体PXJ与反义cyclinD1质粒或反义细胞周期蛋白依赖激酶(CDK4)质粒分别共转染的HELF系(简称anti—D1和anti—K4),将HELF—PXJ、anti—D1和anti—K4细胞分为对照组和石英刺激组(共6组),各对照组不加任何处理,石英刺激组用200Ixg/ml石英处理细胞24h。检测AP-1对石英诱导的cyclinD1、CDK和E2F-4表达改变的影响。AP-1的化学抑制剂姜黄素(curcumin)20μmlol/L预处理细胞1h后,200μg/ml石英刺激24h,将HELF分为4组,分别为HELF对照组、HELF+石英组、HELF+curcumin对照组、HELF+cur—cumin+石英组。用免疫印迹(Western blot)法和免疫荧光法检测cyclinD1、CDK4和E2F-1/4蛋白表达;运用反义RNA技术证明通路的上下游关系;用流式细胞术检测细胞周期变化。结果200μg/ml石英处理HELF细胞,cyclinD1和CDK4蛋白表达升高,E2F-4蛋白表达明显降低,而E2F-1蛋白的表达没有明显改变。HELF—PXJ+石英组G。期细胞所占比例下降,S期细胞所占比例升高,与HELF—PXJ对照组的差异有统计学意义(P〈0.05)。抑制cyclinD1或CDK4表达后,与对照组比较,anti—D1+石英组和anti—K4+石英组G1期细胞和S期细胞百分比无明显变化。抑制AP-1活性,与HELF+石英组比较,HELF+curcumin+石英组cyclinD1和CDK表达均减低,E2F-4表达增多。结论200μg/ml石英可诱导cvclinD1和CDK4蛋白表达增高,E2F-4蛋白表达减少,并通过AP-1/cvclinD1通路诱导细胞周期改变。 贾效伟 刘秉慈 叶萌 刘海峰 张凤梅关键词:石英 成纤维细胞 细胞周期蛋白D1 细胞周期 铜蓝蛋白在石英诱导的PI3K/PTEN信号通路中的作用 被引量:4 2014年 目的 探讨铜蓝蛋白(Ceruloplasmin,Cp)在石英诱导的人胚肺成纤维细胞(HELF)中PI3K/PTEN信号通路改变中的作用.方法 建立稳定转染空载体pGenesil1.1的HELF细胞及pGenesil 1.1与shRNA PTEN质粒共转染的HELF细胞(简称PT),复苏转染p85显性失活突变体质粒的HELF细胞(简称DN-p85).实验中石英浓度为100 μg/ml,Cp浓度为10、20、30 μg/ml,Cp在石英作用1h后加入.在HELF、PT和DN-p85 3个不同细胞系中,分别设立对照组、石英染毒组、石英+不同浓度Cp组.用噻唑蓝(MTT)比色法观察分别抑制PTEN和p85后,Cp对石英诱导的HELF细胞增殖的影响.蛋白免疫印迹(Western blot)实验检测PTEN、p85、p110、AKT及AKT308位点和AKT473位点磷酸化水平、总ERK、JNK及其磷酸化水平的变化.结果 抑制PTEN后,100 μgml石英与30 μg/ml Cp共同诱导的p85蛋白水平增加被明显抑制(P<0.05),p110蛋白水平无变化(P>0.05).抑制p85后,石英以及石英+不同浓度Cp诱导的细胞增殖加快被抑制;100 μg/ml石英与30 μg/ml Cp共同诱导的AKT308位及AKT473位磷酸化水平、总ERK、磷酸化ERK和磷酸化JNK水平的增加低于相应的对照组(P<0.05),但是总JNK水平的变化没有统计学差异(P>0.05).结论 Cp通过PI3K/AKT/MAPK信号通路参与石英诱导的HELF细胞增殖,PTEN可以影响PI3K调节亚单位p85蛋白水平. 张夏男 李跃纲 贾效伟 刘秉慈 叶萌关键词:铜蓝蛋白 石英 PTEN PI3K 人胚肺成纤维细胞 煤矿煤尘职业健康风险评估方法的应用比较 被引量:8 2020年 目的通过大样本比较国际采矿与金属委员会定量评估法和职业危害风险指数法在煤矿煤尘职业健康风险评估中的应用效果。方法选取11座煤矿6个生产系统的煤尘作业岗位作为评估对象,通过两种风险评估方法分别对196个岗位进行评估,分析两种方法评估结果的差异与相关性。结果两种方法的评估结果呈较好的正相关性(r=0.611,P<0.05),最高风险级别的作业岗位主要聚集在煤炭开采企业的采煤、掘进生产系统。两种方法评估结果相近岗位多为风险等级较低的岗位,在风险等级较高岗位的评估结果中存在较大分歧。结论国际采矿与金属委员会定量评估法可较好地反映工作环境中煤尘的暴露风险水平,职业危害风险指数法更能反映出劳动者在得到防护设施保护后实际接触的风险水平。 张思雨 汉锋 叶萌 陈永青关键词:煤矿 煤尘 Occupational Dust Hazards and Risk Assessment of Coal-Fired Thermal Power Plants of Different Capacities—China,2017–2019 被引量:2 2021年 Summary What is already known about this topic?Silica dust and coal dust are the main occupational hazards in coal-fired thermal power plants,which mainly exist in coal transportation workplaces,combustion milling workplaces,and ash removal workplaces.What is added by this report?The overall environmental and personal dust exposure levels decrease with an increase in the capacity of coalfired thermal power plants. Xin Wang Weijiang Hu Siyu Zhang Ning Kang Hongfei Wang Yiwen Dong Hongying Bian Ye Meng关键词:OCCUPATIONAL COAL TRANSPORTATION 铜蓝蛋白/PTEN 在石英致组蛋白修饰改变中的作用 被引量:1 2014年 目的探讨铜蓝蛋白(Cp)在石英诱导的人胚肺成纤维细胞(HELF)组蛋白修饰改变中的作用以及人第十号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)在其中的影响。方法不同浓度的石英(50、100、200μg/ml)和不同浓度的Cp(10、20、30μg/ml)作用HELF细胞24 h,用蛋白免疫印迹(Western Blot)实验检测蛋白质赖氨酸乙酰化(acety-lys)水平以及组蛋白H2B、H3、H4乙酰化和H3甲基化水平。200μg/ml石英作用于HELF细胞和转染PTEN shRNA的HELF细胞(PT)1 h后,加入30μg/ml Cp作用24 h,用Western blot检测acety-lys水平,组蛋白H2B、H3、H4乙酰化和H3甲基化水平。结果石英暴露可诱导蛋白质acety-lys水平的增高,组蛋白H2B(lys5/12)、H3(lys9/14)、H4(lys12)乙酰化水平增加,组蛋白H3的2位精氨酸的甲基化水平降低。Cp可以逆转石英暴露所致的蛋白质acety-lys水平的增加,组蛋白H3、H4赖氨酸乙酰化水平的增加和组蛋白H3甲基化水平的减少。抑制PTEN的水平后,观察不到Cp对上述现象的逆转。结论 Cp可以逆转石英暴露诱导的组蛋白乙酰化和甲基化改变,PTEN参与了Cp对石英诱导的组蛋白修饰作用的改变。 张夏男 李跃纲 贾效伟 刘秉慈 叶萌关键词:石英 PTEN 组蛋白修饰 铜蓝蛋白 石英通过丝裂素活化蛋白激酶通路引起人胚肺成纤维细胞周期的改变 被引量:1 2011年 目的 探讨在石英刺激的人胚肺成纤维细胞(human embryo lung fibroblasts,HELF)中细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、应激活化蛋白激酶(JNK),细胞周期蛋白DI(cyclin D1)通路在石英诱导的细胞周期改变中的作用.方法 建立稳定转染转录因子AP-1荧光素酶报告基冈质粒的HELF系(HELF-AP-1)及AP-1荧光素酶报告基因质粒与丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)显性失活突变体质粒(DN-ERK、DN-JNK和DN-p38)分别共转染的HELF系(简称DN-ERK、DN-JNK和DN-p38).将HELF-AP-1、DN-ERK、DN-JNK和DN-p38细胞分为对照组和石英组(共8组),各对照组不加任何处理,石英组用200 μg/ml石英处理HELF细胞24 h.用免疫印迹(Western blot)法和免疫荧光法检测cyclin D1、细胞周期蛋白依赖激酶4(CDK4)和E2F-4蛋白表达;采用显性失活突变体技术验证MAPKs信号转导通路的上下游关系及其与细胞周期的关系;用流式细胞术检测细胞周期变化.结果 HELF-AP-1+石英组G1期细胞所占比例下降,S期细胞所占比例升高,与HELF-AP-1对照组的差异有统计学意义(P<0.05).抑制ERK或JNK表达后,与HELF-AP-1对照组比较,DN-ERK+石英组和DN-JNK+石英组G1期细胞百分比无明显变化.抑制p38后,DN-p38+石英组G1期细胞百分率明显下降,与HELF-AP-1对照组的差异有统计学意义(P<0.05).与HELF-AP-1石英组比较,DN-ERK+石英组和DN-JNK+石英组CDK4表达降低和E2F-4表达增多,而DN-p38+石英组CDK4表达和E2F-4表达没有改变.与HELF-AP-1+石英组比较,DN-ERK+石英组和DN-JNK+石英组cyclin D1表达降低,而DN-p38+石英组cyclin D1没有改变.结论 ERK和JNK通过cyclin D1和CDK4介导石英诱导的HELF的细胞周期改变,而石英诱导的细胞周期改变与p38无关. 贾效伟 刘秉慈 叶萌 刘海峰 张凤梅关键词:石英 成纤维细胞 细胞周期 信号传递