国家自然科学基金(81001186)
- 作品数：31 被引量：94H指数：5
- 相关作者：曹旭晨张斌冯炜红张月李媛媛更多>>
- 相关机构：天津医科大学教育部天津市肿瘤防治重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Met抑制剂XL-880对乳腺癌MDA-MB-231细胞的放疗增敏作用
- 2013年
- 目的研究Met抑制剂XL-880对Met阳性乳腺癌MDA—MB-231细胞系放疗增敏作用。方法依照对细胞不同处理设立对照组、单纯放疗组、XL-880单药组和XL-880联合放疗组。流式细胞术检测不同处理组的细胞早期凋亡率及周期变化，克隆形成试验研究不同处理对肿瘤细胞增殖的影响；Westernblot检测细胞周期和凋亡相关蛋白的表达变化和Met通路相关蛋白表达水平的改变。结果对照组、单纯放疗组、XL-880单药组和XL-880联合放疗组各组克隆数目分别为（41．3±8．2）个、（18．6±2．4）个，（10．6±2．9）个和（0．8±0．2）个，联合组与对照组、单纯放疗组及单药组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。XL-880处理的MDA—MB-231细胞放疗后48h，各组G2／M期细胞所占比例分别为（17．3±1．3）％，（20．0±4．0）％，（28．5±3．1）％，（57．0±3．3）％，G2／M期阻滞增加的差异均有统计学意义（均P〈0．05），AnnexinV／PI双染试验中各组细胞的早期凋亡率分别为（7．3±0．9）％、（14．1±0．6）％、（35．5±4．4）％、（48．2±5．3）％，凋亡率明显升高（均P〈0．05）。XL-880抑制了放疗后细胞Met磷酸化水平，同时抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少，凋亡相关蛋白Caspase-3和PARP蛋白剪切增加。结论XL-880可通过抑制Met通路进而影响下游CyclinB1水平而对Met阳性乳腺癌细胞系MDA—MB-231产生放疗增敏作用。
- 耿文文张斌李丹华梁新瑞曹旭晨
- 关键词：乳腺肿瘤放射疗法
- 吉非替尼对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移运动的影响被引量：4
- 2012年
- 目的观察吉非替尼对人表皮生长因子受体（EGFR）高表达的三阴性乳腺癌（TNBC）细胞系MDA．MB-231迁移能力的影响。方法采用Westernblot法检测不同浓度吉非替尼作用MDA-MB-231细胞后EGFR和Akt磷酸化水平；采用划痕实验和Boyden小室趋化实验观察吉非替尼对细胞迁移、趋化能力的影响；采用免疫荧光染色观察吉非替尼对细胞骨架重构及极性变化的影响。结果与对照组（OμmoVL吉非替尼）相比，不同浓度的吉非替尼可有效抑制EGFR及其下游通路关键蛋白的磷酸化水平，呈明显的量效关系。划痕实验24h后，0、0．1、1、10、20μmoL／L吉非替尼组细胞迁移距离分别为（36．3．4-4．0）μm、（30．3±3．8）μm、（26．8±3．3）μm、（17．0±2．6）μm和（11．04-2．5）μm；Boyden小室趋化实验3．5h后，0、0．1、1、10、20Dmol/L吉非替尼组的穿膜细胞数分别为（69．2±7．0）个、（51．8±7．5）个、（43．8±8．7）个、（30．6±4．8）个和（28．4±3．4）个。吉非替尼可明显延长划痕愈合时间，减少趋化穿膜细胞个数，差异有统计学意义（P〈0．05）。吉非替尼可明显减少细胞片状伪足的形成，抑制细胞骨架的重构及极性变化。结论吉非替尼可以通过抑制TNBC细胞系MDA-MB-231中EGFR／P13K／Akt通路的磷酸化水平，抑制细胞骨架蛋白（微丝）的重构及极性改变，从而降低细胞的迁移运动能力。
- 赵洪猛张斌李越张霖张飞宋艳群冯炜红曹文枫曹旭晨
- 关键词：乳腺肿瘤表皮生长因子受体吉非替尼细胞运动
- ZM447439对乳腺癌T47D细胞生长和细胞周期的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:研究Aurora激酶抑制剂ZM447439对体外培养的人乳腺癌细胞T47D生长和细胞周期各时相的影响。方法:采用四甲基偶氮唑盐法测定ZM447439对乳腺癌T47D细胞增殖的影响;克隆形成实验检测ZM447439对T471D细胞增殖的影响;流式细胞术检测ZM447439对乳腺癌T47D细胞周期各时相的影响。Western blot检测ZM447439对Aurora A,p-AuroraA,HistoneH3,p-HistoneH3以及CytlinBl的影响。结果:不同浓度的ZM447439处理T47D细胞24、48、72h明显抑制T47D细胞增殖,IC50分别为(9.604±0.982)Iμmol/L、(3.413±0.533)Iμmol/L、(0.620±0.208)μmol/L;经药物作用24h后,贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落;克隆形成率由(93.00±2.65)%降至0%;流式细胞术显示G_0/G_1期细胞由(50.50±1.71)%降至(6.30±0.17)%,S期细胞由(32.50±2.70)%降至0%,G_2/M期细胞由(17.00±4.39)%升高至(93.70±0.17)%,G_2/M期的阻滞呈现剂量依赖性:Westem blot显示Aurora A、HistoneH3无明显趋势变化,p-AuroraA、p-HistoneH3、CyclinBl随着浓度的增加而减少,都呈现一定的剂量依赖性。结论:ZM447439可抑制T47D细胞生长,产生G_2/M期阻滞。
- 张月张斌冯炜红李媛媛曹旭晨
- 关键词：乳腺癌AURORA增殖
- 黑黄胶囊治疗美菲康所致便秘的临床观察被引量：1
- 2013年
- [目的]探讨黑黄胶囊治疗美菲康所致便秘的临床价值。[方法]72例服用美菲康出现便秘的肿瘤患者随机分为治疗组(36例)和对照组(36例)。治疗组服用黑黄胶囊(药物组成:黑豆、马齿苋、生大黄、肉苁蓉、干芹菜),由天津北辰医院制剂室制成胶囊,每粒含生药0.5 g,每次6粒,每次饭前15 min温开水送服,每日2次。治疗期间停用其他各种通便药。对照组服用麻仁丸9 g,每日早晚口服。14 d为1个疗程,连续服药1个疗程后观察疗效。[结果]在便秘治疗的有效率及便秘伴随临床症状改善情况两方面比较,治疗组明显优于对照组,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]黑黄胶囊能够有效治疗美菲康所致便秘,值得临床推广。
- 胡永进杜学明许建辉吴春娃
- 关键词：便秘阿片类药物中医药疗法
- Aurora激酶抑制剂对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响被引量：5
- 2012年
- 目的观察Aurora激酶抑制剂VX-680对人乳腺癌MDA—MB-231细胞株增殖和凋亡的影响。方法不同浓度的VX-680处理MDA—MB-231细胞，倒置显微镜下观察细胞形态变化，用噻唑蓝（M1Tr）比色法和克隆形成实验检测乳腺癌细胞增殖，碘化丙锭（PI）单染法榆测细胞周期，免疫荧光观察核和纺锤体形态变化，免疫印迹法检测AuroraA／B蛋白、组蛋白和凋亡相关蛋白表达，Yo—Pro-1荧光染色观察细胞凋亡形态学变化。结果VX-680显著抑制MDA—MB-231增殖，24、48h半数抑制浓度（Ic50）分别为（2．362±0．599）、（0．102±0．556）μmol／L；经药物作用24h后，贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落；克隆形成率由（93．00±0．03）％降至（0．01±0．01）％，G0／G1期细胞由（51．27±0．75）％降至（5．87±0．49）％，G2／M期细胞由（17．67±1．25）％升高至（91．93±1．96）％，荧光染料法显示凋亡细胞数由（4．33±0．03）％增高至（44．00±0．04）％，实验组与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）；细胞核与纺锤体结构紊乱；免疫印迹检测提示磷酸化AuroraA／B、磷酸化Histone H3表达水平降低，Caspase-3和PARP被剪切。结论VX-680抑制乳腺癌细胞MDA—MB-231增殖、诱导凋亡呈剂量依赖性。
- 张月张斌冯炜红李媛媛刘博文曹旭晨
- 关键词：乳腺癌AURORA增殖脱噬作用
- SB939诱导乳腺癌细胞周期阻滞和凋亡的作用及机制被引量：2
- 2012年
- 目的观察组蛋白去乙酰化酶（HDAC）抑制剂SB939对乳腺癌细胞株T47D和MDA—MB-231增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法不同浓度SB939处理细胞后，用噻唑蓝（MTY）比色法检测对细胞增殖影响；碘化丙锭（PI）染色法检测细胞周期变化；膜联蛋白V（AnnexinV）／PI双染法检测细胞凋亡；Westernblot检测聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）等蛋白表达水平；实时定量聚合酶链反应（ReM-timePCR）检测p21及细胞周期蛋白（Cyclin）B1mRNA水平。结果SB939明显抑制上述两种细胞增殖，24h半数抑制浓度（IC50）分别为（2．721±0．320）、（5．647±0．470）μmoL／L；1μmoL／L药物作用细胞24h，G2／M期比例增加，分别为（21．20±1．90）％、（28．35±2．25）％，凋亡细胞比例增加，分别为（37．60±1．34）％、（34．40±1．77）％，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；PARP剪切明显增加，bax、p21表达增多，B淋巴细胞／白血病-2（bcl-2）、cdc2、细胞周期蛋白（Cyclin）B1表达减少；p21mRNA水平增加，CyclinB1mRNA水平减少。结论SB939在体外条件下能够明显抑制乳腺癌细胞增殖，诱导细胞周期阻滞及促进细胞凋亡，并呈明显的量效关系。
- 李媛媛张斌张月冯炜红赵洪猛曹旭晨
- 关键词：乳腺肿瘤细胞周期细胞凋亡
- PHA739358抑制乳腺癌细胞增殖、诱导凋亡的分子机制被引量：2
- 2012年
- 目的 研究Aurora激酶抑制剂PHA739358抑制人乳腺癌T47D细胞增殖、诱导凋亡的分子机制.方法 用四甲基偶氮唑盐法（MTT法）评价PHA739358对T47D细胞增殖的影响；免疫荧光法观察染色体、核的变化；流式细胞术检测细胞周期阻滞和凋亡率；Western印迹检测AuroraA、pAurora A、Histone H3、p-Histone H3,周期特异性指标Cyclin B1,周期调节性指标Cdc2、Cdc25c、p-Cdc2、p-Cdc25c,凋亡诱导指标p21、p53,凋亡相关指标PARP、Bcl-2、Bax.结果 不同浓度的PHA739358处理细胞24h、48 h后,明显抑制T47D的增殖,IC50分别为（3.44±0.54） μ,mol/L、（0.21±0.67）μmol/L,核与纺锤体形态发生明显变化,G2/M期阻滞增加呈剂量依赖性,Western印迹显示Aurora A、Histone H3、Cdc2、Cdc25c无明显趋势变化,p-AuroraA、p-Histone H3、CyclinB1、Bcl-2随着浓度的增加而减少,p-Cdc2、p-Cdc25c、P21、P53、Bax、PARP随着浓度的增加而增加.流式细胞术凋亡率由0.31％ ±0.03％增加到40.6％±0.81％.结论 PHA739358抑制乳腺癌细胞T47D增殖、诱导凋亡的分子机制为乳腺癌治疗提供了新思路.
- 张月张斌冯炜红李媛媛曹旭晨
- 关键词：乳腺肿瘤细胞增殖细胞凋亡
- 自噬与肿瘤治疗被引量：1
- 2011年
- 自噬是细胞内蛋白、细胞器降解的渐变过程。目前，自噬性细胞死亡被认为是第Ⅱ类程序化细胞死亡。对肿瘤细胞自噬的抑制可导致不同的结果——生存或死亡，因此自噬是细胞死亡机制还是细胞保护机制存在争议。总的来说，对自噬的利用可推动新的肿瘤治疗方法的进展。
- 陈祖锦张斌曹旭晨
- 关键词：自噬肿瘤
- 树突状细胞免疫治疗的新进展
- 2011年
- 树突状细胞（DC）为目前发现的体内最强的专职抗原提呈细胞，但在体内并不能进行充分的交叉提呈。目前可通过在体外制备DC疫苗或者与化疗等促凋亡治疗联用的方法，增强DC的抗原提呈能力，提高机体免疫系统的抗肿瘤作用。
- 刘博文张斌曹旭晨
- 关键词：树突细胞抗肿瘤药免疫疗法
- 芹菜素诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞系非P53依赖性凋亡的研究被引量：9
- 2013年
- 目的:探讨芹菜素(Apigenin)对乳腺癌MDA-MB-231细胞系凋亡的影响。方法:常规培养MDA-MB-231细胞,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法评价芹菜素对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响。荧光染色法观察细胞形态学变化。流式细胞术(FCM)Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率。Western blot检测不同浓度芹菜素对Caspase-3,PARP,突变型P53,P73,PIG3,Bax,Bcl-2等凋亡相关蛋白表达的影响。RNA干扰技术检测P73对凋亡及下游靶基因PIG3表达的影响。结果:MTT结果显示,芹菜素10、20及40μM分别处理细胞24 h,发现芹菜素可有效抑制MDA-MB-231细胞增殖,且具有浓度依赖性和时间依赖性,实验组与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05),两组组间比较差异具有统计学意义(P<0.05);荧光染色结果显示,对照组未观察到凋亡细胞,芹菜素10μM、20μM及40μM组细胞中均可见凋亡小体,其数目随芹菜素浓度的增加而逐渐增加,具有浓度依赖性;流式细胞术结果显示,与对照组比较,芹菜素10μM,20μM及40μM组早期凋亡率逐渐增加,呈明显的量效关系,实验组与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示,与对照组相比,芹菜素10μM、20μM及40μM组Caspase-3、PARP剪切带含量明显增加,P73、PIG3及Bax表达增加,而突变型P53与Bcl-2表达减少,且具有浓度依赖性。RNA干扰结果显示,与阴性对照组相比,p73-siRNA可有效抑制芹菜素诱导的PIG3表达,Caspase-3和PARP剪切含量也相应降低,实验组与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:芹菜素可通过非P53依赖性凋亡有效抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,其机制可能与下调突变型p53表达,上调P73介导的PIG3表达,以及Bax/Bcl-2比值增加有关。
- 张伟然张斌刘博文曹旭晨
- 关键词：芹菜素乳腺癌凋亡突变型P53
